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IV Congreso Internacional de Ingeniería Bioquímica y XV Congreso Nacional de Ingeniería Bioquímica Del 4 al 7 de abril del 2006 en la ciudad de Morelia Mich. México.
DETERMINACIÓN Y EXTRACCIÓN DE LAS ENZIMAS: POLIFENOL OXIDASA, PEROXIDAS,
CATALASA Y LISOZIMA EN EL ORÉGANO MEXICANO (Lippia ssp.).
Arroyo Maya Izlia Jazheel, Hernández Unzón Haydeé Yazmín. Escuela Nacional de Ciencias Biologicas-IPN.
Tel., 01(55) 57296300 Ext. 62464, [email protected], México, D.F.
Objetivo.
Determinar si las enzimas polifenol oxidasa, peroxidasa
y lisozima están presentes en el orégano y conocer su
actividad.
Desarrollo experimental y metodología.
PREPARACIÓN DEL EXTRACTO ENZIMÁTICO: Se
pesan 50 g de orégano fresco, se muelen con 250 mL
de NaCl 5%, después se filtra y posteriormente se
vuelve a filtrar, el sobrenadante se recupera y se
congela para posteriormente realizar la determinación
enzimática.
MÉTODOS: Polifenol oxidasa (Kimberly y Lee, 1981);
Catalasa (Maehly, A.C. y Chance, B., 1954); Lisozima
(Rendina, 1974); Peroxidasa (Maehly, A.C., y Chance,
B., 1954).
Resultados y discusión.
Los experimentos se hicieron por triplicado y los
resultados obtenidos para PFO a diferentes
concentraciones de enzima se muestran en la Fig. 1.
UNIDADES DE ACTIVIDAD ENZIM
Introducción.
Con el nombre de orégano se conocen en la República
Mexicana aproximadamente 40 especies de plantas
herbáceas pertenecientes a cuatro familias botánicas,
las cuales son: verbenáceas, labiadas, compuestas y
leguminosas. El aroma y sabor que los diversos tipos
de orégano proporcionan a los alimentos los hacen
agradables al olfato, al paladar y favorecen su digestión
(1).
El
orégano
tiene
diversas
propiedades
farmacéuticas: los aceites aromáticos producidos a
partir de sus hojas son usados como antioxidantes,
debido a que el orégano es rico en compuestos
fenólicos (2). Por lo anterior, el uso de orégano en la
industria alimentaria se ha incrementado, debido a que
los antioxidantes obtenidos de fuentes naturales,
muestran ser efectivos en la prevención del deterioro
oxidativo ya que retarda la degradación de lípidos y
provee de calidad y valor nutricional a los alimentos.
Por otro lado, el orégano contiene enzimas que pueden
tener gran importancia durante el procesamiento de
esta planta, dichas enzimas como la lisozima, la
polifenol oxidasa, y la peróxidasa, son importantes
por las reacciones que catalizan y tal vez modifiquen las
características de un producto elaborado a base de esta
planta, le confieran una propiedad funcional o afecten
sus propiedades antioxidantes.
El oscurecimiento enzimático causado por la polifenol
oxidasa (PFO) ocurre cuando se dañan los tejidos de las
plantas y representa un importante problema económico
para productores y consumidores. El oscurecimiento
enzimático se presenta al oxidarse los compuestos
fenólicos a sus correspondientes quinonas por acción de la
PFO en presencia de oxígeno. Posteriormente las
quinonas se condensan y forman pigmentos oscuros (3).
La peroxidasa es una enzima presente en varios tejidos y
componentes celulares en plantas, y está involucrada en
numerosos procesos como: lignificación, defensa
antipatógenos, cicatrización. Además, la peroxidasa
presente en algunos hongos y plantas participa en la
degradación de algunos contaminantes aromáticos (4). La
enzima lisozima es una hidrolasa que cumple funciones de
protección antibacteriana en algunas plantas y animales,
ya que hidroliza el enlace glucosídico de los polisacáridos
que forman las paredes celulares de las bacterias, Esta
enzima hidroliza los enlaces β-1,4 entre el ácido Nacetilmuramico y los residuos de 2-acetamido-2 desoxiDglucosa (la unidad básica repetitiva de las paredes
celulares de las bacterias), en los mucopolisacáridos o los
mucopéptidos de diversos organismos.
0,3
0,25
0,2
0,15
0,1
0,05
0
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
mL DE EXTRACTO ENZIMÁTICO
Figura 1. Unidades de Actividad Enzimática de la PFO
vs mL de Extracto Enzimático en 10 minutos.
Conclusiones.
Los resultados obtenidos al medir la actividad de la
enzima PFO del Orégano Mexicano (Lippia ssp), indican
que hay una gran actividad de ésta enzima en el
extracto de orégano, al presentar los datos en la gráfica
se observa que a mayor concentración de extracto, la
actividad enzimática aumenta rápidamente, esto se
debe a la gran cantidad de sustrato (que se encuentra
en la planta misma y al sustrato adicionado al hacer la
determinación de la PFO). No obstante, el exceso de
sustrato disminuye la actividad enzimática como se
observa al aumentar la concentración de extracto
enzimático.
1.
2.
3.
4.
Bibliografía.
Huerta, C., (2003). Orégano Mexicano: oro vegetal.
www.conabio.gob.mx.
Matheis, G., (1983). Enzymatic Browning of Foods. Z.Lebensm.
Unters. Forsh. 176, 454-462.
Djiana, R.; Berthe, T.; Burel, C.; Schaumann, A.; Bruyant, P.;
Balange, A. (1996). Partial purification and characterization of
basic peroxidases from flax cell-culture medium. Plant Physiol.
34, 853-861.
Zheng, Z.; Pinkham, L.; Shetty, K. (1998). Identification o
Polymeric Dye-Tolerant Oregano (Origanum vulgare). J. Agric.
Food Chem. 46, 4441-4446.
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