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INVESTIGACIÓN DE BACTERIAS
EN SALIVA EMITIDA POR
TRIATOMINOS TRANSMISORES
DE T. CRUZI.
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Trypanosoma cruzi se encuentra ampliamente en
el continente Americano, con la distribución de
transmisores del orden Triatominae.
El papel de los triatominos en el ciclo de vida del
parásito es fundamental pues en ellos T. cruzi se
reproduce en fase de epimastigote y se diferencia
a la fase de tripomastigote metacíclico que posee
la capacidad de infectar al huésped vertebrado.
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Se han realizado estudios tratando de demostrar
la presencia de alguna fase de T. cruzi en saliva y
por extensión, la transmisión del parásito por esta
vía ha sido negativos en todos los casos.
Se ha estudiado la presencia de bacterias en las
glándulas salivales de los triatominos se a indicado
la posibilidad de encontrar cocos gram positivos.
Si la saliva de triatominos tuviera bacterias u otras
simbiontes patógenas al humano, existe la
posibilidad de su transmisión durante su
alimentación podrían producir una respuesta
inflamatoria local hasta una bacteremia grave.
Objetivo
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Investigar la presencia de bacterias simbiontes en
la saliva de Triatoma Infestans y discriminar si
son potencialmente patógenas para el humano.
Material y Métodos
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Se emplearon lotes de cuatro machos y de cuatro
hembras de Triatoma infestans, se probaron los
siguientes esquemas de alimentación artificial:
Esquema 1. Estimulación del Pronoto. Se procedió
a estimular la emisión de saliva mediante contactos
suaves con la yema del dedo índice directamente
sobre el pronoto de los ejemplares, previamente se
realizó una desinfección de la proboscis y se tomó
una muestra de la zona externa de la misma como
control negativo. Tras la emisión de saliva en
ambiente estéril, se colectó y se sembró.
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Esquema 2. Método del Hisopo. Se procedió a embeber
hisopos estériles con solución salina estéril precalentada a
37º C, se ofrecieron individualmente a los triatominos para
que se alimentaran directamente del algodón rico en solución.
Esquema 3. Método de la Membrana de Látex: Se
colocaron 2 ml de solución salina isotónica en recipientes
estériles y se taparon con una membrana de látex estéril, se
calentaron en baño Maria y se les ofrecieron a los
triatominos para que se alimentaran a través de la
membrana.
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El siguiente paso para todos los esquemas consistió en
sembrar masivamente el material biológico colectado
en placas con medio Agar Soya Tripticasa y Gelosa
Sangre respectivamente. A continuación se procedió a
incubar las placas a 37º C durante 24 horas. Se
determinó su morfología colonial, morfología
microscópica y tinción de Gram. Se sembraron las
siguientes pruebas bioquímicas: Cátalasa, Oxidasa,
Hemólisis,
Vogues-Proskauer,
Lactosa,
Maltosa,
Rafinosa, Dextrosa, Arginina, Manitol, Urea, Almidón,
Bilis Esculina y Novobiocina
Resultados
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La metodología de estimulación del pronoto arrojó
resultados negativos, en ningún caso se logró obtener saliva
para ser sembrada en los medios de cultivo.
En la metodología del hisopo, sólo dos ejemplares se
alimentaron de él y al sembrar no hubo crecimiento
bacteriano.
La metodología de la membrana de Látex dio resultados
positivos en todos los casos de alimentación de los
triatominos por lo cual fue la metodología de elección para
el estudio y las pruebas se realizaron por cuadruplicado.
La tabla 1 muestra los tipos de bacterias que se desarrollaron
en los medios de cultivo de acuerdo a sus características
coloniales y la tabla 2 las características microscópicas.
