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10/6/2012
49º Symposium Científico de
Avicultura 2012. Facultad de
Veterinaria de la UAB. Campus de
Bellaterra (Barcelona)
Octubre 2012
Hepatitis por Cuerpos
de Inclusión
•Estructura viral




Pedro Villegas
Univesidad de Georgia
Athens, Georgia, USA


Capsid icosahédrico
Sin envoltura
70 - 80 nm de diámetro
240 hexon subunidades
12 penton subunidades
Dos fibras en cada penton
Classificación
CLASIFICACION
• Familia Adenoviridae
Familia
Adenoviridae

Género Mastadenovirus

Adenoviruses de mamíferos

Género
Mastadenovirus
Género
Aviadenovirus
Género
Siadenovirus
Género
Atadenovirus

Género Aviadenovirus

Grupo I Adenoviruses aviares


Clasificación
• Género Siadenovirus
– Enteritis hemorrágica de los pavos
– Enfermedad del bazo marmoleado de los
faisanes
– Esplenomegalia aviar
• Género Atadenovirus
HA: (Ad2 y Ad5)
Antígenos de grupo (I, II, III)
Hepatitis con cuerpos de
inclusión/Hidropericardio
Género Aviadenovirus
Clasificación actual:
12
FAV
Serotipos
Técnicas
Moleculares
Especies de
Ad
Adenovirus
i
aviares
A, B, C, D, E
• Síndrome de baja de postura
1
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Clasificación serológica del grupo I de adenovirus aviares
___Serotype___
European American
Proposed
Reference
Strain
Japan
Northern
Ireland
OTE
112
SR48
SR49
KR5
TR22
CR119
YR36
TR59
-
685
75
506
340
168
122
58
764
93
380
United
States
Hungary
Genomic
Group
H1
A
H3
H5
H2
H6
-
D
D
C
B
E
E
E
E
D
C
D
HEPATITIS CON CUERPOS DE
INCLUSION
Chicken
1
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
2
3
4
8
5
11
6
7
9
10
12
Duck
1
Goose
1
2
3
CELO
Phelps
GAL1
SR49
KR5
340
CR119
YR36/X11
TR59
764
A2
C2B
380
QBV,
Phelps
P7
J2
Tipton
X11
T8
B3
A2
C2B
-
GR
-
-
-
-
HA
N1
569
-
-
-
-
Breve historia




Roser Dolz

Hepatitis


1987 en Angara Goth, Pakistán
Medio Oriente, India, America Latina y
Japón
Serotipos 4 y 8 in Mexico (Cowen et
al. 1997)
Serotipo 4 en Ecuador y Pakistan
(Mazaheri et al. 1998)
Otros serotipos en diferentes países
Mortalidad - Broilers
Inicialmente se asociaba con
inmunosupresión
Estudios experimentales y brotes de
campo en Australia y Nueva Zelanda
confirmaron que algunos adenovirus
por sí sólos inducían la enfermedad
Edad (sem)
2
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Mortalidad - Broilers
3
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Hepatitis con cuerpos de
inclusión
Lesiones macroscópicas
Hígados pálidos,
friables inflamados
friables,
 Hemorragias
petequiales o
equimóticas

Interacciones
Hepatitis – Lesiones microscópicas
Agentes inmunosupresores
 Gumboro, Anemia, Marek
 Agravan el cuadro clínico
 Aumentan la mortalidad
 Australia y Nueva Zelanda
 Enfermedad reproducida sólo
con adenovirus
 Cepas patógenas de adenovirus



Hígado:
Cuerpos de inclusión
intranucleares,
redondos, grandes,
TRANSMISION


Vertical
 Madres infectadas transmiten virus
 Progenies
g
sin anticuerpos
p =
Enfermedad
 Transmisión de virus por
aproximadamente 3 semanas
 Aves adultas generan inmunidad
Horizontal: Aves susceptibles adquieren
el virus
TRANSMISION
Ruta
fecal/oral
Resistencia con la edad?
Anticuerpos maternales
Cepas patógenas inducen
enfermedad
4
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Aislamiento del virus


-
+
+

• Pollos sin anticuerpos son susceptibles.
• Pollos con anticuerpos son resistentes(~3 semanas).
• La protección maternal es específica de serotipo.
Embriones de
pollo
Membrana
corioalantoidea
Saco vitelino
Dr. Guillermo Zavala
Aislamiento del virus

Inoculación Experimental
Cultivo celular
 Hepatocitos,
p
,
riñón
 Línea celular
(LMH)
Pruebas moleculares
Aves libres de patógenos
Sin desafiar
Zsak y Kisary (1984)
Desafiadas con
FAV 9
(Cepa Stanford)

Grupos Genómicos


Hígado
pálido,
friable

A–E
Bam HI and Hind III
Erny et al. (1991) y
Pallister et al. (1993)



Enzimas de restricción
Patrones RFLP
Correlación con
patogenicidad
5
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Reference Strains
Group
A
B
C
D
Hind III RFLP of Avian Adenovirus Genomic DNA
Reference Strains
Group(s)
Ref. Strains
Group E
A
ANALISIS DEL HEXON
SECUENCIACION
C
D
Reference
Strains
Group E
SEROLOGIA
Prueba de Virus neutralización
 Pocos laboratorios la ofrecen
 Inmunodifusión en agar
 Comúnmente usada
 Poco sensible
 ELISA:
 No existe un kit comercial
 Pruebas en varios labs. privados

PCR

B
Cell Cont.
Cell Control
Bam HI RFLP of Avian Adenovirus Genomic DNA
Raue y Hess (1998)
 Hexon amplicon
La identificación y características de los
adenovirus del grupo I se logra usando
las pruebas moleculares
VIRUS NEUTRALIZACION
Elisa adenovirus
CROSS
A
CROSS
B
CROSS
C
CROSS
D
VIRUS
CONTROL
CELL
CONTROL
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CONTROL


 VACUNACION
Vacunas a virus vivo
 Australia, serotipo 8 patógeno
 Comerciales: No hay disponibilidad
 Macerados de hígados de aves
infectadas
Vacunas inactivadas
 Virus cultivado en células o
embriones
 Macerados de hígados
VACUNACION
 Reproductoras
 Durante
el levante
– 12 semanas
 Pollos de engorde ???
 Edad temprana
 Inmunoglobulina
 Buena protección inicial
 No muy duradera
8
RESUMEN
 Clasificación
de los adenovirus
 Identificación
 Aumento
en patogenicidad
p g
 Identificación del estado
inmunológico de las parvadas
 Control por medio de la
vacunación (Madres)
Gracias por su atención
7