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MODELOS ANIMALES EN LA
INVESTIGACIÓN DE LOS EFECTOS
DEL ALCOHOL
Richard A. Deitrich Ph.D.
University of Colorado
Alcohol Research Center
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¿QUÉ TIENEN EN COMÚN ESTOS DOS?
Todos suponemos que los descubrimientos bioquímicos, fisiológicos, farmacológicos
y genéticos en animales más simples tienen su contraparte en la biología humana. Si
bien tal es el supuesto que todos tienen, nos corresponde tratarlo con mucha
prudencia. El organismo humano no sólo es mucho más complejo que cualquier
modelo animal, sino que los seres humanos pueden resolver problemas biológicos de
maneras diferentes, incluso que nuestros parientes más cercanos en el reino animal.
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¿POR QUÉ TENER
MODELOS ANIMALES?
• Desarrollar mejores métodos de
diagnóstico, tratamiento y prevención
del abuso de alcohol humano y
alcoholismo
• Avance del conocimiento: Valor
científico independiente de la salud
humana
Lo que descubrimos mediante el uso de modelos animales adelanta la base del
conocimiento de la biología; pero si ese es el único objetivo, entonces tendríamos que
postular a NSF no a NIH (National Institutes of Health), para que apoye nuestro
trabajo. En último término, los estudios en animales deben traducirse en mejores
diagnósticos, tratamiento y prevención del abuso de alcohol y el alcoholismo.
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VENTAJAS DE LOS
MODELOS ANIMALES
1. Sistemas más simples
2. Aislan acciones específicas del
etanol
3. Llevan a cabo procedimientos que
no son posibles en humanos
4. Tiempos de generación más cortos
5. Ciclos de vida más cortos
Esta es una situación ambivalente. Por cada ventaja, en los modelos animales, hay un
inconveniente. Los animales ofrecen un sistema más simple con el cual trabajar, pero
si este sistema es tan simple que los humanos ya no lo utilizan, entonces el modelo
no tiene relación con nuestro objetivo principal. Podemos aislar las acciones
separadas del etanol en diversos sistemas, pero perder la capacidad de descubrir las
complejas interconexiones entre los sistemas. Son animales cuyos períodos de
gestación son más cortos y cuyas vidas son más cortas, lo que nos permite aplicar
presiones genéticas selectivas para elaborar modelos animales, pero perdemos la
capacidad de estudiar los efectos del alcohol a largo plazo.
Las vidas más cortas presentan un problema sutil. Cuando tratamos animales con
etanol, la velocidad con la que desaparece del organismo no es tan diferente de la
velocidad en los seres humanos; pero el tiempo que el etanol pasa en el organismo
representa una fracción mucho más grande de la vida del animal que una dosis
similar en un ser humano.
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¿CÓMO SABER SI HEMOS
TENIDO ÉXITO?
¿El modelo animal refleja:
1. El comportamiento humano?
2. La fisiología humana?
3. La bioquímica humana?
4. La genética humana?
5. ¿Los hallazgos en animales predicen
efectos en humanos?
Como nuestro propósito es proporcionar información acerca del modo como el etanol
actúa en los seres humanos, los modelos que elijamos y las técnicas que utilicemos
para estudiarlo deben ser pertinentes frente a la biología humana. El comportamiento
humano es tanto más complejo que el de cualquier animal, no podemos pretender
duplicar las reacciones humanas en ningún modelo animal. Sin embargo, sí tenemos
una ventaja: que podemos estudiar comportamientos más simples en ausencia de las
complicaciones de otros más complejos.
La fisiología animal, especialmente en los mamíferos, se parece a la fisiología
humana, lo mismo que la bioquímica animal se parece a la humana. En buena parte,
es cuestión de fe que las influencias genéticas humanas sobre la fisiología, la
bioquímica y el comportamiento humanos van a parecerse a las de los animales. La
correspondencia estrecha entre la estructura básica del genoma de los humanos y el
de los ratones nos permite tener mucha confianza en que así resultará..