CARACTERÍSTICA
COLONIA A
COLONIA B
COLONIA C
COLONIA D
Tamaño
1 mm
3 mm
1 mm
1mm
Color
Blanco
Blanco
Blanco
Blanco
Forma
Circular
Ameboide
Circular
Circular
Elevación
Convexa
Convexa
Convexa
Convexa
Superficie
Lisa
Lisa
Lisa
Lisa
Aspecto
Húmedo
Húmedo
Húmedo
Húmedo
Borde
Entero
Ondulado
Ondulado
Entero
Luz Transmitida
Opaca
Opaca
Translucida
Opaca
Luz Reflejada
Brillante
Brillante
Brillante
Brillante
Consistencia
Mucoide
Mucoide
Butirosa
Butirosa
S/pigmento
TSA
S/pigmento
TSA
S/pigmento
TSA
Pigmento Difusible S/pigmento
Medio de Cultivo TSA
Tabla 2. Características microscópicas de las colonias bacterianas obtenidas
COLONIA A
COLONIA B
COLONIA C
COLONIA D
Gram
Positivo
Positivo
Positivo
Positivo
Morfología
Cocos
Cocos
Cocos
Cocos
Agrupación
Racimos
Pares o
Cadenas
Cadenas
Pares
Tabla 3: Presenta los tipos de bacterias que crecieron a partir de
la saliva de cada triatominio machos en experimentos por
cuadruplicado
EXPERIMENTO
Triatomino 1 Triatomino 2
Triatomino 3
Triatomino 4
1
A, B, D
A, B, C, D
A, B, C, D
Negativo
2
A, B, C, D
A, B, D
Negativo
A, B, C
3
Negativo
A, B, C, D
A, B, C, D
A, B, D
4
D
A, B, D
A, B, C, D
A
Tabla 4: Presenta los tipos de bacterias que crecieron a partir de
la saliva de cada triatominio hembras en experimentos por
cuadruplicado
EXPERIMENTO
Triatomino 1
Triatomino 2
Triatomino 3
Triatomino 4
1
A, B,
A, B, C
A, B, C, D
A, B, C, D
2
Negativo
A, B, C
Negativo
A, B, C, D
3
A, B
Negativo
Negativo
A, B,
4
A, B, C, D
Negativo
A, B,
A, B, C, D
Tabla 5: Los resultados muestran poca diferencias entre las bacterias
aisladas
BIOQUÍMICA
COLONIA A
COLONIA B
COLONIA C
COLONIA D
Hemólisis
γ
γ
γ
γ
Lactosa
Positivo
Positivo
Positivo
Positivo
Vogues Proskauer
Positivo
Positivo
**
Negativo
Maltosa
Positivo
Positivo
Positivo
Positivo
Rafinosa
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Dextrosa
Positivo
Positivo
**
Positivo
Arginina
Positivo
Positivo
**
Negativo
Manitol
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Urea
Positivo
Positivo
**
Negativo
Almidón
**
**
Positivo
**
Bilis Esculina
**
**
Positivo
**
Novobiocina
R
S
**
S
Oxidasa
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Catalasa
Positivo
Positivo
Negativo
Positivo
**: NO DETERMINADA
R: RESISTENTE
S: SENSIBLE
Discusión
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La alimentación de los triatominos en condiciones de
laboratorio debe de ser lo mas cercana a la real.
Los resultados obtenidos con las metodologías uno y
dos nos confirmaron que cuando la consistencia de
zona de la picadura es similar a la de la piel, los
ejemplares pican en la mayoría de los casos.
La ausencia de crecimiento bacteriano para el material
sembrado de algunos de los ejemplares como el
triatomino cuatro en el experimento 1 o el tres en el
experimento 2 pudo deberse
al estrés por
manipulación del ejemplar o al atravesar el látex no
hubiera emisión de saliva, o a que no existían
simbiontes en esos ejemplares al momento del estudio.

Las características macroscópicas y microscópicas
(tablas 1 y 2) de las bacterias obtenidas, no
correlacionan con los grupos de microorganismos que
son patógenos para el humano y que en un momento
podrían causar septicemia o alguna infección grave.

Las pruebas bioquímicas (tabla 5) en combinación con
las características antes referidas, nos permitieron
establecer tres especies de bacterias del genero
Staphylococcus: S. saprophyticus, S. hominis, y S.
caseolyticus, de ellas, solo S. saprophyticus tiene
importancia medica como agente etiológico de
infecciones del tracto Urinario, También se aisló
Enterococcus sp., el cual no es considerado patógeno
para el humano, pero todas las especies encontradas
son potencialmente capaces de causar septicemia en
casos excepcionales y de inmunocompromiso.
Conclusión
Confirmamos la existencia de simbiontes en saliva de
T. infestans y no se descarta la posibilidad de
presencia de patógenos.
Bibliografía
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Health Organization (PAHO/WHO). 2000. Geoepidemiological
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