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Cuestionario. 1) En un experimento de conjugación se utilizaron cepas con los siguientes fenotipos: cepa a= Hfr: bio--gal--thr+-arg+-ampr cepa b= F-: bio+-gal+-thr--arg--rec--amps cepa c= F-: bio+-gal+-thr--arg--rec+-amps a) Teniendo en cuenta que el carácter rec se refiere a la capacidad de recombinación de la cepa, cuál sería el resultado de dos experimentos de conjugación por separado, uno de la cepa a con la cepa b, y otro de la cepa a con la cepa c. ¿Cuál sería el fenotipo resultante de los transconjugantes? b) Indique el protocolo y los medios de cultivo utilizados en el ensayo de a- para seleccionar los transconjugantes. 2) A partir del siguiente fragmento de ADN conteste lo que se le pide: Cadena 1: 5´TCAGAAAATTATTTTAAATTTCCTCTTGACAGGCCGGAATAACTCCCTATAA TGCGCCACCACTGAAATTCCAGGAGGTTTGACCTATGTATGCCGGTTTTTA ACAACTTCCTATGCTATAAAGGAGGTAAGCTTCATGAGTTGCCCCTGAGGT TATAGTGCAATCCCGGGCCTAATGAGCCCGGGATTTTTTTGAACAAAA-3´ ¿Cuál es la cadena complementaria? Cadena 2: 3)¿Qué indican los números 5´y 3´? Y en ¿qué grupos químicos están presente? 4) ¿ Por que se dice que la replicación depende de un cebador de RNA? 5) La actividad de la ADN polimerasa cataliza la adición de un al extrermo ______ de un polidesoxinucleótido complementario al DNA molde. 6) Enliste y explique las propiedades de las ADN polimerasas I, II, y III de procariontes 7) ¿Cuáles son las características del ori C? 8) ¿Para sintetizar ADN in vitro, se puede utilizar ADN de cadena sencilla. Solamente se tiene que añadir una ADN polimerasa, dNTP´s y un primer o cebador. Suponiendo que la cadena sencilla de ADN tiene 46 nucleótidos de largo y su secuencia es: GCCCCGGTACCCCGTAATATACGGGACTAGGCCGGAGGTCCGGGCG Esta cadena se mezcla con un primer que tiene la secuencia 5´-CGCCCGGACC—3´, una ADN polimerasa y dNTP´s. En este caso una doble cadena de ADNA se forma. Sin embargo, si se sustituye el primer con la secuencia 5´-- CCAGGCCCGC—3, no se genera una doble cadena de ADN. a) Cuál es el 5´ de la secuencia del ADN que se muestra arriba? b) Si tu agregas un primer que es 10 nucleótidos de largo y es complementario al extremo izquierdo de la cadena, cuál sería la secuencia del primer? Debes de determinar los extremos 5´y 3´del primer. Podría este primer ser utilizado para sintetizar la doble cadena? Por qué sí ó por qué no? 9) Dibuje la horquilla de replicación con todos sus elementos 10) ¿ Cuál es la diferencia entre NER y BER? Con relación al artículo de la Telomerasa contesta las siguientes preguntas: ¿ De que manera se protegen los telomeros en los gametos? ¿ Que tipo de enzima es la telomerasa? ¿A que se refieren los autores cuando dice que las células humanas “cuentan” sus divisiones? ¿ En que evento celular se sintetiza la telomerasa en células cancerígenas? ¿ Por que la telomerasa es un buen blanco para el diseño de fármacos anticancerígenos?