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PORTAFOLIO DE SERVICIOS POR ESPECIE ANIMAL DIAGNOSTICO EN EQUINOS Y ZOONOSIS – MARZO DE 2008 ENFERMEDAD PRUEBA ELISA DE CAPTURA IgM PARA EEV Y EEE (EQUINOS Y HUMANOS) ELISA DIRECTA IgG PARA EEV (EQUINOS Y HUMANOS) ENCEFALITIS EQUINAS (EEV, EEE y EEO) INHIBICIÓN DE LA HEMAGLUTINACIÓN PARA EEV, EEE O EEO EN EQUIDOS Y OTRAS ESPECIES ANIMALES AISLAMIENTO E IDENTIFICACION VIRAL PARA LAS EE MUESTRA OBJETIVO INTERPRETACIÓN Sangre completa o Valores de densidad Detección de anticuerpos suero (Libres de óptica mayores o iguales tipo IgM contra los virus hemólisis, no a 0.2 indican presencia de las Encefalitis Equinas lipémicos y del anticuerpo tipo IgM Venezolana y del Este refrigerado) en la muestra procesada OBSERVACIONES La presencia de anticuerpos IgM en el suero indica actividad viral reciente en animales o humanos no vacunados o con periodo de vacunación mayor a tres (3) meses. Este resultado, junto con sintomatología neurológica en el predio o área, califican el evento como positivo para EEV o EEE. La presencia de anticuerpos IgG en el suero indica Valores de densidad Sangre completa o principalmente una infección pasada o niveles de Detección de anticuerpos óptica mayores o iguales suero (Libres de anticuerpos vacunales. Sin embargo, en casos tipo IgG contra los virus a 0.2 indican presencia hemólisis, no sospechosos, la seroconversión determinada sobre una de la Encefalitis Equina del anticuerpo tipo IgG lipémicos y muestra pareada tomada 8 dias después, puede Venezolana en la muestra refrigerado) confirmar un evento reciente de EEV. procesada. Duración de la prueba mínimo 72 horas. La presencia de anticuerpos indica infección contra el virus de la encefalitis equina (EEV, EEE O EEO) en animales no vacunados. Duración de la prueba mínimo 72 horas. La prueba se realiza como rutina de investigación Sangre completa o Se considera positivo a Detección de anticuerpos diagnóstica en el 50% de las muestras de equidos que suero (Libres de la formación de botón contra los virus de las llegan para diagnóstico de encefalitis, con el propósito hemólisis, no por inhibición de la Encefalitis Equinas (EEV, de hacer vigilancia para la EEO. lipémicos y hemaglutinación a partir EEE, EEO) Duración de la prueba mínimo 72 horas. refrigerado) de la dilución 1/40. La prueba se realiza en sueros de equinos importados o para exportar, con el fin de determinar niveles de anticuerpos contra la EEO, y en sueros de aves para descartar EEE. Duración de la prueba mínimo 72 horas. La identificación del agente viral (VEEV, VEEE o Sangre completa, Detección de antígeno Presencia de efecto VEEO) confirma el caso como POSITIVO para la encéfalo, viral en cultivo celular e citopático en cultivo encefalitis en particular. páncreas e hígado identificación por celular (VERO o BHK­ (Congelados y Inmunofluorescencia con 21) y tipificación Duración de las pruebas mínimo 15 días. Este proceso libres de Anticuerpos antigénica (VEEV, se implementará en el laboratorio a partir del II contaminación) Monoclonales (AcM) VEEE, VEEO). semestre de 2008. LABORATORIO ICA QUE OFRECE LA PRUEBA Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá
PORTAFOLIO DE SERVICIOS POR ESPECIE ANIMAL DIAGNOSTICO EN EQUINOS Y ZOONOSIS VIRALES – MARZO DE 2008 ENFERMEDAD PRUEBA MUESTRA OBJETIVO INTERPRETACIÓN Presencia de fluorescencia con estructuras características La detección de partículas virales Detección del virus de (cuerpos de inclusión o de Negri indica la presencia de la rabia. la rabia y polvo antigénico), indican la Duración 8 horas. precencia de infección viral. Ausencia de sintomatología Confirmar resultados neurológica en los ratones y Duración de la prueba máximo 30 negativos obtenidos por Encéfalo (Corteza cerebral, pruebas IFD negativas, descartan