La prueba definitiva de todos estos factores será la capacidad de tomar un dato
observado en animales y usarlo para predecir una conducta, una reacción fisiológica o
bioquímica, en seres humanos. Dado el esfuerzo dedicado al genoma de los ratones y
de los seres humanos, es probable que aquellos genes, cuyas funciones se han
descubierto en el animal, resolverán la función de genes similares en humanos.
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MÉTODOS GENÉTICOS
1. CEPAS CONSANGUÍNEAS
2. LÍNEAS NO CONSANGUÍNEAS
3. LÍNEAS/CEPAS SELECCIONADAS
4. LOCI DE CARACTERÍSTICAS
CUANTITATIVAS
5. CEPAS CONGÉNICAS
CEPAS CONSANGUÍNEAS. Animales en los cuales veinte generaciones, por lo
menos, de apareamientos entre hermanos han dado como resultado que todos los
alelos sean idénticos, menos los cromosomas del sexo. Esto conduce a que la
variabilidad experimental será producto de factores ambientales, no genéticos. Es
crucial que, al realizar comparaciones de cepas consanguíneas, se estudie la mayor
cantidad de cepas, porque n es el número de cepas probadas, no el número de
animales.
LINEAS NO CONSANGUÍNEAS. Animales que se han mantenido, en forma
intencional, lo más genéticamente heterogéneos posible. Normalmente se mantiene
entre 10 y 40 pares de animales de reproducción. Aun así se produce algún grado de
consanguineidad en el tiempo; cuanto menor es el número de parejas reproductoras,
mayor será la cosanguineidad. La variabilidad experimental se debe a factores
genéticos, ambientales e interacciones entre la genética y el ambiente. Estos
animales son útiles en el mapeo genético fino, ya que los grupos de linkage están
destruidos. También se utilizan como punto de partida para cruzamiento selectivo.
Muchas veces son el resultado de entrecruzamientos intencionales de varias cepas
consanguíneas, normalmente a lo menos ocho. Hay líneas no consanguíneas
disponibles, tanto de ratones como de ratas, cuidadosamente mantenidas.
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MÉTODOS GENÉTICOS
1. CEPAS CONSANGUÍNEAS
2. LÍNEAS NO CONSANGUÍNEAS
3. LÍNEAS/CEPAS SELECCIONADAS
4. LOCI DE CARACTERÍSTICAS
CUANTITATIVAS
5. CEPAS CONGÉNICAS
CEPAS SELECCIONADAS: CRUZAMIENTOS SELECTIVOS. Proceso que se inicia
generalmente con la elección de una característica de comportamiento relacionada
con etanol que se debe seleccionar genéticamente en un grupo de animales no
consanguíneos. A todos los animales se les administra la misma dosis de etanol y se
evalúa el comportamiento. Los animales que tienen los puntajes más altos se cruzan
(manteniendo condiciones de no consanguinidad) y los que tienen los puntajes más
bajos también se cruzan. Los grupos con puntaje alto y bajo no se mezclan. El mismo
proceso se repite en cada generación hasta que no haya nuevas separaciones entre
los grupos. La consanguinidad de las líneas seleccionadas frecuentemente comienza
en este punto. Los animales son útiles para estudios bioquímicos y fisiológicos, ya
que los dos grupos deben diferenciarse sólo en cuanto a aquellas características que
se relacionan con el comportamiento seleccionado. Haciendo cruces entre las líneas
o cepas seleccionadas, es posible crear genéticamente Quantitative Trait Loci
responsables de la característica seleccionada.
CEPAS CONGÉNICAS. Cepas muy útiles para identificar regiones específicas del
genoma a las que se debe una actuación conductual determinada. El proceso se
puede llevar a cabo mediante métodos de cruzamiento por desarrollo de cepas
asistido por marcador, si hay marcadores genéticos al borde de aquella región del
genoma que se transferirá a otro fondo. Por ejemplo, se ha podido colocar un
pequeño segmento del genoma de animales Sueño Corto sobre un fondo de Sueño
Largo, y viceversa (Johnson and Bennett).
