Bloqueo de genes

El bloqueo de genes, también llamado inactivación génica o desactivación génica (en inglés, gene knockout) es una técnica genética que consiste en suprimir la expresión de un gen específico en un organismo (un ratón, una planta, una levadura...), sustituyendo el gen original en su locus por una versión modificada del mismo, a la que se ha extraído uno o varios exones para generar una versión que codificaba el gen original. De esta forma, se obtienen organismos que no expresan el gen diana en un tejido específico o en el organismo completo, y que se denominan organismos knockout, como es el caso de los ratones knockout.Existen diferentes técnicas de biología molecular para interferir con la expresión de un gen. Estas técnicas varían en las herramientas utilizadas, en el tiempo necesario para conseguir un resultado positivo y en la especificidad del mismo. Dentro de estas técnicas se encuentran: el knockout (en español, noqueo) de genes es una técnica en la que el gen endógeno se extrae: se intercambia por recombinación homóloga por una versión mutada (que se introduce). Esta versión mutada puede eliminar prácticamente toda la secuencia del gen o bien dejar la expresión de los primeros exones, pero es preferible no dejar casi nada; esta técnica es la que se describe en el apartado ""Metododología"". Suelen requerirse varios meses para obtener individuos modificados (sobre todo en el caso de los ratones), aunque presentan la ventaja de ser muy específicos: estos organismos únicamente presentan carencia del gen diana. en la transgénesis, se introducen secuencias dentro del gen original que lo alteran, para producir modificaciones que generen proteínas no funcionales. En este caso, los organismos obtenidos se denominan, por ejemplo, ""ratones transgénicos"". Suele ser una técnica más rápida, cuyo inconveniente es que el gen endógeno aún está presente, y puede producir una proteína, aunque mutada, que puede interferir con otras moléculas de la vía a la que pertenece. Además, puede producirse por azar una nueva mutación que revierta la modificación introducida, generando de nuevo la proteína original, suceso que tiene lugar con una cierta frecuencia. se pueden obtener mutantes utilizando un producto mutagénico (como el EMS, por etil metanosulfanato), que producen mutaciones al azar, y seleccionar luego organismos que lleven codones ""STOP"" en la secuencia de interés. Es un método rápido de obtener mutantes, aunque no es específico para la secuencia diana. se pueden introducir en el genoma de un organismo secuencias de ADN que expresen moléculas de ARN interferente. Estas moléculas interfieren de forma específica con la expresión del gen diana, produciendo generalmente una disminución de la expresión (que se denomina ""knockdown"" por este motivo). Esta técnica es más rápida que la obtención de un organismo ""knockout"", pero no produce una eliminación completa de la expresión y además la secuencia introducida que codifica para el ARN interferente puede también sufrir mutaciones, inactivando el efecto deseado.Por estas razones, los organismos knockouts son los modelos preferidos a la hora de estudiar la función de un gen.