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MAY110_REDVET UTILIZACIÓN DE GONADOTROPINA CORIÓNICA HUMANA EN VACAS DE DOBLE PROPÓSITO UTILIZADAS COMO RECEPTORAS EN TRANSFERENCIA DE EMBRIONES USE OF HUMAN CHORIONIC GONADOTROPIN DUAL PURPOSE COWS USED AS RECIPIENTS IN EMBRYO TRANSFER RESUMEN El objetivo de este trabajo fue evaluar el uso de la Gonadotropina Coriónica Humana aplicada en el momento en que se realiza la transferencia de embriones (día 7) sobre el porcentaje de gestación en vacas receptoras de embriones en ganado bovino de doble propósito, como receptoras se utilizaron vacas F1 (Holstein x Cebú y Cebú x Criollo), con un total 300 vacas ciclando y sin considerar el número de partos. Para sincronizarlas, se utilizó un implante auricular que contenía un progestágeno 3 mg de Norgestomet, durante 9 días, más una inyección intramuscular (IM) de 3 mg de Norgestomet y 5 mg de valerato de estradiol. Al retiro del implante, se aplicó 400 UI de Gonadotropina Coriónica equina (eCG), en ambos grupos. Las vacas que entraron en estro se transfirieron en el día 7 de haberlo presentado, solamente se transfirieron a las vacas que a la palpación por vía rectal presentaban un Cuerpo Lúteo de calidad 2 y 3; utilizando embriones congelados. El estudio se dividió en dos grupos; el grupo 1 (control con 70 vacas) y el grupo 2, tratado con 1500 UI de eCG con 72 vacas. El diagnóstico de gestación se realizó a los 60 días la transferencia de los embriones. Los resultados se evaluaron con un diseño completamente al azar y para el análisis estadístico, se utilizó una prueba de t-Student para determinar la diferencia entre los dos Grupos. Los resultados obtenidos en este estudio, muestran una diferencia significativa (P<0.05) en los porcentajes de gestación, demostrando que el tratamiento con eCG al momento de transferir al embrión incrementa el porcentaje de gestación en las vacas transferidas. Concluyendo que el tratamiento con eCG (1500 UI), resultó en mayor porcentaje de gestación para el grupo tratado 37 vacas gestantes (51.3%) vs. el grupo testigo 29 vacas gestantes (41.4%) (P<0.05). Palabras clave: Gonadotropina coriónica humana, receptoras, vacas doble propósito, tarnsferencia de embriones. ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the use of human chorionic gonadotropin at the time applied is performed embryo transfer (day 7) on pregnancy rate in embryo recipient cows in dual purpose cattle, as recipients are used F1 cows (Holstein x Zebu and Zebu x Creole), totaling 300 cows cycling, regardless of the number of births. To synchronize, we used an ear implant containing 3 mg of progestogen norgestomet for 9 days, plus an intramuscular injection (IM) of 3 mg of norgestomet and 5 mg estradiol valerate. At implant removal, was applied 400 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG) in both groups. The cows that showed oestrus, were transferred on day 7 of having submitted, only the cows were transferred to a rectal palpation had a corpus luteum of quality 2 and 3, using frozen embryos. The study was divided into two groups: group 1 (control with 70 cows) and group 2, treated with 1500 IU of eCG with 72 cows. Pregnancy diagnosis was performed at 60 days, the embryo transfer. The results were evaluated with a randomized design and statistical analysis, we used a Student t-test to determine the difference between the two groups. The results of this study show a significant difference (P <0.05) in pregnancy rates, demonstrating that treatment with eCG at the embryo transfer increases pregnancy rates in cows transferred. Concluding that eCG treatment (1500 IU) resulted in higher pregnancy rate for the group treated 37 pregnant cows (51.3%) vs. the control group 29 cows pregnant (41.4%) (P <0.05). Key words: Human chorionic gonadotropin, reception, dual purpose cows, embryo transfers. INTRODUCCIÓN La transferencia de embriones (TE), es una herramienta muy importante en el mejoramiento genético; no obstante, en ocasiones los resultados son afectados por factores que influyen en los porcentajes de gestaciones, dentro de estos se encuentran: la condición corporal de las receptoras, el estrés calórico (durante el verano) que es capaz de comprometer la gestación (Al-Katanani et al., 2001) número de partos que presenten, tanto las hembras donadoras, como receptoras y la nutrición de las receptoras, si existen deficiencias nutricionales o minerales