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Instituto Inmaculada Concepción Valdivia Departamento de Ciencias y Educación Tecnológica Biología GUIA DE APRENDIZAJE DE BIOLOGIA IV AÑO E.M. Objetivos Capacidad: Razonamiento Lógico, Analizar Destrezas.: Expresar, Identificar, Interpretar, Describir, Determinar VALOR: Verdad Actitud: Honestidad Contenido: Transcripciòn del ADN El flujo de la información genética en las células normalmente es: ADN ARN Proteína La síntesis de ARN usando un ADN patrón es llamada transcripción, mientras que la síntesis de proteína a partir de un ARN patrón es llamado traducción. Clases de ARN. Existen tres clases de ARN: - ARN mensajero (mARN) ARN de transferencia(tARN) ARN ribosomal (rARN) En general, todos estos ARN son de hebra simple, pero el ARN de transferencia y ARN ribosomal, contienen extensas regiones de doble hélice (la cadena de nucleótidos se dobla formando una horquilla o loop). Los ARN más pequeños son los tARNs, que contienen alrededor de 75 nucleótidos, mientras que el más grande esta entre los mARN, que pueden tener más de 5.000 nucleótidos. Ribosómico (rRNA): los diversos rRNA, junto con sus proteínas asociadas, constituyen los ribosomas que intervienen en la síntesis proteica. Representa el 70% del RNA celular; mientras que sus precursores (45S), presentes en el núcleo representan el 5% del RNA celular. - Mensajero (mRNA): las diferentes secuencias de los nucleótidos que constituyen los múltiples mRNA de la célula determinan las cadenas polipeptídicas que se sintetizarán en los ribosomas. La proporción de mRNA varía mucho dependiendo del tipo decelula y momento funcional. Por término medio representa el 3% del RNA celular y sus precursores (hnRNA) el 7%. Cuando lleva la información para una sola proteína, se denomina monocistrón, y policistrón, si lleva información para más. - De transferencia (tRNA): los diversos tRNA transportan los diferentes aminoácidos hacia los ribosomas en la síntesis proteica. Constituyen el 15% del RNA celular. Enzima de la síntesis Todos los ARN celulares son sintetizados por la ARN polimerasa de acuerdo a las instrucciones dadas por un ADN-patrón (o molde), empleando ribonucleósido-5’trifosfatos como sustrato. La dirección de la síntesis de ARN es 5’3’, similar a la síntesis de ADN. Cuando una parte de la información contenida en la molécula de ADN debe ser utilizada en el citoplasma de la célula para la construcción de las proteínas, ella es transcrita bajo la forma de una pequeña cadena de ácido ribonucléico: el ARN mensajero (ARNm) utilizando las mismas correspondencias de base que el ADN visto anteriormente, pero con la diferencia ya señalada de que la timina es reemplazada por el uracilo. Uno a uno se van añadiendo los ribonucleótidostrifosfato en la dirección 5´a 3´, usando de molde sólo una de las ramas de la cadena de ADN y a la ARN polimerasa como catalizador. La operación de trascripción no puede tener lugar salvo que dos secuencias particulares estén presentes en el ADN: la promotora al comienzo de la secuencia, que es distinta en las eucariotas y en los procariotas, y la de corte propiamente dicha conocida como cola de poli A (compuesto de hasta 200 nucleótidos de adenina)-, que en las procariotas sólo existe al final de la secuencia. Transcripción en Eucariontes La maquinaria transcripcional de eucariontes es más complejo que en procariontes. Una importante consideración es que en eucariontes superiores solamente una pequeña proporción del genoma es expresada a ARN (cerca de 10% como máximo). Una considerable proporción del genoma de eucariontes existe permanentemente como cromatina (ADN cromosomal) altamente condensada y es transcripcionalmente inerte. Adicionalmente, hay proteínas accesorias específicas llamadas FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN y son requeridos para una transcripción eficiente de todos los genes de eucariontes. La secuencia de una transcripción la podemos resumir en: La RNA polimerasa se une al DNA en una secuencia específica “secuencia promotora o promotor”. Los promotores tienen secuencias de nucleótidos definidas, como la cajas "TATA" y "TTGACA". Los promotores se localizan en los extremos 5'-terminales de los genes. Se Abre la doble hélice en una pequeña región, por acción de la enzima Helicasa, quedando expuestos los nucleótidos de una secuencia corta de DNA. La ARN polimerasa se une a las secuencias de dichos promotores iniciando el proceso de la transcripción. La enzima añade nucleótidos , desenrrollando la doble hélice y exponiendo así nuevas regiones con las que se aparearán los ribonucleótidos complementarios . Después de que en el núcleo se ha completado la transcripción, los transcripto de RNA (primarios) se modifican antes de abandonar el núcleo para unir el RNAm al ribosoma y evitar su degradación. Algunas diferencias importantes que se pueden mencionar entre el proceso de transcripción del mRNA para procariotas y eucariotas son: En procariotas las moléculas de mRNA se producen directamente por transcripción del DNA, en eucariotas superiores, la mayor parte de los transcriptos sufren un procesamiento posterior a la transcripción (llamada splicing del DNA) antes de dejar el núcleo o ingresar al citoplasma. En