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Bacterias simbiontes en el intestino de Triatoma dimidiata. Montejo López René, López Ordóñez Teresa*, Cruz Hernández Andrés. Centro Regional de Investigación en Salud Pública – Instituto Nacional de Salud Pública (CRISP-INSP). 4ª Norte esq. 19ª Poniente s/n, Colonia Centro. CP.30700. Tapachula, Chiapas, México. Correo electrónico: [email protected] Introducción Las chinches hematófagas, son vectores biológicos de T. cruzi. Uno de los principales vectores es Triatoma dimidiata que es intra y peridomiciliar (Dumonteil et al., 2002). En Chiapas T. dimidiata se encuentra domiciliada (López et al., 2006). Los triatominos poseen en su intestino bacterias simbiontes extracelulares que le aportan vitaminas y otros nutrientes esenciales para su desarrollo y normal crecimiento (Eichler & Schaub, 2002). Estas bacterias se transmiten de manera eficiente de insectos adultos a su progenie a través de la coprofagia (Beard et al., 2001) y se pueden utilizar como vehículos para el control de la enfermedad transmitida por los mismos, esto se logra creando bacterias recombinantes que expresen moléculas que controlen el desarrollo del parásito dentro del vector (Rodríguez et al., 2007). Material y métodos Se disectarón 25 chinches adultas de Triatoma dimidiata para obtener el intestino, los cuales fueron sembradas en medio de cultivo BHI, incubadas 24h a 37 ºC, las colonias aisladas fueron resembradas en caldo LB, 24h a 37ºC, a partir de este cultivo se realizó la extracción de ADN bacteriano (DNAzol® Reagent). Se amplificó un fragmento del gen r16S mediante PCR utilizando los cebadores: 63F; 5'CAGGCCTAACACATGCAAGTC-3' y 907R; 5'-CCGTCAATTCMTTTGAGTTT-3'. Los productos amplificados fueron purificados y secuenciados para identificación de las especies bacterianas presentes en los intestinos de los insectos. Resultados Las secuencias obtenidas se compararon con las almacenadas en la base de datos del GenBank utilizando el programa de Nucleotide Blast versión 2.2.28+. Se identificaron 6 géneros y 11 especies diferentes de bacterias simbiontes en el intestino de T. dimidiata. Conclusiones Se identificaron las siguientes especies de bacterias que habitan el intestino de Triatoma dimidiata, utilizando la secuenciación del gen que codifica para el RNA ribosomal 16S: Bacillus drentensis, Bacillus licheniformis, Bacillus megaterium, Brevibacterium iodinum, Delftia acidovorans, Delftia tsuruhatensis, Micrococcus luteus, Solibacillus silvestris, Staphylococcus gallinarum, Staphylococcus hominis, Staphylococcus saprophyticus. Al momento hay en curso dos experimentos para obtener evidencia de la dependencia de los insectos por los simbiontes bacterianos.