aumenta el riesgo de muerte embrionaria y un retorno al estro normal; el reconocimiento materno embrionario, es afectado, así como la sincronía materno embrionaria. La Hormona liberadora de gonadotropina (GnRH), empleada para prevenir la pérdida temprana de embriones causada por lisis del CL (Franco et al., 2005), la utilización de la Gonadotropina Coriónica Humana (hCG) aumenta los niveles de P4, mejorando la función del cuerpo lúteo (Changas and Lopes, 2004) evitando que se lleve a cabo la regresión temprana de esta estructura. Con el tratamiento de hCG se observa un aumento de los niveles de P4 en plasma y esto se logra por la inducción de la formación de cuerpos lúteos accesorios. Varios métodos han sido utilizados para aumentar los porcentajes de gestación, a través de las concentraciones de P4 en plasma durante la fase lútea. El objetivo de este trabajo fue evaluar el uso de la eCG en el día 7; momento en que se realiza la transferencia de embriones, valorando los porcentajes de concepción en vacas de doble propósito utilizadas como receptoras en el trópico seco. MATERIAL Y MÉTODOS Para el presente trabajo se utilizaron 300 animales F1 (Holstein x Cebú y Cebú x Criollo) en el grupo I (150 vacas) en el Grupo II (150 vacas) se seleccionaron en base a su condición corporal (3.0 a 3.5), solamente se incluyeron animales ciclando, suplementándose con 4 Kg de alimento comercial con 18% de proteína cruda, proporcionándolos en el momento del ordeño 30 días antes de iniciar la transferencia y 30 días después de haber transferido el embrión. Como forraje se les ofreció punta de caña y sorgo picado. Se realizó una desparasitación tanto interna como externa a base de Ivermectinas, así como la aplicación de Vitaminas, A y D y suplementación con sales minerales. Los animales experimentales se palparon por vía rectal para poder evaluar su aparato reproductor, considerando la presencia de un cuerpo lúteo (CL), se sincronizaron 146 vacas del grupo I y 146 vacas del grupo II, como posibles receptoras, para este propósito se utilizo un implante auricular que contiene progestágeno (3 mg de norgestomet) que permaneció in situ durante 9 días en el pabellón de la oreja, mas una inyección de 2 ml que contiene 3 mg de norgestomet y 5mg de valerato de estradiol por vía Intramuscular. Una vez transcurridos los 9 días; se retiro el implante y se aplico 400 UI de eCG o también llamada Gonadotropina Seríca de Yegua Preñada (PMSG) por vía intramuscular al grupo II, que tenia el objetivo de reclutar mayor numero de CL accesorios. La detección de calores inicio 24 horas después de retirado el implante durante 3 días (día/noche). Las vacas que entraron en celo se transfirieron en el día 7 de haber presentado estro, se transfirieron aquellas vacas que a la palpación presentaron un CL, estro manifiesto y buena condición corporal. De esta manera las vacas fueron asignadas de manera aleatoria el grupo I y otro tanto al grupo II. El grupo 1 (n=73) se utilizo como testigo y el grupo 2 (n= 73) fue el grupo experimental y se les aplicó 1500 UI de hCG por vía intramuscular al momento de transferir el embrión. Se transfirieron embriones congelados con etilenglicol en etapa de mórula o blastocisto de calidad 1 (C1) a (C2). La descongelación se realizo de la siguiente manera sé mantuvieron 15 segundos en el aire y a continuación otros 15 a 20 segundos, en agua a una temperatura de entre 25 y 27 ºC. Con la receptora anestesiada epiduralmente se introdujo el embrión al útero con un aplicador en el último tercio del cuerno uterino ipsilateral al CL (palpado previamente). Después de deposito al embrión en el cuerno uterino se procedió a la aplicación de 1500 UI de hCG por vaca. Los resultados se evaluaron de acuerdo al porcentaje de gestación que se presentó en cada grupo (el diagnóstico se realizo a través de palpación rectal a los 60 días postransferencia) Variables evaluadas a) Presentación de estro; vacas tratadas y no tratadas b) Calidad del CL1, 2, 3; tratadas y no tratadas para la transferencia c) Porcentaje de gestación tratada y no tratada en vacas transferidas. RESULTADOS El Grupo testigo (Grupo I) 112/146 hembras presentaron estro, esto equivale al 76.7%, en el grupo tratado (Grupo II) 110/146 hembras presentaron estro representa el 75.3% de hembras sincronizadas mostrando una diferencia no significativa (P>0.05). Las hembras que presentaron estros se revisaron en el día 6 post estro por medio