diás. PRUEBA BIOL OGICA IFD hipocampo o cuerno de Amón y la presencia de la rabia. EN RATONES cerebelo), congelados y libres LACTANTES. Amplificación viral en Sintomatología neurológica en los de contaminación. muestras positivas por ratones y positividad a IFD, indica Duración de la prueba 5­15 días. IFD presencia y multiplicación viral. Tipificación viral de los TIPIFICACIÓN DE LOS Muestra original o encéfalos de La prueba indica el tipo de virus casos positivos, para la Se identifica mediante VIRUS RABICOS CON ratones inoculados con que causó la enfermedad (Rabia identificación de la Inmunofluorescencia Indirecta ANTICUERPOS muestras positivas a rabia por silvestre o urbana) y se deduce el Variante Antigénica (IFI) la Variante Antigénica del MONOCLONALES IFD (congelados y libres de reservorio y posible transmisor. causante de la virus rábico. (AcM). contaminación). Duración de la prueba de 2­15 días. enfermedad. Muestra original o encéfalos de ratones inoculados con Evidencia de una banda de DNA Se realiza para estudios de Detección del genoma RT­PCR muestras positivas a rabia por con extensión de 1260 pb, epidemiología molecular, seguida del virus rábico. IFD (congelados y libres de exclusiva del virus rábico. del secuenciamiento genético. contaminación). Encéfalo (Corteza cerebral, INMUNOFLUORESCEN hipocampo o cuerno de Amón y CIA DIRECTA (IFD) cerebelo), congelados y libres de contaminación. RABIA ANEMIA INFECCIOSA EQUINA OBSERVACIONES INMUNODIFUSIÓN EN GEL DE AGAR Sangre completa o suero (Libres de hemólisis, no lipémicos y refrigerado) Detección de anticuerpos contra el virus de la anemia infecciosa equina. La formación de una banda de precipitación entre la muestra serológica y el antígeno viral (proteína 26) indica la presencia de anticuerpos contra el virus de la AIE. LABORATORIO ICA QUE OFRECE LA PRUEBA LNDV­ Bogotá y Centros de Diagnósticos de Arauca, Cúcuta, Cereté, Bello, Yopal. LNDV­ Bogotá, y Centros de Diagnósticos de Arauca, Cúcuta, Cereté, Yopal. Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá LNDV­ Bogotá, y Centros de La prueba se realiza con propósitos Diagnóstico en: Aguachica, de: vigilancia epidemiológica de los Arauca, Armenia, Barranquilla, predios, movilización, participación Bello, Bucaram anga, Cali, en eventos ecuestres y para Cartagena, Cereté, Cúcuta, ejemplares importados o a Florencia, Fundación, Ibagué, La exportar. Dorada, Manizales, Neiva, Duración de la prueba 48­72 horas. Sincelejo, Sogamoso, Tuluá, Valledupar, Villavicencio, Yopal.
PORTAFOLIO DE SERVICIOS POR ESPECIE ANIMAL DIAGNOSTICO EN EQUINOS Y ZOONOSIS VIRALES – MARZO DE 2008 ENFERMEDAD PRUEBA INHIBICIÓN DE LA HEMAGLUTINACIÓN INFLUENZA EQUINA PIROPLASMOSIS MUESTRA Sangre completa o suero (Libres de hemólisis, no lipémicos y refrigerado) INMUNODIFUSIÓN EN GEL DE AGAR Sangre completa o suero (Libres de hemólisis, no lipémicos y refrigerado) AISLAMIENTO E IDENTIFICACION VIRAL EN HUEVOS EMBRIONADOS HISOPOS CON MUESTRAS DE SECRECIÓN NASAL EN MEDIO DE TRANSPORTE PARA VIRUS. cELISA PARA BABESIA CABALLI Y EQUI Sangre completa o suero (Libres de hemólisis, no lipémicos y refrigerado) OBJETIVO Detección de anticuerpos contra los virus de Influenza Equina subtipos H7N7 y H3N8 INTERPRETACIÓN OBSERVACIONES Se considera positivo a la formación de botón por inhibición de la hemaglutinación. En animales no vacunados, y con sospecha clínica, la presencia de altos títulos de anticuerpos o la seroconversión, indica infección con el subtipo de virus correspondiente. Duración de la prueba mínimo 72 horas. En animales vacunados se debe enviar suero pareado para confirmar el diagnóstico mediante la observación de seroconversión. Duración de la prueba mínimo 72 horas. La formación de una banda de precipitación entre la Detección de La evidencIa de anticuerpos indica la