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Implementación de la metodología para la determinación cuantitativa de carboxihemoglobina por espectrofotometría UV-VIS en muestras de interés forense (sangre). Implementation of the methodology for the quantitative determination of carboxyhemoglobin by spectrophotometry UV-VIS interest in forensic samples (blood). Yuliana Manrique1, Luz Helena Sánchez Rodríguez1,2, Alexis Fontecha3 Correspondencia: Luz Helena Sánchez Rodríguez. Carrera 32 No. 29-31 Facultad de Salud, Universidad Industrial de Santander, Bucaramanga, Colombia. Teléfono: +57 (7) 634 4000 Ext 3135. Correo electrónico: [email protected] Resumen Introducción: En Colombia las intoxicaciones por monóxido de carbono, tanto suicidas como accidentales, son frecuentes en toxicología forense. Esta intoxicación está asociada con la combustión incompleta de materiales que contengan carbono; generalmente la intoxicación se produce por diversas fuentes de exposición como gases de escape de vehículos, humos de incendios, combustión incompleta de estufas de carbón, gasolina o keroseno, cigarrillo. Objetivo: Implementar la metodología de análisis rutinario de COHb mediante la técnica de espectrofotometría UV-VIS teniendo en cuenta los parámetros de precisión y linealidad, estableciendo la correlación entre la concentración de monóxido de carbono y la respuesta instrumental. Materiales y métodos: Existen diferentes métodos descritos en la literatura para determinar carboxihemoglobina (COHb) en sangre. En el laboratorio se compararon tres metodologías para analizar COHb por espectrofotometría UV-VIS en muestras de sangre: Saturación de oxihemoglobina con H2O2 y KMnO4 y COHb con CH2O2 y H2SO4. La primera metodología se empleó saturando muestra de sangre total; la segunda saturando la muestra de sangre previamente diluida con hidróxido de amonio acuoso (0.1%), en la tercera metodología se saturó sangre total con aire para la obtención de COHb al 0%. Resultados: Se analizaron tres curvas de calibración correspondientes a cada metodología con muestras de sangre de personas vivas como control positivo. Los resultados de las tres metodologías muestran una tendencia lineal al existir correlación significativa entre la absorbancia y la concentración a un intervalo de confianza del 95%. El modelo lineal para ser utilizado de forma rutinaria se expresa por la ecuación Y= 0.1064x + 0.8714 (metodología 1) donde Y es la relación de absorbancias a 538nm y 568nm y X el % de saturación de COHb. Esta metodología arroja un coeficiente de correlación de 0.999. Los resultados mostraron una buena precisión con un CV menor al 1%. Conclusiones: La implementación de la metodología, se logró gracias a la obtención segura de la saturación de monóxido de carbono y oxihemoglobina. Al saturar la muestra de sangre se debe tener en cuenta el lavado de gases ya que se observa deterioro de la hemoglobina cuando se inyecta directamente el gas a la muestra. Palabras clave: Carboxihemoglobina; Oxihemoglobina; espectrofotometría UV-VIS. (Fuente: DeCS BIREME). Citación: Manrique Y, Sánchez L, Mateus A. Implementación de la metodología para la determinación cuantitativa de carboxihemoglobina por espectrofotometría UV-VIS en muestras de interés forense (sangre). Rev. Fac. Cienc. Salud UDES. 2016;3(1.S1):38. http://dx.doi.org/10.20320/rfcsudes.v3i1.s1.p024 © 2016 Universidad de Santander. Este es un resúmen de acceso abierto (Open Access), distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution (CC BY 4.0), esta licencia permite a otros distribuir, mezclar, ajustar y construir a partir de esta obra, incluso con fines comerciales, siempre y cuando se adjudique el crédito al autor original y se cite este manuscrito como la fuente de la primera publicación del trabajo. 1 Línea Toxicología Ambiental y Toxicogenómica, Grupo de Investigación de Inmunología y Epidemiología Molecular, Facultad de Salud, Universidad Industrial de Santander, Bucaramanga-Colombia. Escuela de Microbiología, Facultad de Salud, Universidad Industrial de Santander, Bucaramanga-Colombia. 3 Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses, Bucaramanga- Colombia. 2 m – V – N m – – maaannngggaaa))) (((EEEnnn lllííínnneeeaaa))) – –V Vooolll... 333 – –N Nooo... 111... SSSuuupppllleeem meeennntttooo 111 – – EEEnnneeerrrooo--J-JJuuunnniiiooo 222000111666 – – ppp... 333888... 38 RRReeevvv... FFFaaaccc... CCCiiieeennnccc... SSSaaallluuuddd UUUDDDEEESSS (((BBBuuucccaaarrraaam
