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PORTAFOLIO DE SERVICIOS POR ESPECIE ANIMAL DIAGNOSTICO PARA ENFERMEDADES VESICULARES 2008 ­ UNICAMENTE EN BOGOTA (LNDV) ENFERMEDAD FIEBRE AFTOSA y ESTOMATITIS VESICULAR PRUEBA MUESTRA INTERPRETACIÓN OBSERVACIONES Fijación de Complemento Mediante la reacción antígeno‐anticuerpos homólogos lo que conlleva a una lectura de la Densidad óptica más baja que con relación a otros tubos de la prueba incluidos los controles ELISA Tipificación de virus Aftosa y Estomatitis La muestra de preferencia es el epitelio lingual, pero si al momento Diagnóstico de las enfermedades de la toma no se encuentra, se vesiculares: Fiebre Aftosa y puede recurrir a epitelio gingival, Estomatitis Vesicular nasal, mamario o podal Mediante la reacción antígeno. Anticuerpos homólogos, a través de la lectura de la densidad Es una prueba que indica la presencia o no de óptica con valores por encima de los del los virus punto de corte de la prueba PCR La muestra de preferencia es el Determinar la presencia de una epitelio lingual, pero si al momento porción del genoma viral (Virus de Detección o no, de un segmento del genoma de la toma no se encuentra, se Fiebre Aftosa y Virus de la viral, evidenciado a través de electroforesis puede recurrir a epitelio gingival, Estomatitis Vesicular) nasal, mamario o podal Seroneutralización Suero sanguíneo Es una prueba que indica la presencia o no de los virus La reacción se puede evidenciar en forma cualitativa y cuantitativamente. No se requiere de muestras con virus viable. Indica el título de anticuerpos neutralizantes. Se Mediante la lectura del efecto citopático del virus Determinar el título de anticuerpos utiliza como requisitos para exportación­ sobre una monocapa de células de la línea contra los virus de la Fiebre Aftosa importación, vigilancia seroepidemiológica e BHK21, lo que permite la cuantificación del título y la Estomatitis Vesicular investigación diagnóstica. Especies Bovina. de anticuerpos capaz de neutralizar al antígeno Equina y Porcina Requisito para movilización, importación y exportación de porcinos y ovinos Evidencia de una reacción antígeno­anticuerpo a Para las especies porcina, ovina, caprina y través de la formación de una banda de algunas especies silvestres. precipitación Suero sanguíneo Vigilancia seroepidemiológico, requisito para movilizaciones, pruebas complementarias, importaciones­exportaciones Mediante la evidencia de anticuerpos contra las proteínas no estructurales del virus de la Fiebre Aftosa, evidenciados en la a través de la lectura Prueba para monitoreos epidemiológicos de densidades ópticas en la ELISA 3ABC y la formación de bandas contra las proteínas 3ABC, 3D, 2C, 3B y 3A en la EITB ELISA competición fase liquida. (Elisa CFL­EV) Identificación y titulación Suero sanguíneo de anticuerpos de la estomatitis v esicular Vigilancia seroepidemiológico, requisito para movilizaciones, importaciones­exportaciones Mediante la detección de anticuerpos específicos No recomendado para análisis de sueros de contra los virus de la Estomatitis Vesicular porcinos Inmunodifusión en gel de Suero sanguíneo agar (IDGA) FIEBRE AFTOSA
ELISA 3ABC/EITB ESTOMATITIS VESICULAR OBJETIVO La muestra de preferencia es el epitelio lingual, pero si al momento Diagnóstico de las enfermedades de la toma no se encuentra, se vesiculares: Fiebre Aftosa y puede recurrir a epitelio gingival, Estomatitis Vesicular nasal, mamario o podal ECTIMA CONTAGIOSO Fijación de Complemento Epitelio lingual, gingival, nasal y mamario. Determinar la presencia de antígeno (virus de estima contagioso) en la muestra en la muestra enviada al laboratorio Lecturas de absorbancia cercanas a cero se consideran positivas, con relación a los antisueros controles. Es una prueba que indica la presencia o no de los virus. La reacción se puede evidenciar en forma cualitativa y cuantitativamente. ENFERMEDAD VESICULAR DEL CERDO Fijación de Complemento Tejido epitelial de las lesiones. Determinar la presencia del antígeno (virus de enfermedad vesicular porcina) en la muestra enviada al laboratorio Lecturas de absorbancia cercanas a cero se consideran positivas, con relación a los antisueros controles. Es una prueba que indica la presencia o no de los virus. La reacción se puede evidenciar en forma cualitativa y cuantitativamente. Inmunodifusión en gel de agar (IDGA) LENGUA AZUL
RT­PCR ELISA en fase sólida ELISA­CFS Suero sanguíneo Enfrentar los anticuerpos serológicos a un antígeno conocido Evidencia de una reacción antígeno­anticuerpo a en un medio semisólido, para través de la formación de una banda de evidenciar la reacción antígeno­ precipitación anticuerpo. Es de gran importancia la selección la del gen que se quiere amplificar, pudiéndose elegir entre regiones muy conservadas (poco variables) o regiones poco conservadas (muy variables) según la finalidad del diagnóstico. No se requiere que el virus esté vivo para poder llevar a cabo la amplificación. ( Por implementar) Sangre entera con anticoagulante (EDTA). Determinar la presencia de una región del genoma viral (virus de lengua azul) en la muestra, que previamente se ha elegido por la selección de los respectivos iniciadores. La presencia del segmento del genoma viral se evidencia por electroforesis. Además posteriormente se puede llevar a cabo la amplificación por medio del secuenciamiento genómico. Suero sanguíneo Identificar y titular anticuerpos séricos contra la enfermedad de lengua azul como enfermedad confundibles con fiebre aftosa. Muestras con valores de DO inferiores al 50% del Se trata de una reacción antígeno­ anticuerpo valor medio de DO del control de antígeno son monoclonal de serotipo. La presencia de consideradas POSITIVAS. Muestras con valores de DO superiores a la mitad anticuerpos en el suero bloquea la reacción del anticuerpo monoclonal lo cual disminuye el color (50%) del valor medio de DO obtenido en el al agregar el substrato específico. control de antígeno, son consideradas NEGATIVAS.