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MÉTODOS GENÉTICOS
6. TRANSGÉNICOS
7. ANIMALES KNOCK-OUT
8. ANIMALES KNOCK-IN
9. MUTACIONES ALEATORIAS
10. GENES CANDIDATOS
11. TRANSVECCIÓN A OOCITOS/LÍNEAS
CELULARES
ANIMALES TRANSGÉNICOS. Procedimiento en el cual el gen que expresa una proteína de
interés se inserta al azar en el genoma de un animal, con lo que se obtiene un animal que
sobreexpresa la proteína. La desventaja de este proceder es que la inserción es aleatoria y
puede tener consecuencias genéticas desconocidas. El trasfondo sobre el cual se hace el
animal transgénico es también un factor de complicaciones. Se puede desarrollar animales
transgénicos de desarrollo y tejido específicos, y son más recomendables..
ANIMALES KNOCKOUT. Se inactiva un gen con el fin de que haya una deficiencia de la
proteína que el gen codifica. Nuevamente, el trasfondo es importante. Los animales knockout
condicionales, en los cuales el gen que se va a eliminar se puede eliminar más tarde en el
desarrollo, ha sido un adelanto. También se desea knockouts de tejidos específicos.
ANIMALES KNOCKIN. Un gen que se ha eliminado se puede rescatar mediante la reposición
del gen en la posición debida en el genoma. Es la mejor evidencia de que el fenotipo ausente
en el animal knockout y presente en el animal knockin era dependiente de ese gen en
particular y no de otras aberraciones en el funcionamiento del genoma. Además, se puede
colocar un gen adicional en el lugar correcto del genoma, al contrario de los animales
transgénicos, en los que el gen se coloca al azar.
MUTACIONES ALEATORIAS. Se induce mutaciones mediante radiación o elementos
químicos, y se estudia los fenotipos en la descendencia. Este proceso se ha defendido como
alternativa a la cruzamiento selectivo o a la comparación de cepas consanguíneas, con la
consiguiente determinación del Quantitative Trait Loci. Obviamente, esto funcionará mejor en
organismos con una gran descendencia y un intervalo generacional corto, pero también se ha
aplicado con éxito en roedores.
GENES CANDIDATOS. Con datos de estudios conductuales, bioquímicos, neuroquímicos o
neurofisiológicos (o una combinación de todos ellos) se identifica una vía posible de
investigación. Los genes que controlan las proteínas que participan en estas vías pueden
buscarse en animales que exhiban el fenotipo deseado y se pueden hacer animales
transgénicos, animales knockout o knockin, aprovechando esta información. En este aspecto,
el trasfondo puede ser de vital importancia, pues se ha encontrado que un tipo de
comportamiento que se atribuye a un gen en un trasfondo, no se puede duplicar en otro
trasfondo.
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AUTOADMINISTRACIÓN
1.
2.
3.
4.
5.
Preferencia: Discusión de métodos.
Opción “Forzada”
Preferencia en animales “adictos”
Aceptación
Refuerzo “Trabajar por un trago”
Hay numerosos paradigmas de autoadministración en uso. Es lamentable,
pero muchos investigadores no comparan sus métodos con otros, lo que
termina con una abundancia de resultados publicados que son contradictorios
o discordantes. Por lo común, a los animales se les da a elegir entre una
botella que contiene alcohol a una concentración baja y una de agua. Se mide
el nivel del líquido en la botella, generalmente todos los días, y las posiciones
se invierten. Las variaciones en las concentraciones de etanol, la presencia
de otros compuestos químicos, ya sea en el etanol o como una tercera
opción, los cambios ambientales, etc., todos contribuyen a la posibilidad de
ensayos que se pueden tornar muy complejos.