procariotas, hay un único tipo de RNA polimerasa que, en realidad, es un gran complejo multienzimático asociado con varias proteínas que participan en diferentes momentos de la transcripción. La RNA polimerasa a diferencia de la DNA polimerasa , no requiere cebador para comenzar la síntesis de RNA , ya que es capaz de iniciar una nueva cadena uniendo dos ribonucleótidos. Se sabe que solo una de las cadenas es transcripta por cada gen. ¿ Qué es lo que indica a la RNA polimerasa cual secuencia copiar?. Se ha demostrado que la responsable de esta decisión es la secuencia promotora cuya orientación particular apunta” a la RNA polimerasa en la dirección en la que debe efectuar la síntesis. El mRNA transcripto a partir del DNA es, entonces, la copia activa de la información genética. Incorporando las instrucciones codificadas en el DNA, el mRNA dicta la secuencia de aminoácidos en las proteínas. Trabajo con Alegría y honestidad A continuación con ayuda del texto guía y apuntes complementarios desarrolla las siguientes estrategias 1. Expresar en forma breve y precisa, el proceso que representa la imagen adjunta, utilizando vocabulario adecuado al subsector de biología, trabajando con honestidad. 2. Identificar la hebra complementaria del siguiente fragmento de DNA y el RNAm que se obtiene a partir de ella completando dichas secuencias. ACTCGCGTAAATCAGCCGCGGTA ADN COMPLEMENTARIO: ARN MENSAJERO : 3.- Identificar los conceptos que completan las siguientes textos referidos a la transcripción. 5'-3' - Elongación polimerasa Iniciación - Terminación - polimerasa - promotor Maduración exones - RNA-ligasa intrones - poli-A - RNApoli-A - ribonucleoproteína pequeña nuclear La transcripción se lleva en las siguientes etapas: 1.-…………………………… : La……………………………… se une a una zona del DNA previa al DNA que se quiere transcribir llamada………………………… ; a continuación se corta la hebra de DNA y se separan las dos cadenas, iniciándose el proceso de copia del DNA a transcribir; esta copia no requiere ningún cebador; los ribonucleótidos se añaden en sentido…………………………………….. . 2.-…………………………………… : La RNA-polimerasa continúa añadiendo ribonucleótidos complementarios al DNA hasta que se llega a una determinada secuencia que indica a la polimerasa el final de la zona a transcribir. 3.-………………………………………. : La transcripción finaliza, y al RNA recién formado se le añade una cola de unos 200 nucleótidos de adenina, la cola de………………………………. , añadida por la enzima…………………………………… , que sirve para que el RNA no sea destruido por las nucleasas celulares. 4.-………………………………… de los productos de la trancripción: Se da en el núcleo de eucariotas y la realiza la enzima………………………………………. (RNPpn) eliminando los…………………………… del RNA, quedando los…………………………………. libres para ser unidos por una . 3.- Identificar cuales de los siguientes elementos participan en la transcripción del DNA y señalar su función. Trabaje con Honestidad. Transcripción DNA Nucleótidos trifosfato Una molécula de DNA DNA-polimerasa RNA-ligasa Helicasas Poli-A polimerasa Desoxirribonucleótidos Ribonucleótidos RNA-transferentes RNA-ribosómicos Ribonucleoproteína pequeña nuclear RNA-polimerasa 4.- Interpretar la imagen adjunta señalando: A. Lo que representa B. Cuál es el significado de la información que proporciona. 5. Interpretar las imágenes de transcripción respondiendo las siguientes preguntas en el espacio en blanco. A. A. ¿Qué sentido tiene la hebra de templado? B. ¿Cuál es la función de la RNA polimerasa? C. ¿Cuál es el sentido del transcripto? D. Cuál es la función del sitio activo? E .¿De qué manera se relaciona la ADN polimerasa con la ARN polimerasa? B: A¿Cuál es la secuencia de inicio y cuál de término? C. ¿Qué función realiza la enzima girasa? d..¿Qué estructuras participan en este proceso de transcripción? 6.- Describir como es la estructura de un gen en eucariotas, a partir de la siguiente utilizando imagen los conceptos que corresponden. 7.- Determinar si en la imágen referida a la estructura de un gen existe algún error, fundamentando la respuesta 8.-A Determinar qué tipo de proceso se muestran en las imágenes y el tipo de célula en la cual se realiza fundamentando la respuesta. B. Determinar lo que representan cada uno de los números y letras 10. Interpretar tabla de datos experimentales para resolver el siguiente problema Se obtiene una muestra de DNA, se transcribe a mRNA y se purifica. Se separan entonces las dos hebras del DNA y se analiza la composición de bases de cada hebra del DNA y del mRNA. Se obtienen los datos recogidos en la tabla de la derecha. ¿¿Qué hebra del DNA es la hebra transcrita, que sirve como molde para la síntesis del mRNA? A G C T U hebra DNA n.º 1 19.1 26.0 31.0 23.9 0 hebra DNA n.º 2 24.2 30.8 25.7 19.3 0 19.0 25.9 30.8 0 24.3 mRNA 11.- Determinar la respuesta al siguiente problema referido a la transcripción del DNA La región codificadora de un gen en eucariotas está formada por cuatro exones de 99, 75, 66 y 90 nucleótidos y tres intrones, intercalados entre los exones, de 45, 63 y 42 nucleótidos, respectivamente. Indicar: a) cuántos nucleótidos tendrá el ARNm precursor; b) cuántos nucleótidos tendrá la región que se traducirá del ARNm maduro y c) cuántos aminoácidos tendrá el péptido codificado.