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XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE CEPAS DE BACTERIAS ÁCIDO LÁCTICAS RESISTENTES A pH ÁCIDO Y SALES BILIARES CON POTENCIAL PROBIÓTICO Luis Alfonso Sereno Villaseñor, Ingeniería Bioquímica del Instituto Tecnológico de Morelia, [email protected], Co-asesores: José Diego Bárcenas Torres, Eliel Rafael Romero García, Asesor: José Fernando Covián Nares, Departamento de Ingeniería Química y Bioquímica del Instituto Tecnológico de Morelia, [email protected] PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA A pesar del creciente avance en el desarrollo de nuevos y mejorados agentes terapéuticos, las infecciones gastrointestinales y sus consecuencias permanecen como unos de los principales problemas clínicos. Estos factores han renovado el interés por la aplicación de estrategias alternativas, como la posibilidad de ingerir deliberadamente microorganismos benéficos para la salud humana. Los Probióticos han sido definidos como microorganismos viables que, cuando son ingeridos, tienen efectos benéficos en la prevención y tratamiento de condiciones patológicas específicas. Los probióticos son capaces de adherirse a la mucosa intestinal y de inmediato colonizar el tracto intestinal, sin embargo la principal limitación es la sensibilidad al ácido gástrico, las sales biliares y las enzimas pancreáticas, lo que abre un área de oportunidad para el aislamiento y desarrollo biotecnológico de nuevas cepas bacterianas con potencial probiótico. METODOLOGIA Una vez realizada la revisión bibliográfica se procedió a aislar BAL’s (Bacterias ácido lácticas) a partir de muestras de heces de bebe lactante de 20 días de edad, cultivándose en medios de Agares MRS y LB por estriado simple. Posteriormente se llevó a cabo una resiembra en placa para la obtención de un cultivo axénico al que se le realizaron pruebas que permitan apoyar en la identificación de las cepas tales como tinción de Gram, prueba de catalasa, degradación de lactosa y producción de ácido láctico, actividad caseinolítica y amilolítica extracelular y motilidad en medio semisólido. CONCLUSIONES GENERALES La presente investigación no ha concluido, aun se pretenden realizar pruebas de resistencia in-vitro de la actividad gástrica, tales como resistencia a pH’s ácidos, a sales biliares y a las enzimas pancreáticas, así como la resistencia a antibióticos. Este proyecto tiene como prospectiva realizar pruebas moleculares a las cepas aisladas la amplificación por la PCR del rRNA de la subunidad 16s ribosomal, para verificar las especies aisladas, y una vez identificadas se procederá a realizar ensayos de evolución dirigida e ingeniería genética para mejorar su resistencia al estrés en el hospedero. © Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico Agosto 2014