de palpación rectal con la finalidad de encontrar cuerpos lúteos de buena calidad, para ser transferidas por lo cual se clasificaron en escala del 1 al 3 (1= pobre, 2= buena, 3= excelente), siendo mejores aquellos CL con calidad 2 y 3; por lo que se seleccionaron para la transferencia grupo I (n=70 animales) presentando calidad de CL2= 39/70 (55.7%) y CL3= 31/70 (44.2%), en el grupo II (n=72 animales) CL2= 43/72 (40.2%) y CL3= 29/72 (59.8%). Al momento de la transferencia (día 7), el Grupo I recibió una inyección de Solución Salina Fisiológica (SSF) y el Grupo II recibió una dosis de 1500 UI de hCG. Después de esto a los 60 días de la transferencia se realizó el diagnóstico de gestación en los animales transferidos, y se observo que del Grupo I; 29/70 (41.4%) hembras resultaron gestantes y 41/70 (58.6%) no gestantes; de éstas 16/29 presentaban CL2 (55.2%) y 13/31 con CL3 (44.8%). Mientras que el Grupo II 37/72 hembras se (51.4%) diagnosticaron como gestantes y 35/72 (48.6%) resultaron no gestantes; de estas 18/37 con CL2 (48.6%), 19/37 con calidad CL3 (51.4%), no mostrando diferencia significativa (P>0.05) en calidad de CL2 y habiendo diferencia significativa (P<0.05) calidad de CL3 después de la transferencia. DISCUSIÓN En este trabajo se encontró que de las 292 hembras sincronizadas, con un progestágeno sintético (Norgestomet) presentaron estro el 76.7% y 75.3% del grupo I y II respectivamente, estos resultados no muestran diferencia significa (P>0.05) entre los tratamientos. Mata et al. (2001) obtuvieron Mata un 75%, de sincronización utilizando Norgestomet, esto es similar a lo encontrado en este trabajo. En relación a la calidad del Cuerpo Lúteo, en las vacas que fueron palpadas por vía rectal y seleccionadas para la transferencia de embriones. El Grupo I, presentó el 55.8% CL2 y Grupo II 59.7% CL2, obteniendo una diferencia significativa (P<0.05) en calidad del CL, mientras que en Calidad de CL3; en el Grupo I fue del 44.8% y Grupo II 40.3% , no hubo diferencia significativa (P>0.05), se considera importante establecer el tamaño y consistencia del CL, es decir que presente de buena a excelente calidad. Nishigai et al., (2001) lo consideran como un factor asociado para la selección de receptoras para la transferencia de embriones. Respecto al porcentaje de gestación en las hembras transferidas, se observó que en el Grupo I (41.4%) y Grupo II (51.3%) resultaron gestantes, encontrándose diferencia significativa (P<0.05), lo resultados obtenidos indican que al aplicar hCG en el día 7 post estro en hembras receptoras, incrementa los porcentajes de gestación; estos resultados son inferiores a los reportados por (Nishigai et al., 2002) quienes obtuvieron el 67%, al administrar 1500 UI/vaca de hCG para reforzar la función lútea en el día 6 post estro en receptoras de embriones (congelados). En conclusión, los resultados obtenidos en este estudio indican que el tratamiento con hCG al momento de transferir al embrión aumenta el porcentaje de preñez en las vacas receptoras. BIBLIOGRAFÍA Al-Katanani Y M, Drost M, Monson R L, Rutledge J J, Krininger C EIII, Block J. 2001. Pregnancy rates following timed embryo transfer with fresh or vitrified in vitro produced embryos in lactating dairy cows under heat stress conditions. Theriogenology 58: 171-182. Changas E S J, Lopes Da C L. 2004. Luteotrophic influence of early bovine embryos and the relationship between plasma progesterone concentrations and embryo survival. Theiogenology 64 (1): 49-60. Franco M, Block J, Jousan F D, De castro e Paulo L A, Brad A M, Franco J M. 2005. Effect of transfer of one or two in vitro-produced embryos and post-transfer administration of gonadotropin releasing hormone on pregnancy rates of heat-stressed dairy cattle. Journal of Animal Science 66: 224-233. Mata Castellanos F A, Hernandez C J, Gonzalez P E. 2001. Efecto del norgestomet inyectado sobre el folículo domínate persistente y la formación del cuerpo luteo en vacas sincronizadas con implantes de Norgestomet. Vet. Mex. 32: 19-25. Nishigai M, Kamomae H, Tanaka T, Kaned Y. 2002. Improvement of pregnancy rate in Japanese Black cows by administration of hCG to recipients of tranfered Frozen-thawed embryos. Theriogenology 58: 1597-1606. Nishigai M, Takamura A, Kamomae H, Tanaka T, Kaneda Y. 2001. The Effect of Human Chorionic Gonadotropin on the Development and Function of Bovine Corpus Luteum. Journal of Reproduction 47: 283- 294.