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XI CONGRESO NACIONAL DE BIOTECNOLOGÍA Y BIOINGENIERÍA
MORTALIDAD EMBRIONARIA EN OVEJAS RECEPTORAS DE EMBRIONES TRATADAS CON
GnRH EN EL DIESTRO
Julio Ramón Ugalde1*, Eugenia González Parra2, Victor Meza Villalvazo2, Luis Navarrete Sierra1, Alvar Cruz
Tamayo4, Alfonso Aguiar Loría3, Sergio Erosa Denis3, Álvaro Domínguez Rebolledo2
1
Profesor-Investigador SIGA-ITA 2, 2Tesistas SIGA-ITA 2, 3Técnicos del CeSyRO, 4Investigador CeSyRC-SLP
[email protected]
Palabras clave: GnRH, Bisección, Transferencia de embriones
la ME en etapas tempranas, probablemente al inevitable daño
Introducción. En los ovinos, la transferencia de embriones
que se ocasiona a algunas células al momento de realizarse la
permite acortar los intervalos entre generaciones y duplicar el
bisección que se considera como el principal factor de las bajas
número de ejemplares de alto valor genético o en vías de
tasas de gestación después de transferir medios embriones (1),
extinción, por otra parte, la bisección embrionaria es una
en este sentido se reporta que pueden llegar a perder hasta 6.4
técnica que permite duplicar el número de embriones originales
% del total de sus células ya que entre mayor sea el número de
y obtener gemelos idénticos (1), eliminando la variabilidad
células viables el reconocimiento materno de la gestación será
genética entre individuos. Sin embargo, la mortalidad
mayor (7). Otro punto de discusión puede deberse a que los EB
embrionaria (ME) es un factor limitante en la aplicación
requieren un ambiente uterino diferente a los EE (1). Sin
sistemática de las técnicas de micromanipulación embrionaria,
embargo, no podemos descartar el importante papel que juega
siendo necesario estudiar estrategias para aumentar la
el CL, ya que en muchas ocasiones estas perdidas embrionarias
supervivencia del embrión. En este sentido, la GnRH
se deben a la regresión prematura del CL y la incapacidad de
(Hormona liberadora de gonadotropinas), permite inducir y
las ovejas para mantenerlos, lo cual ocurre más frecuentemente
sincronizar la ovulación mejorando la fertilización y el
en la gestación de EB que en la de EE (3;7). La prolificidad
desarrollo embrionario (2), aumentando la supervivencia
media al parto de los EB fue de 1.38 (11/8).
embrionaria (3), particularmente en embriones enteros, aunque
en embriones biseccionados no se sabe aún cual sería su
posible efecto.
Cuadro 1. Fertilidad (12 y 40 días postransferencia) y mortalidad
El objetivo del presente trabajo fue evaluar la viabilidad de
embrionaria (ME) de embriones enteros y biseccionados transferidos
embriones enteros y biseccionados transferidos en ovejas
en ovejas receptoras de embriones tratadas con GnRH en el diestro.
tratadas con GnRH en el diestro.
Metodología.
El trabajo se realizo en el Centro de
Selección y Reproducción Ovina (CeSyRO) – SIGA-ITA No. 2
de Conkal, Yucatán. Se utilizaron 40 embriones ovinos frescos
en estadio de mórula compacta de los cuales 20 fueron
biseccionados (EB) y 20 quedaron intactos (EE), siendo
transferidos en 40 ovejas receptoras previamente sincronizadas
mediante la inserción de esponjas vaginales impregnadas con
40 mg de acetato de fluorogestona (FGA; Cronogest, Intervet)
durante 14 días, aplicando a la retirada de las esponjas una
dosis intramuscular (IM) de 200 UI de gonadotropina coríónica
equina (eCG; Foligon, Intervet). La transferencia de los
embriones biseccionados (2 demi-embriones/oveja) y enteros
(1/oveja) se realizó a los 7 días de la retirada de las esponjas
mediante la técnica descrita por Ramón et al (4). Al momento
de la transferencia 20 ovejas (10 EE y 10 EB) recibieron una
dosis de GnRH decapéptida (100 µg IM; Fertagyl, Intervet). A
los 12 días postransferencia (5.5 edad embrión) se tomaron
muestras de sangre (5 ml) para determinar la concentración
plasmática de progesterona mediante radioinmunoanálisis
(RIA; estuche comercial DPC No.Catál TKPGX), siendo el
coeficiente de variación intra e inter ensayo de 6.64 y 2.94%,
respectivamente. A los 40 días postransferencia se realizó un
diagnóstico de gestación por ultrasonido (Aloka, mod 500
SSD, sonda transrectal de 7.5 MHz). La prolificidad media (no.
de corderos nacidos/no. de partos) de los EB se midió al parto.
Los resultados fueron analizados mediante la prueba de Chicuadrada (5)
Resultados y discusión. Los resultados de gestación y ME se
pueden observar en el cuadro 1. En el se aprecia que a los 12
días de vida, existe una tasa de gestación que muestra la no
existencia de diferencias entre grupos aunque se presentan
algunas tendencias positivas (P<0.1) (EEGnRH vs EBGnRH;
EET vs EBGnRH; y EBGnRH vs EBT), resultado de una
fertilidad (70%) similar entre EEGnRH vs EBT. Sin embargo,
los resultados a los 40 días postransferencia ya existen
diferencias entre grupos, principalmente entre EEGnRH vs
EBGnRH (P<0.01) y EET vs EBT (P<0.05). Los resultados
obtenidos con EEGnRH fueron similares a los reportados por
Ramón et al., (3). En este sentido, se sabe que la GnRH
prolonga la vida media del cuerpo lúteo (CL) mediante la
luteinización de folículos que deberían normalmente causar
luteólisis y/o inducir un CL accesorio de ahí que la
sobrevivencia embrionaria podría ser mejorada por el
incremento de la vida media del CL permitiendo al conceptus
estar sujeto a desarrollo más tiempo y secretar la señal
embrionica necesaria para establecer la gestación mejorando la
fertilidad (6). Por el contrario, el resultado en EB fue debido a
FERTILIDAD (%)
ME (%)
12 días**
40 días
10
70
70a
0
EEGnRH
10*
54
45c
16
EET
10
30
10b
33
EBGnRH
10
70
40d
42
EBT
ME: ovejas no paridas / ovejas diagnosticadas gestantes x 100
* Una oveja murió a la semana de transferida.
** P<0.1
Literales diferentes en la misma
columna indican diferencia
significativa: a, b= P<0.01; c, d=P<0.05.
TRATAMIENTO
n
Conclusión. Los resultados indican que la gestación y
supervivencia embrionaria se ven afectadas por el proceso de
bisección y que ovejas receptoras de embriones tratadas con
GnRH en el diestro muestran una mayor tasa de fertilidad
como consecuencia de una mayor supervivencia embrionaria.
Agradecimientos. Financiado parcialmente por Intervet y
Distribuciones Agropecuarias del Sureste.
Bibliografía.
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thawed sheep demi- embryos. Theriogenology. 37: 713-721.
2. Karsh, FJ., Moenter, SM. and Caraty, A. 1992 The provulatory
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Ortiz, J; González, E. 2004. Effect of a treatment with GnRH on the
embryonic viability in superovulated hair ewes. 15 ICAR. Brazil. 361
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Echegoyen, E. 1991. La técnica de la transferencia de embriones en el
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5. Statistix Versión 1.0 para Windows. 1996. Analytical Software
6. Thatcher, WW; Macmillan, KL; Hansen, PJ; y Drost, M. 1989.
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