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Resistencia
Bacteriana en el
Ecuador
Simposio interdisciplinar de investigación,
Postgrados y vinculación con la comunidad
Iliana Alcocer Negrete, Dra.
Pontificia Universidad Católica del Ecuador
Escuela de Ciencias Biológicas
Laboratorio de Microbiología
Laboratorio de Microbiología
Escuela de Ciencias Biológicas
Año 2004
Laboratorio de Microbiología
Escuela de Ciencias Biológicas
Interdisciplinaridad
ESCUELA DE
CIENCIAS
BIOLÓGICAS
FACULTAD DE
MEDICINA
Iliana Alcocer
Jeannete Zurita
Año 2009
Confianza
Apoyo mutuo
Grupos de trabajo
Apoyo de la PUCE
Laboratorio de Microbiología
Escuela de Ciencias Biológicas
Biología
Bioanálisis
Biología
Biología
Medicina
Biología
Laboratorio de Microbiología
Escuela de Ciencias Biológicas
Chef DRIII System
Para análisis de clonalidad
bacteriana por electroforesis de
campo pulsado
1. PUCE
2. San Francisco
3. INH
Laboratorio de Microbiología
Escuela de Ciencias Biológicas
Sistema de fotodocumentación
Molecular Imager Gel Doc XR+ BioRad
Laboratorio de Microbiología
Escuela de Ciencias Biológicas
Laboratorio de Microbiología
Escuela de Ciencias Biológicas
Laboratorio de Microbiología
Escuela de Ciencias Biológicas
Laboratorio de Microbiología
Escuela de Ciencias Biológicas
Antimicrobianos
• Los antimicrobianos son compuestos
relativamente sencillos, producidos por
bacterias u hongos que atacan
específicamente a las bacterias.
• Tienen capacidad, en baja concentración,
de inhibir el crecimiento bacteriano
• Pueden ser naturales, sintéticos o
semisintéticos.
Antimicrobianos
1940
Alexander Fleming, 1928
Desde el descubrimiento de la
penicilina, se han descubierto
una docena de nuevos tipos de
antimicrobianos y optimizado o
sintetizado cerca de una
centena.
Resistencia bacteriana
Cepas resistentes
raras
Exposición a
antimicrobianos
Cepas resistentes
predominantes
Resistencia
 Introducción en la terapia
 Aislamiento de cepas resistentes
 Capacidad adaptativa de las células
bacterianas
 Alta tasa de diseminación por transferencia
horizontal de genes de resistencia
Resistencia bacteriana
Patógeno
Resistente
Patógeno
Prevención de la
transmisión
Prevención de
la infección
Infección
Resistencia a los
antimicrobianos
Diagnóstico
y tratamiento
eficaces
Uso
acertado
Uso de
antimicrobianos
Preocupación mundial
• Resistencia a betalactámicos:
BLEEs
–AMP-C
–Carbapenemes
–
• Resistencia a quinolonas
• Resistencia a aminoglucósidos
Diseminación de la
Resistencia bacteriana
Beta lactamasas de espectro extendido
BLEE
Enzimas capaces de conferir a la bacteria
resistencia a penicilinas, cefalosporinas
de primera, segunda, tercera e inclusive
cuarta
generación
y
a
los
monobactámicos como el aztreonam, pero
no a cefamicinas ni carbapenémicos
Diseminación de la
Resistencia bacteriana
Enzimas modificadoras de aminoglucósidos
EMAs
1. acetiltransferasa (AAC),
2. fosfatidil transferasa (APH) y
3. adenil transferasa (ANT o AAD).
Resistencia Adquirida
Klebsiella
pneumoniae
Serratia
marcenses
Pseudomonas
aeruginosa
Pseudomonas
aeruginosa
Pseudomonas Klebsiella
aeruginosa
pneumoniae
AMIKACINA
GENTAMICINA
ESTREPTOMICINA
TOBRAMICINA
IMIPENEM
MEROPENEM
IMIPENEM
MEROPENEM
Carbapenemasas
Metalo-b-lactamasas
Tipo Serin-β-lactamasas
(Residuo de Serina en el sitio activo)
Clase A
Clase A
SME
NMC
SFC
KPC
GES
IMI
E. cloacae
S.
