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XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico EFECTOS DE LA PROTEÍNA β-AMILOIDE SOBRE LA DINÁMICA DE LA CORTEZA PIRIFORME María Estefanía Guerrero Gómez, Centro Universitario de los Lagos-Universidad de Guadalajara, [email protected], Benito Ordaz Sánchez, Instituto de Neurobiologia- UNAM, [email protected], Fernando Peña Ortega, Instituto de Neurobiología- UNAM, [email protected]. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA La enfermedad de Alzheimer (EA), se caracteriza por la pérdida progresiva de la memoria y el deterioro de las funciones cognoscitivas. Estas alteraciones, al menos en las etapas tempranas de la enfermedad se deben a los efectos de la proteína β-amiloide soluble. Dado que estudios recientes han mostrado que uno de los síntomas más tempranos de la EA es la disminución de la capacidad olfativa (hiposmia) se han empezado a realizar estudios enfocados a entender los efectos que desencadena la proteína β-amiloide soluble en los circuitos neuronales asociados a la olfacción. Debido a que la corteza piriforme representa el primer relevo cortical de la información enviada por el bulbo olfatorio, decidimos estudiar el efecto de la proteína β-amiloide soluble sobre esta corteza. METODOLOGIA Se obtuvieron cortes horizontales de encéfalo de ratón CD1 de 500 µm de grosor que contenían la corteza piriforme. Un grupo de rebanadas fueron cargadas con el indicador fluorescente sensible a calcio FLUO-8 para analizar la actividad espontanea de la corteza con resolución unicelular tanto en ausencia como en presencia de la proteína β-amiloide. Para ello se tomaron videos de actividad de la corteza piriforme con la ayuda de un microscopio de epifluorecencia (MEP). Otras rebanadas fueron colocadas en un set de registro de campo electrofisiológico con el fin de registrar la actividad espontánea poblacional de la corteza piriforme antes y después de agregar la proteína β-amiloide. Para ello se realizaron registros de campo con electrodos de succión colocados en las capas profundas de la corteza piriforme. Al final en ambos experimentos se aplicó lidocaína para bloquear la generación de potenciales de acción y así diferenciar la actividad neuronal de la actividad glial. Para el procesamiento de los datos de los experimentos con imágenes de fluorescencia de calcio se hizo uso del software ImageJ, el fSIENN y finalmente los datos son procesados en MATLAB. Se utilizó el programa Clampfit para analizar los registros de campo a través de análisis de Fourier. CONCLUSIONES Los experimentos realizados con imágenes de fluorescencia de calcio han mostrado que la actividad neuronal en la corteza piriforme (medida como número de células y activaciones por célula) va disminuyendo durante la incubación con la proteína β-amiloide 30 nM. De igual manera, la actividad poblacional de campo en la corteza piriforme disminuye en su potencia durante la incubación con la proteína β-amiloide 30 nM. Lo anterior, nos permite concluir que proteína β-amiloide disminuye la actividad de la corteza piriforme y la dinámica de su circuito. Este efecto podría contribuir a la hiposmia que se observa en la EA. © Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico Agosto 2014
