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Ensayo para hormonas Libres
Existen varias hormonas que se encuentran asociadas a proteínas especificas y
ligeramente asociadas a la albumina. Usualmente, solo la hormona libre se encuentra
biológicamente activa.
Los ensayos para hormonas libres tienen dos aplicaciones clínicas, se utiliza cuantificar
las concentraciones de las hormonas tiroideas y las hormonas esteroideas.
Normalmente, se utilizan las siguientes técnicas para estimar las concentraciones
séricas libres de las hormonas.
1. Índice Indirecto
Los índices indirectos toman en cuenta dos medidas: una para la concentración
total de la hormona y otra para la Globulina fijadora de tiroxina (TBG).
2. Ensayo de dos pasos
En este ensayo, el suero es inicialmente incubado con una pequeña cantidad de
Anticuerpo específico para T4 inmóvil, el cual fija una cantidad de t4 de la muestra, sin
interrumpir el equilibrio inicial del suero. Una vez obtenido un equilibrio, el suero y los
anticuerpos son separados. Los anticuerpos inmóviles ligados a T4 son lavados varias
veces para eliminar residuos del suero. Luego la muestra se incuba con un derivado de
T4 marcado y se cuantifican los sitios de los anticuerpos fijados como en un ensayo
típico.
3. Ensayo de un paso
En este ensayo, el T4 (T3) marcado compitiendo por el anticuerpo fijador se
remplaza por un análogo de T4(T3) modificado químicamente, el cual tiene la
propiedad de fijar fácilmente al anticuerpo especifico de T4 (T3), pero con menos
facilidad de la hormona natural de fijarse a las proteínas fijadores séricas. El propósito
de este ensayo es mejorar la imprecisión del ensayo de dos pasos, pero manteniendo
la validad.