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Uso veterinario
Kit de diagnóstico para detectar anticuerpos contra el Reovirus (REO)
Aviar.
Se han aislado reovirus de pollos con artritis (tenosinovitis), enteritis, retraso del crecimiento e inmunosupresión. La artritis viral
derivada de reovirus es la enfermedad asociada con reovirus mejor definida en pollos; la misma produce inflamación de la membrana
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sinovial y de la vaina del tendón. La infección por reovirus puede ocasionar pérdidas en términos de la producción de huevos y del
rendimiento, trayendo consigo un incremento de los costos para los productores avícolas.
El kit de ELISA, ProFLOK® REO, es una prueba serológica rápida y específica para la detección de anticuerpos contra reovirus en
muestras de suero de pollo. Éste fue desarrollado principalmente para ayudar en la detección de los niveles de anticuerpos contra
reovirus presentes antes y después de la vacunación en pollos así como para ayudar en el desarrollo y la evaluación de programas de
vacunación.
Características y beneficios
• Altamente específico para la detección de anticuerpos contra cepas de reovirus en pollos
2
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• Correlación alta (r = 0.93) con la prueba de neutralización de virus (VN) para reovirus
• Excelente coeficiente de variación (CV) entre placa y placa que demuestra una reproducibilidad constante con diferentes lotes a
través del tiempo
• Autorizado por el Departamento de Agricultura de los EUA (USDA)
• Vida de anaquel prolongada de 24 meses para un fácil manejo de inventarios
Desempeño del kit
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Especificidad
Los resultados que se muestran en la Tabla 1 indican que el kit ProFLOK® REO demuestra excelente especificidad para muestras de
anticuerpos contra reovirus pero no reacciona significativamente a anticuerpos contra otros agentes infecciosos aviares.
Tabla 1: Especificidad evaluada utilizando sueros monoespecíficos de los Laboratorios de los Servicios Veterinarios Nacionales (NVSL) y de Zoetis
SUERO DE REFERENCIA
VALOR PROMEDIO DEL COCIENTE
A ,B
MUESTRA/CONTROL POSITIVO (SP)
ESTATUS DE ANTICUERPOS
C
SEGÚN ProFLOK ® REO
Suero de control normal (NCS)
Virus de Enfermedad Infecciosa de la Bolsa (Zoetis)
Virus de Bronquitis Infecciosa - Mass (Zoetis)
Reovirus Aviar (Zoetis)
Virus de Enfermedad de Newcastle (Zoetis)
Virus de la Encefalomielitis Aviar (NVSL)
Virus de Enfermedad de Newcastle (NVSL)
Virus de Enfermedad Infecciosa de la Bolsa (NVSL)
Virus de Bronquitis Infecciosa - Ark (NVSL)
Virus de Bronquitis Infecciosa - Conn (NVSL)
Virus de Bronquitis Infecciosa - JMK (NVSL)
Virus de Bronquitis Infecciosa - H52 (NVSL)
Virus de Bronquitis Infecciosa - M41 (NVSL)
Mycoplasma gallisepticum (NVSL)
Mycoplasma synoviae (NVSL)
Virus de Laringotraqueítis Infecciosa (NVSL)
0.000
0.010
0.010
0.824
0.010
0.050
0.110
0.030
0.010
0.090
0.010
0.100
0.030
0.070
0.040
0.110
Negativo
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Reovirus Aviar (NVSL)
1.690
Positivo
A
Los valores son la media aritmética de 15 réplicas de cada muestra de suero (tres réplicas en cada una de cinco placas de ELISA).
Cociente muestra/control positivo (SP) = (OD de muestra - OD promedio de control normal) / (OD promedio de control positivo - OD promedio de control normal)
Rangos de valores dados por el umbral del kit ProFLOK® REO: un valor ≤0.150 se considera negativo y un valor >0.150 se considera positivo.