marcenscens
K. pneumoniae
P. aeruginosa
(Cationes divalentes tipo Zinc)
Clase D
OXA
Acinetobacter
baumannii
Clase B
IMP
VIM
SPM
GIM
SIM
NDH
Acinetobacter
baumannii
S. marcescens
P. aeruginosa
Especies patógenas:
Klebsiella pneumoniae
- Infecciones de
tracto respiratiorio
- Infección de vías
urinarias
- Sistema nevioso
osteoraticular
- Sepsis
Especies patógenas:
Escherichia coli
- Infección de vías
urinarias
- Sepsis
- Meningitis
- Enfermedad
diarreica
Especies patógenas:
Serratia marcescens
- Infecciones de
tejidos
- Sepsis
Especies patógenas:
Pseudomonas aeruginosa
- patógeno
oportunista
principalmente en
ambientes
hospitalarios
Materiales y
métodos
Hospitales participantes de la REDNARBEC y
laboratorios interesados
12. Vicente de Paúl
13. IESS Ibarra
14. Centro Médico Ibarra
15. Rodríguez Zambrano
16. Icaza Bustamente
17. Guayaquil
18. Roberto Gilbert
19. Luis Vernaza
20. De infectología
21. Alcívar
1. Carlos Andrade Marín
2. De las Fuerzas Armadas
3. De la Policía
4. Baca Ortiz
5. Enrique Garcés
6. Solca Quito
7. Vozandes Quito
22. Patronato San José
23. Clínica la Merced
24. Clínica Guadalupe
8. Vozandes Shell
9. Homero Castañer
10. Solca Cuenca
11. Clínica Santa Ana
25. Clínica del Río Cuenca
Población bacteriana
•2792 bacterias de origen clínico
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
Escherichia coli
Klebsiella pneumoniae
Serratia marcescens
Enterobacter cloacae
Enterobacter aerogenes
Proteus mirabilis
Citrobacter freundii
Staphylococcus aureus
Pseudomonas aeruginosa
Shigella spp.
IIdentificación genotípica
Identificación de genes de resistencia y
determinantes genéticos relacionados
en aislados entéricos de la Colección
Bacteriana Quito Católica CB-QCA
Identificación de genes por PCR
Secuenciamiento
DETECCIÓN DE GENES POR PCR
Y SECUENCIAMIENTO
 BLEE: blaSHV, blaTEM, blaPER, blaCTX-M y AmpC
 CARBAPENEMASAS: blaKPC, blaGES, blaVIM, blaIMP
blaSPM
 EMAs: aac(3)-IIa, aac(6’)-Ib, ant(2”)-Ia,,
 Resistencia a quinolonas: qnr
 IntI y RV de integrones clase I
Diseño de primer y padronización para
detección de genes
María Fernanda Yauri
David Ortega
Pedro Barba
Genotipaje de la
resistencia a
antibióticos en
aislados clínicos de
Klebsiella pneumoniae
productores de βlactamasas de
espectro extendido
(BLEE)
David Ortega Paredes
Confirmación fenotípica de producción de β-lactamasas de
espectro extendido (BLEE)
•
Prueba confirmatoria de producción de BLEE: Positivo aumento < 5 mm en el
halo de inhibición de cefalosporina de tercera generación / clavulanato
Detección de genes en
Klebsiella pneumoniae
100.0
•blaSHV cromosómico
•Componente de ADN cromosómico en ADN
plasmidial
0.0
Detección de genes en
Klebsiella pneumoniae
Primer lugar en la categoría pregrado universidades el área Ciencias de la Salud y el
Segundo lugar dentro de todas las áreas en la categoría Pregrado Universidades en la
IX Feria Nacional de Ciencia, Tecnología e Innovación (FENACYT 2008)
Búsqueda de BLEE y carbapenemasas
en enterobacterias
Diana Muñoz
Gabriela Yépez
Ana María Gómez
Castañier en Azogues
Enrique Garcés
232
Pablo Arturo Suárez
124
De La Policía Nacional
233
Gineco-Obstétrico
Isidro Ayora
Vozandes
De Niños Baca Ortiz