muestra serológica y el anticuerpos contra el presencia de infección por el virus de la antígeno viral, indica la virus de Influenza tipo Influenza tipo A. presencia de anticuerpos A. Duración 48­72 horas. contra el virus de Influenza tipo A. La presencia de mortalidad de los embriones de pollo a partir del segundo día pos Las muestras de secreción nasal deben Multiplicar e identificar inoculación, indica infección acompañarse de muestras serológicas por hemoaglutinación y viral, que se confirma con del predio, tomadas de animales con y serotipificación a los pruebas de sin síntomas. subtipos virales. hemoaglutinación y Duración de la prueba mínimo 15 días ­ 1 serotipificación con mes. anticuerpos específicos para los subtipos virales. La presencia de anticuerpos se evidencia La prueba se realizará como vigilancia Detección de con un porcentaje de epidemiológica en equinos importados y anticuerpos contra inhibición del 40 % tanto para exportación. Babesia caballi o equi. para B. equi como para B. Duración de la prueba 24 ­48 horas caballi. LABORATORIO ICA QUE OFRECE LA PRUEBA Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá
PORTAFOLIO DE SERVICIOS POR ESPECIE ANIMAL DIAGNOSTICO EN EQUINOS Y ZOONOSIS VIRALES – MARZO DE 2008 ENFERMEDAD ESTOMATITIS VESICULAR PRUEBA MUESTRA OBJETIVO Fijación de Complemento La muestra de preferencia es el epitelio lingual pero si al momento de la toma no se encuentra, se puede recurrir a epitelio gingival, nasal, mamario o podal Diagnóstico de Estomatitis Vesicular ELISA Tipificación de virus Estomatitis La muestra de preferencia es el epitelio lingual pero si al momento de la toma no se encuentra, se puede recurrir a epitelio gingival, nasal, mamario o podal Diagnóstico de Estomatitis Vesicular PCR La muestra de preferencia es el epitelio lingual pero si al momento de la toma no se encuentra, se puede recurrir a epitelio gingival, nasal, mamario o podal Determinar la presencia de una porción del genoma del virus de la Estomatitis Vesicular Seroneutralización Suero sanguíneo Determinar el título de anticuerpos contra los virus de la Estomatitis Vesicular INTERPRETACIÓN Mediante la reacción antígeno­anticuerpos homólogos lo que conlleva a una lectura de la densidad óptica más baja que con relación a otros tubos de la prueba incluidos los controles Mediante la reacción antígeno. Anticuerpos homólogos, a través de la lectura de la densidad óptica con valores por encima de los del punto de corte de la prueba Detección o no, de un segmento del genom a viral, evidenciado a través de electroforesis Mediante la lectura del efecto citopático del virus sobre una monocapa de células de la línea BHK21, lo que permite la cuantificación del título de anticuerpos capaz de neutralizar al antígeno OBSERVACIONES Es una prueba que indica la presencia o no del virus. La reacción se puede evidenciar en forma cualitativa y cuantitativamente. LABORATORIO ICA QUE OFRECE LA PRUEBA Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá Es una prueba que indica la presencia o no de los virus Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá No se requiere de muestras con virus viable. Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá Indica el título de anticuerpos neutralizantes. Se utiliza como requisitos para exportación­ importación, vigilancia seroepidemiológica e investigación diagnóstica. Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá
