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Tropismo HIV Capacidad del virus de HIV de infectar a una célula blanco usando un cocoreceptor definido asociado al CD4. Para entrar a la célula, el HIV usa el receptor CD4 y un co-receptor, CCR5 o CXCR4 CD4 CXCR4 CCR5 T-cell surface Berger EA, et al. Nature. 1998;391:240. Co-receptores y tropismo viral CCR5-trópico (R5) CCR5 CXCR4-trópico (X4) CXCR4 Dual--trópico (R5X4) Dual Tropismo viral R5 HIV – Utiliza el receptor CCR5 solamente R 5 D/M X4 HIV – Utiliza el receptor CCX4 solamente X 4 Dual HIV – Puede utilizar cualquiera de los dos coreceptores Mixed HIV – La poblacion de virus contiene de los tipos de virus Tropismo de HIV y Progresión de la enfermedad Mixed/Dual ↑X4 R5 X4-tropic Carga Viral Función Inmune Dual-tropic Limite detección del ensayo de tropismo R5-tropic Tiempo Ensayos de Tropismo Ensayos Fenotípicos TROFILE Ensayos Genotípicos Genotropismo Test de Tropismo: TrofileTM • Test para determinar la población de Virus de HIV existente en un paciente respecto de las características de sus proteínas de Envoltura que define el receptor utilizado para infectar las células. Genoma HIV y región involucrada en la definición de Tropismo 5’LT R gag 3’LT R pol PR RT IN env gp120 gp4 1 Fenotipo C1 6225 V1 V2 C2 7114 Genotipo V3 C3 V4 C4V5 C5 7218 7747 8792 Ensayo Genotípico de Tropismo Sangre Plasma HIV HIV--RNA RTRT-PCR V3 loop Interpretación de resultados Secuencia Automática Estrategia utilizada 1) Extracción HIV RNA V3 7114 7218 2) One Step RTRT-PCR (x triplicado) 3) 2nd PCR (A1 A2 A3) A1 A2 A3 4) Secuencuiación A1 TGTACAAGACCCAACAACAATACAAGAAAAAGTATACATGTAGGACG AGGGAGATCAATTTATGCAACAGAAAAAATAATAGGAGATACAAAAC A2 A3 AAGCACATTGT TGTACAAGACCCAACAACAATACAAGAAAAAGTATACATGTAGGACG AGGGAGATCAATTTATGCAACAGAAAAAATAATAGGAGATACAAAAC AAGCACATTGT TGTACAAGACCCAACAACAATACAAGAAAAAGTATACATGTAGGACG AGGGAGATCAATTTATGCAACAGAAAAAATAATAGGAGATACAAAAC AAGCACATTGT