A menudo al animal no se le da opción durante varios días, y así se obliga la
ingesta de una parte, al menos, de la solución con alcohol. Luego de un lapso
largo de ingesta forzada, los animales se vuelven tolerantes y dependientes
(adictos). La autoadministración en estos animales se usa como modelo de
“abstinencia” en humanos.
La aceptación es el proceso por el cual se priva a los animales de agua y
luego se les ofrece la opción de agua o etanol, o a veces sólo de etanol. La
cantidad tomada se denomina “aceptación”, pero no siempre se correlaciona
muy bien con la preferencia en la misma cepa.
Hay numerosas técnicas operantes, en las cuales el animal realiza alguna
tarea para lograr una recompensa. Algunos animales trabajarán para obtener
alcohol, ya sea para beberlo o inyectado directamente al estomago o cerebro.
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PREFERENCIA
1. Concentración
2. Gusto
3. Cantidad y momento
a) Contador de lamidos
4. Acceso limitado
5. Alta ingesta
a) Consumo
b) Químicos- Cianamida, TIQ’s
Concentración: Una técnica consiste en aumentar la concentración de alcohol en el
paradigma de preferencia hasta que el animal no aumente el consumo absoluto de
etanol, o incluso beba menos. Este nivel se convierte en la línea basal de ingesta del
animal y contra ella se miden todas las manipulaciones farmacológicas. El sabor del
alcohol de laboratorio al 10%, mezclado en agua tibia, no es muy agradable para la
mayoría de los seres humanos.
En la literatura preliminar, la velocidad a la cual el animal toma el alcohol y la hora del
día en que lo hace, fue en gran medida pasada por alto. El uso de dispositivos
registradores automáticos, como los contadores de lamidos, ha corregido este
problema. Muchas veces, el patrón de la ingesta, no la cantidad absoluta, es lo que
interesa más. Relacionado con esto, nos encontramos con el problema de que, con el
fin de atribuir la ingesta a un animal en particular, era necesario mantener a cada
animal aislado en un solo lugar. Esto es motivo de estrés, pero, en animales alojados
en grupo, para determinar cuál animal es el que bebe, se necesitan cámaras de video,
o implantar chips en el cuello del animal y un dispositivo para detectar cuál animal
está bebiendo en un momento determinado, junto con el contador de lamidos.
Los paradigmas de acceso limitado son otra técnica que sirve para medir el deseo de
beber alcohol en un animal.
En muchos de estos paradigmas, según la especie o cepa del animal, no se ingiere
una cantidad de alcohol suficiente para producir la intoxicación, y desarrollar
tolerancia y dependencia. Para superar esto, se han elaborado diversos métodos para
inducir al animal a beber más alcohol.
Uno de los métodos más eficaces es la técnica del consumo de sacarosa, en la cual
se administra al animal una solución de sacarosa, en un principio como opción y luego
se va reemplazando poco a poco por etanol. Se ha visto que la administración de
algunos compuestos también induce la ingesta de cantidades mayores de etanol. Se
ha utilizado la cianamida, que es un inhibidor de la aldehído deshidrogenasa y de la
catalasa, así como las inyecciones ICV de tetrahidroisoquinolinas. Estos compuestos
son productos de condensación de aminas biogénicas y aldehídos, incluso el
acetaldehído.
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PREFERENCIA
1. Diferencia de especies y cepas
2. Cruzamiento selectivo: Ratas
a)
b)
c)
d)
e)
UCha, UChb
AA/ANA
P/NP
HAD/LAD
SP/SNP
i.
Ratones
Muchas cepas consanguíneas de ratones y ratas se utilizan habitualmente en la
investigación sobre alcohol. Además, muchas líneas de ratas están criadas
selectivamente para preferir el alcohol. No obstante, sólo en un proyecto (Universidad
de Indiana) se ha seleccionado ratones que prefieran el alcohol.
Los detalles del cruzamiento selectivo y el uso de la genética en los modelos animales
se cubre en otra conferencia.