PORTAFOLIO DE SERVICIOS POR ESPECIE ANIMAL DIAGNOSTICO EN EQUINOS Y ZOONOSIS VIRALES – MARZO DE 2008 ENFERMEDAD PRUEBA MUESTRA OBJETIVO INTERPRETACIÓN OBSERVACIONES LABORATORIO ICA QUE OFRECE LA PRUEBA ADENITIS, GURMA O PAPERA EQUINA AISLAMIENTO E IDENTIFICACION Hisopos de vías respiratorias o de abscesos de nódulos linfoídes. Aislar e identificar la bacteria. Se aísla o no se aísla el Streptococcus Se tipifica el Streptococcus. Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá AISLAMIENTO E IDENTIFICACION Exudado uterino y vaginal, hisopos de la fosa y senos del clítoris (en yeguas curadas), y de fosa uretral y prepucio. Aislar e identificar la bacteria. Se aísla o no se aísla la bacteria La muestra es enviada al laboratorio en medio Amies antes de las 48 horas de su colección.. Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá AISLAMIENTO E IDENTIFICACION Secreciones traqueobronquiales con solución salina, tejido pulmonar, lesiones granulomatosas o purulentas. Aislar e identificar la bacteria. Se aísla o no se aísla la bacteria Detectar anticuerpos contra serovares de leptospiras. Título >o = a 1/100 correlacionado con la historia clínica. Aislar la leptospira Se aislan o no leptospiras en la muestras analizadas. (Streptococcus equi) METRITIS CONTAGIOSA EQUINA (Taylorella equigenitalis) INFECCIÓN RESPIRATORIA POR Rhodococcus equi MICROAGLUTINACI Suero, líquido torácico y de ON cavidad abdominal LEPTOSPIROSIS AISLAMIENTO Tejidos, orina y otros líquidos corporales. EXAMEN DIRECTO Orina y otros líquidos corporales (Con menos de 2 horas de recolectadas) INMUNOFLUORESC ENCIA DIRECTA (IFD) Tejidos, orina y otros líquidos corporales Observar la Se observan o no espiroquetas espiroqueta compatibles con leptospiras en la directamente en la muestra analizada. muestra analizada. Demostrar por inmunofluorescencia la presencia de Se observan o no leptospiras. leptospiras en la muestra examinada. Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá LNDV­ Bogotá, Armenia, Tener en cuenta la historia clínica Bucaramanga, Cereté, Manizales, para la interpretación de resultados. Tuluá. Tener en cuenta las medidas de Laboratorio Nacional de recolección y de envío de muestras Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ para el aislamieto. Bogotá Procedimiento de apoyo para el diagnóstico de leptospirosis. El hecho de no observarlas no descarta la enfermedad. LNDV­ Bogotá, Armenia, Bucaramanga, Cereté, Manizales, Tuluá. Las muestras deben ser tomadas después de 15 días de infecciòn. Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá
PORTAFOLIO DE SERVICIOS POR ESPECIE ANIMAL DIAGNOSTICO EN EQUINOS Y ZOONOSIS VIRALES – MARZO DE 2008 ENFERMEDAD PRUEBA MUESTRA OBJETIVO INTERPRETACIÓN OBSERVACIONES LABORATORIO ICA QUE OFRECE LA PRUEBA ROSA DE BENGALA Suero sanguíneo (buenas condiciones, congelado o refrigerado) Detección de anticuerpos contra Brucella abortus Cualquier tipo de Aglutinación después de 4 minutos de incubación y agitación del Ag y Ac Sensibilidad 85% al 89%, Correspondiente a 1500 ng de Ac/ml. de suero. LNDV­ Bogotá, Aguachica, Arauca, Armenia, Barrancabermeja, Barranquilla, Bello, Bucaram anga, Cali, Cartagena, Cereté, Cúcuta, El Banco, Florencia, Fundación, Ibague, La Dorada, Manizales, Neiva, Pasto, Sincelejo, Sogamoso, Tuluá, Valledupar, Villavicencio, Yopal FIJACIÓN DE COMPLEMENTO Suero sanguíneo, plasm a, LCR (buenas condiciones, congelado o refrigerado) Detección de anticuerpos contra Brucella abortus Formación de botón (no lisis) en cualquier dilución del Ac, por encima de 1:10 se considera positiva Sensibilidad 90% al 92%, Correspondiente a 200 ng de Ac/ml. de suero. Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá ELISA competitiva Suero sanguíneo (buenas condiciones, congelado o refrigerado) Detección de anticuerpos contra Brucella abortus Positivo o Negativo Sensibilidad 98% al 99%, Correspondiente a 1 ng de Ac/ml. de suero. PCR Tejidos blanco (congelados) Detección ADN Se detectó o no se detectó ADN de Brucella spp Solo para tipificación de cepas. LNDV­ Bogotá, Barranquilla, Bucaramanga, Manizales, Cereté, Bello, Yopal, Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario (LNDV) ­ Bogotá
BRUCELOSIS