Solón Espinosa, Solca
Quito
General De Las
Fuerzas Armadas No.1
400
Carlos Andrade Marín
Número de aislados
Bacterias entéricas de origen clínico
1200
1075
1000
800
600
382
301
200
212
107
69
0
5
Comunitarias
60
Hospitalarias
49
50
49
40
33
34 34
30
20
19
17
16
11
10
7
15
13
9
8
5
2
4
1
0
12,1 / 2693/325
Enrique Garcés
Pablo Arturo Suárez
De La Policía
Nacional
Gineco-Obstétrico
Isidro Ayora
Vozandes
19,4
De Niños Baca Ortiz
18,9
Solón Espinosa,
Solca Quito
20,0
General De Las
Fuerzas Armadas
No.1
Carlos Andrade
Marín
Porcentaje
Porcentaje de BLEE en bacterias
entéricas
25,0
23,2
18,9
17,3
15,0
15,1
13,1
10,0
6,3
5,0
3,0
0,0
738 pb
Control negativo
Tercer caso
Cuenca
Segundo caso
Guayaquil
Primer caso
Azogues
Control positivo
Identificación molecular de KPC
Pseudomonas aeruginosa
RESISTENCIA A
CARBAPENEMES
37%
48/12
9
Aislados Resistentes a
Carbapenemes
RESISTENCIA A
AMINOGLUCÓSIDOS
61%
78/129
Aislados Resistentes a
Aminoglucósidos
Identificación de blaGES en
aislados de Pseudomonas
aeruginosa
31% (44/129)
Identificación de blaKPC en
aislados de Pseudomonas
aeruginosa
5,4% (7/129)
Identificación de blaVIM y blaIMP en
aislados de Pseudomonas aeruginosa
INTEGRONES
3,1%
22,5% (29/129)
blaVIM
7,8%(10/129)
blaIMP
Amplificación de genes EMAs en
Pseudomonas aeruginosa
27/129
(20,9%)
21/129
(16,3%)
13/129
(10,1%)
6/129
(4,7%)
Integrones Clase I
Total
Aislados
Presentan
Integrón
Clase I
Porcentaje
129
79
61,2%
% genes productores de carbapenemasas
presentes Integrones
Clase I
21,7%
Búsqueda de carbapenemasas en
enterobacterias
Camila Cilveti
Andrea León
Nathaly Espinel
Identificación molecular de BLEE
TEM
862pb
858pb
585pb
SHV
CTX-M
Identificación molecular de
carbapenemasas: serin-beta-lactamasas
blaKPC blaGES
864 pb
738 pb
A
Identificación molecular de
carbapenemasas: metalo-beta-lactamasas
blaVIM
A
blaIMP
Número de aislamientos entéricos
positivos para los genes de análisis
Número de aislamientos
300
281
Total
Hospitalarios
250
Total
Comunitarios
200
162
150
125
100
101
98
51
50
9
0
0
Total
blaCTX
blaTEM
27
16
blaSHV
0
blaPER
0
bla KPC
5
0
bla GES
1
0
bla IMP
4
0
bla VIM
Total blaCTX blaTEM blaSHV blaPER blaKPC blaGES blaIMP blaVIM
Casos
con
blaKPCn
Quito
6
7
8
10
14-22
11
Guayaquil
2
9
12
Azogues
1
3
13
4
5
Cuenca
Klebsiella pneumoniae
Serratia marcescens
Klebsiella oxytoca
Enterobacter aerogens
Enterobacter cloacae
Genotipificación de KPC por campo pulsado
Casos
con
blaGESn
8
Quito
11
14
15
Cuenca
Klebsiella pneumoniae
Klebsiella oxytoca
Casos
con
blaIMPn
Quito
Cuenca
Serratia marcescens
Casos
con
blaVIMn
Quito
16
19 17
Cuenca
Klebsiella pneumoniae
Morganella morganii
Serratia marcescens
Conclusiones
CONCLUSIONES
• Dentro de la población de estudio se encontró alta
resistencia a betalactámicos, aminoglucósidos y
carbapenemes y no registraron resistencia a
polimixina B, colistina, tigeciclina ni fosfomicina.
• Los resultados confirman que en nuestro medio hay
una evidente asociación entre producción de BLEE
y resistencia a otras familias de antibióticos, en
especial quinolonas, aminoglicósidos y
carbapenemes.
• Existe una relación entre la presencia de plásmidos
y de integrones con la alta resistencia
antimicrobiana.