Document related concepts
Transcript
XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico IDENTIFICACIÓN DE GENES CODIFICANTES PARA ENDOGLUCANASAS EN MICROORGANISMOS DEL SISTEMA DIGESTIVO DE TERMITAS DEL GENERO HETEROTERMES Alberto Abaroa Villanueva, Bioingeniería de la Universidad Autónoma de Baja California, [email protected]. Asesor Dr. Agustín Corral Luna, de la Universidad Autónoma de Chihuahua, [email protected] PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA La celulosa es el polímero biológico más abundante del planeta, se encuentra presente en un 40% en las plantas y en un 50% en la madera. La degradación de la celulosa por los organismos vivos tiene lugar mediante la acción de tres tipos de enzimas: Endoglucanasas, Celobiohidrolasas y β-glucosidasas. Estas enzimas actúan en forma sinérgica para degradar celulosa. Las termitas son insectos (orden: Isoptera) ampliamente distribuidos que sobreviven usando materiales maderables, las cuales utilizan como única fuente de carbono y nitrógeno (Abe et al., 2000). Para lograrlo, estos insectos dependen de su microbiota intestinal con la que mantienen mutualismo estricto. Esta, se compone de bacterias, protozoarios y hongos celulolíticos, quienes sintetizan y secretan las enzimas requeridas para el rompimiento de celulosa y hemicelulosa (Breznak y Brune, 1994). No obstante, en el género Heterotermes no se ha realizado investigación para elucidar las enzimas que su microbiota produce. El objetivo del presente estudio fue estudiar la presencia de genes codificantes para Endoglucansas en nueve microorganismos aislados del sistema digestivo de temitas del genero Heterotermes. METODOLOGIA Se utilizó un par de primes previamente usados por (Motomi, 2005). Así mismo se utilizó la reacción en cadena de la polimerasa PCR de acuerdo al protocolo descrito por (Nucleic Acid and Protein Purification, MN). Los productos de PCR se revelaron por electroforesis en gel de agarosa al 1.7%. En aquellas muestras que mostraron una banda correspondiente 1300 pb esta fue cortada y purificada usando el kit (Wizard SV Gel and PCR Clean-up System, Promega) de acuerdo a las instrucciones del fabricante. Estas muestras fueron nuevamente re amplificadas de acuerdo a lo descrito anteriormente y serán enviadas a secuenciación para conocer la secuencia de cada gen. CONCLUSION GENERAL Se obtuvieron dos genes candidatos, mismos que seran enviados a secuenciación y comparación en bases de datos y posteriormente seran clonados e insertados en vectores de expresion para posteriormente producir las proteínas de forma recombinante y estar en posibilidad de evaluar su actividad enzimática. © Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico Agosto 2014