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PREFERENCIA
La preferencia, tal como se mide en
los modelos animales, ¿tiene alguna
relación con la ingesta voluntaria de
etanol en los humanos?
Algunos de los QTLs descubiertos
en el proyecto COGA, ¿se
relacionan en cuanto a preferencia
con alguno de los QTLs en
animales?
Esta es la pregunta que todo investigador debe hacerle a su modelo. En general, los
fármacos que influyen en la preferencia de los animales por el etanol alteran la
ingesta de etanol en humanos, pero, habitualmente, de manera mucho menos intensa
y, con frecuencia, en forma no significativa. Así, el uso de la preferencia por el alcohol
en animales como herramienta de selección de fármacos para uso en seres humanos
ha resultado decepcionante.
La segunda pregunta debe aguardar que haya más información a partir de los
estudios en seres humanos. La búsqueda de QTL en modelos animales adelantará
gracias a los resultados de estudios en humanos. Del mismo modo, la búsqueda de
QTL en seres humanos se verá facilitada por los resultados en modelos animales.
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Estudio de Preferencia
Esta medición no se correlaciona bien con el desempeño en la clavija
fija. Esta es también una función de la velocidad de la barra rotatoria.
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EFECTOS CONDUCTUALES
AGUDOS DEL ETANOL
1. Efectos a dosis altas:
a)
b)
c)
d)
e)
Anestesia “Tiempo de Sueño”
Reflejo de Enderezamiento Aéreo
Desarrollo de Tolerancia
Sensibilización
Cruzamiento SELECTIVO
Históricamente, se estudió primero los efectos del alcohol en dosis altas. La prueba es
simple; se mide el tiempo durante el cual un animal ha perdido la reacción de
enderezarse. Para esto se les coloca en un receptáculo de plexiglás o se les deja caer
desde una altura sobre una superficie blanda. Normalmente, los ratones no se
quedarán acostados de espaldas en el receptáculo y se darán vuelta o se
enderezarán en el aire para aterrizar de pie. Es importante obtener niveles
sanguíneos de etanol cuando se recupera la respuesta (y a veces también cuando se
pierde), con el fin de evaluar los efectos sobre el metabolismo del etanol mediante el
procedimiento que se está estudiando.
¿Por qué administrar dosis tan altas? Un motivo es para comprometer todos los
sistemas neuronales que afecta el etanol. Varios sistemas del cerebro reaccionan con
niveles bajos de etanol, y otros reaccionan sólo frente a dosis altas.
Otro factor de complicación es el desarrollo de tolerancia durante el tiempo de pérdida
de función. Ahora sabemos que la tolerancia a muchos de los efectos
electrofisiológicos del etanol comienza a desarrollarse en cosa de minutos, cuando no
de segundos, tan pronto el etanol ha llegado a una neurona. Esto se refleja en una
tolerancia conductual en una escala de tiempo algo más larga. El problema está en
que la medición de la pérdida de función se complica con el desarrollo de tolerancia
durante este tiempo. Cuanto más tiempo esté presente el etanol, mayor tolerancia se
desarrolla, hasta llegar a un nivel máximo. También es posible el desarrollo de
sensibilización a los efectos del etanol, pero generalmente no se observa. Se ha
criado ratones y ratas selectivamente para desarrollar sensibilidad a dosis altas de
etanol (“tiempo de sueño”), y otros ratones están criados para desarrollar tolerancia
funcional aguda.
Hay un cuerpo creciente de evidencia, con estudios de Schuckit y colegas, en el
sentido de que la insensibilidad al etanol o el rápido desarrollo de tolerancia son los
mejores predictores del riesgo de alcoholismo en seres humanos.
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DETERMINACIÓN DE
SENSIBILIDAD A ALTAS
DOSIS DE ETANOL
1. Dosis anestésica administrada i.p.
2. Determinar el momento de pérdida del
reflejo de enderezamiento.
3. Obtener muestra de sangre al
recuperarlo.