OD = Densidad óptica
B
C
Sensibilidad2
Los datos que se muestran en la Tabla 2 demuestran la sensibilidad del kit de ELISA ProFLOK® REO en comparación con la
prueba de VN para reovirus convencional. Se examinaron sueros con resultados conocidos de VN para reovirus. Los títulos de
anticuerpos en el ensayo de ProFLOK® REO mostraron una muy buena correlación con los títulos de anticuerpos por VN (r2 =
0.93).
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Uso veterinario
Tabla 2: Comparación entre títulos de anticuerpos ProFLOK® REO y títulos por VN para reovirus
MUESTRA
TÍTULO DE ANTICUERPOS POR VN
A
PARA REOVIRUS
597
395
128
96
32
1
2
3
4
5
A
B
TÍTULO DE ANTICUERPOS POR
B
ProFLOK® REO
5,367
3,541
2,915
2,055
1,385
Resultados de VN para REO obtenidos por un laboratorio comercial utilizando una cepa estándar del USDA (100 TCID50).
Log10 título = (1.077 x Log10 SP) + 3.460.
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Reproducibilidad
La variabilidad entre pozos dentro de una placa y entre placas correspondió a un CV de menos de 8%, los cual demuestra la buena
reproducibilidad del kit ProFLOK® REO.
Tabla 3: Variabilidad dentro de las placas de un lote
PLACA
A
B
B
RANGO DE OD
1
50
DENSIDAD ÓPTICA (OD) PROMEDIO DE LA
A
PLACA
0.648
0.650
%CV DE LA PLACA
0.546 - 0.793
0.525 - 0.787
7.31
7.30
100
0.667
0.564 - 0.774
6.09
Los valores son la media de 84 muestras de suero positivo para reovirus examinadas en cada placa.
Los valores indican el rango de valores de OD del suero positivo para reovirus dentro de cada placa.
Tabla 4: Resumen de variabilidad de placas de un lote
OD GLOBAL DE LAS PLACAS
0.665
A
B
C
A
RANGO DE OD
0.525 - 0.797
B
C
%CV
6.90
El valor es la media de tres placas de ELISA.
Los valores son el valor mínimo y el valor máximo de OD encontrados para los sueros positivos para reovirus en las tres placas de ELISA.
El valor es la media del CV combinado de las tres placas de ELISA.
Interpretación de los resultados
Los valores de títulos de anticuerpos obtenidos mediante el ensayo de ProFLOK® REO representan una comparación entre el nivel de anticuerpos
contra reovirus presente en cada muestra de campo de suero de pollo examinada y los sueros de control (normal y positivo) del kit de ELISA
ProFLOK® REO. Por lo tanto, es importante determinar en primer lugar que los valores obtenidos para los sueros de control (normal y positivo) del
ensayo de ProFLOK® REO sean válidos de la manera detallada en la sección “Valores de los controles del ensayo” del folleto de instrucciones antes
de interpretar los resultados obtenidos con el kit ProFLOK® REO.
El umbral del valor SP separa claramente a las muestras positivas de las muestras negativas. Una muestra negativa es una muestra que no es
significativamente diferente del suero de control normal.
El umbral del valor SP para el kit ProFLOK® REO es el siguiente:
VALOR SP
≤0.150
RANGO DE VALORES DEL TÍTULO DE ANTICUERPOS
DETERMINADO POR ProFLOK® REO
0
≥0.151
376 y superiores
Contenido del kit
Contenido: 960 pruebas (diez placas de 96 pozos)
Referencias:
1
Jones RC. Reovirus infections. In: Saif YM, et al., eds. Diseases of Poultry. 12th ed. Ames, Iowa: Iowa State Press, Blackwell Publishing, 2008;309-326.
2
Datos en archivo, Reporte de Estudio de Eficacia, 25 de agosto de 1987, Zoetis Inc.
ProFLOK® REO es una marca propiedad de Zoetis Inc., o alguna subsidiaria.
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