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Antonio Castellano Hinojosa
TÍTULO: Aislamiento de bacterias fijadoras de N2 de la rizosfera L. perenne. Estudio de sus
propiedades como promotoras del crecimiento vegetal (PGPR).
Resumen
La Directiva Europea 414/1995 contempla la sustitución de pesticidas y fertilizantes
químicos que se emplean en las actuales prácticas agrícolas por otros sistemas biológicos de
producción integrada con el objeto de minimizar tanto los gastos como los riesgos para la salud
humana, animal y ambiental que supone el empleo de los productos agroquímicos. El uso eficaz
de biofertilizantes microbianos está llamado a ser una de las tecnologías clave para asegurar la
productividad y sostenibilidad del sector agrícola, tan importante para las economías y las
sociedades de todos los países.
La vida microbiana en la mayoría de los ecosistemas terrestres y acuáticos es poco
conocida, aunque son los microorganismos los que llevan a cabo multitud de transformaciones
de unos compuestos en otros, alterando su composición y propiedades, y participando
directamente en la productividad de los mismos. Además, la densidad bacteriana en la rizosfera
es, generalmente, mucho mayor que la densidad bacteriana del resto del suelo ya que las
rizodeposiciones de las plantas favorecen la actividad y el crecimiento de las bacterias.
Dada la ausencia de diferencias en el crecimiento de plantas de L. perenne (raigrás
inglés) sin tratar y tratadas con fertilizante nitrogenado que la empresa Sports Verd Futbol S.L
mantiene en sus instalaciones del municipio de Tiana (Barcelona) se planteó que los
microorganismos del suelo podrían jugar un papel clave en el mantenimiento de la
sostenibilidad de las plantas de raigrás. Este trabajo se inició, por tanto, para llevar a cabo el
aislamiento de bacterias fijadoras de N2 de la rizosfera de L. perenne cuya actividad explicara el
origen del N necesario para el crecimiento de las plantas.
En este trabajo se utilizaron 3 medios definidos de cultivo, cuya composición carece de
N combinado, que permitieran el crecimiento del mayor número posible de unidades
formadoras de colonias (UFCs) capaces de fijar N2. Se obtuvieron 21 UFCs cuya identificación
mediante aislamiento de ADN genómico y posterior amplificación y secuenciación del gen 16S
rRNA reveló la existencia de 9 cepas agrupadas en 5 géneros. Los más abundantes fueron
Bacillus (33,3 %) y Paenibacillus (33,3 %), seguidos de Burkholderia (16,6 %), Staphylococcus
(16,6 %) y Pseudoxanthomonas (16,6 %). La capacidad de crecer en medios definidos carentes
de N combinado se confirmó al comprobar la existencia del gen nifH en cada una de las cepas.
Estos resultados permiten concluir que la existencia de bacterias diazotrofas en la rizosfera de L.
perenne podría explicar el crecimiento de las plantas en las parcelas no fertilizadas.
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Puesto que la fijación N2 se considera una capacidad de las bacterias para promover el
crecimiento vegetal, bacterias a las que se conoce con el nombre genérico de PGPRs (Plant
Growth Promoter Rhizobacteria), como objetivo complementario de este trabajo, se analizó la
capacidad de solubilizar fosfatos, producir sideróforos, producir ácido indol acético, la actividad
ACC desaminasa y la actividad antifúngica de las bacterias fijadoras de N2 aisladas de la
rizosfera de L. perenne. En general, se puede concluir que las cepas C16 y C17, identificadas
como Burkholderia multivorans y Staphylococcus sp., respectivamente, son las de mayor
capacidad para actuar como PGPRs y podrían considerarse para su empleo en la formulación de
biofertilizantes microbianos.
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