Las dosis de anestésicos varían ampliamente entre especies y entre cepas. Por
ejemplo, la dosis anestésica para los ratones de sueño largo es de 2,8 g/kg, pero,
para el ratón de sueño corto, es de 5,2 g/kg. La dosis anestésica para la estirpe de
basal (HS) es de 4,2 g/kg.
Es necesario obtener una muestra de sangre al recuperar (de preferencia también al
perder) el reflejo de enderezamiento para detectar el desarrollo de tolerancia o
sensibilización, además de los efectos anestésicos. Se debe usar un grupo separado
de animales para la determinación de la alcoholemia al momento de perder el reflejo
de enderezamiento.
La pérdida de la temperatura corporal en los ratones es un elemento de confusión en
los efectos centrales y hepáticos del etanol.
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Determinación de Sensibilidad
a Dosis Altas de Etanol
Este es el paradigma de comportamiento que se usa extensamente en el Laboratorio
de la Fundación de Investigación en Adicciones, en Toronto.
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EFECTOS CONDUCTUALES
AGUDOS DEL ETANOL
• Efectos a dosis bajas: Medición de Ataxia
•
•
•
•
•
•
Clavija
Plano inclinado
Cinta corredora
Cuerda
Barra rotatoria
Fuerza de agarre
Pantalla
Cámara de actividad
Etc.
Cruzamiento SELECTIVO
La medición de los efectos del etanol a dosis bajas exige someter a los animales a
alguna tarea física. Estas tareas son numerosas y el desempeño en una no se
correlaciona forzosamente con el desempeño en otra. Cuando se desarrolla una
nueva tarea, es importante realizar algunas mediciones con los métodos anteriores.
Los animales a menudo muestran tolerancia a la tarea, tolerancia que se puede
presentar antes de que se tome la primera medición del comportamiento. Las pruebas
frecuentes permiten detectar esta tolerancia, pero también introducen el problema de
los efectos de la práctica repetitiva. En todo caso, es preciso estudiar los efectos de la
práctica. En Finlandia se ha realizado el cruzamiento selectivo de ratas para
desempeñarse sobre el plano inclinado (ratas tolerantes al alcohol y no tolerantes al
alcohol). En Colorado se ha hecho cruzamiento selectivo de ratones para medir la
tolerancia en la tarea de la clavija (Tolerancia Funcional Aguda Alta y Baja, HAFT y
LAFT).
Estudios recientes demuestran que el control genético de la sensibilidad y de los
efectos de la tolerancia dependen de la cepa, del equipo empleado y del tiempo de
prueba. Por ejemplo, no se encontró sobreposición de QTL en el desempeño en la
barra rotatoria, clavija fija, cámara de actividad ni tiempo de sueño, en los ratones
criados selectivamente para la medición de los efectos del etanol.
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Ratón en la barra estacionaria
.
18
Foto de Animales en la
Rueda Rotatoria
Esta medición fue la que se utilizó para desarrollar las líneas de ratones con
tolerancia alta y baja al alcohol.
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Foto de un Animal en el
Plano Inclinado
Este es el paradigma conductual que se utilizó en Helsinki, Finlandia, para criar
selectivamente las ratas tolerantes al alcohol y las no tolerantes al alcohol.
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Rata en la Cinta Corredora
.
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MEDICIONES DE TOLERANCIA
• Tolerancia Aguda de Dosis Única
(TADU): Minutos
• Tolerancia Aguda Funcional (TAF):
Minutos a horas
• Tolerancia rápida: Horas a días
• Tolerancia crónica: Días
En esta diapositiva se presentan las definiciones de uso común de los diversos tipos
de tolerancia según el tiempo que se asignó a su desarrollo.
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Determinación de Tolerancia
.
23
Determinación de
Tolerancia de Dosis Única
.
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EFECTOS DE ETANOL A
DOSIS BAJAS
• ¿Cómo se siente?
Preferencia por Lugar
Caja de Espejos
Cajas de Actividades
Husmeo de la Cabeza
Laberinto Elevado
Bolo Fecal
Laberinto Radial
Discriminación de
Drogas
Etc.
Numerosas pruebas tienen por objeto emular algunas de las reacciones emocionales
y fisiológicas de los seres humanos bajo la influencia del etanol. Muchas tareas están
dirigidas a medir la angustia (laberinto), miedo (caja de espejos), impulsividad
(adelanto de la cabeza/paradigma de recompensa).
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EFECTOS EN EL
APRENDIZAJE
• ¿Qué pasó ayer?
• Laberinto de agua de Morris
• Otros paradigmas de aprendizaje
• ¿Tolerancia?
Se viene debatiendo desde hace muchos años la cuestión de si la ingesta excesiva de
alcohol en los seres humanos es una conducta aprendida o no. Un debate similar ha
ocurrido en cuanto al efecto de la experiencia de seres humanos y de animales bajo la
influencia del etanol, es decir, aprendizaje dependiente del estado. Todo el tema de la
tolerancia tiene el aprendizaje (es decir, los efectos de la práctica) como una variable
importante.
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EFECTOS DEL AMBIENTE
•
•
•
•
•
•
Efectos dependientes del ambiente
Efectos independientes del ambiente
Edad
Género
Efectos sobre la higiene del animal
Efectos no controlados, desconocidos
Basta mirar la variabilidad de los valores obtenidos con cepas consanguíneas, en
diversas mediciones de comportamiento relacionado con el etanol, para quedar
convencido de que el ambiente contribuye de manera importante a la variabilidad.
Rara vez se puede atribuir más de 50% de la variabilidad, en cualquier medición, a
efectos genéticos, y nos queda el otro 50% de variación ambiental sin controlar.
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MÉTODOS CRÓNICOS
•
•
•
•
Lieber-DeCarli
Tsukomoto-French
Ingesta forzada de agua
Beber agua endulzada
Durante años la administración oral de etanol fue difícil. Dado que los animales, en su
mayoría, no quieren tomar voluntariamente mucho alcohol por vía oral, los
investigadores sólo tenían las alternativas de intubar o de implantar cánulas
quirúrgicamente en el estómago. El advenimiento de la dieta líquida, de Lieber y
DeCarli, fue un adelanto importante. El uso de la técnica de la sucrosa que se reduce
paulatinamente también fue una incorporación significativa. El método de FrenchTsukamoto, aunque emplea la implantación quirúrgica de cánulas, también ha sido un
adelanto notable.
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MEDIDAS DE DEPENDENCIA
Piloerección
Elevación de Temperatura
Mayor tendencia a correr
Convulsiones Inducidas por
Manipulación (HIC)
• Convulsiones Espontáneas
• Muerte
•
•
•
•
En esta diapositiva se presenta algunas de las mediciones más comunes de
dependencia, definida según signos de abstinencia. Está la cuestión semántica de si
la dependencia existe si no hay abstinencia. Esto se parece al principio de
incertidumbre de Heisenberg, en sentido biológico.
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DAÑO TISULAR
•
•
•
•
•
Hepático
Cerebral
Fetal
Cardíaco
Gastrointestinal
Los modelos utilizados para producir daño tisular en animales podrían ocupar
fácilmente otra hora de discusión; en aras de la brevedad, se enumeran aquí los
tejidos más importantes donde se encuentra el daño. Los métodos de administración
de alcohol para observar estos efectos son los que ya se analizaron. También es
posible agregar otros compuestos químicos para promover o realzar los efectos
tóxicos del etanol. Por ejemplo, se han utilizado agentes que agotan el tetracloruro de
carbono, el fierro y el glutatión.
30
Agradecimientos
Dr. Yedy Israel
Dr. Donna Gruol
Dr. Hank Samson
Centro de Investigación del
Alcohol de la Universidad de
Colorado NIAAA
.
31