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Volumen 27 Número 3 • Mayo-Junio de 1985 Anticuerpos monoclonales en enfermedades de origen viral MVZ ALVARO AGUILAR SETI~N' MD ROBERTO KRETSCHMER s.' Aguilar Setién A. Kretschmer R: Anticuerpos monoe/ona/e s en enfermedades de origen viral. Salud Pública Méx.• 1985: 27: 251-259. Resumen: En este trabajo se presenta el panorama de utilización de los anticuerpos monoclonales (AM) en virología; se discute el papel que han tenido en la exploracién de las bases de variabilidad antígénica viral, su U na de las respuestas del organismo contra la invasión de una sustancia extraña es la producción de anticuerpos. Esta respuesta es heterogénea, ya que se sabe que cuando un animal es inmunizado con un antígeno, se producen varios anticuerpos distintos contra cada uno de los determinantes antigénicos de dicho antígeno. Además, estos anticuerpos son en general diferentes de los que podría producir otro organismo de la misma especie (singénico o alogénico) o de especie diferente, bajo el mismo estímulo. Se estima que en el caso del ratón, entre 1000 y 8000 anticuerpos diferentes pueden reconocer un solo determinante antigénico.' Es así que los sueros inmunes que se obtienen en forma tradicional, por medio de la inmunización de un animal, son en realidad una mezcla de una variedad muy grande de diferentes anticuerpos, aunque el antigeno utilizado sea muy puro y contenga un solo deterI División de Inmunologia, Unidad de Investigación Biomédica, Centro Médico Nacional, Instituto Mexicano del Seguro Social, México. D.F. MAYO·JUNIO DE 1985 utilización en el diagnóstico, en la terapéutica y en la Finalmente se analizan al- purificación inmunoquimica. gunas futuras aplicaciones. minante. Las posibilidades de producir anticuerpos homogéneos in vivo son muy reducidas. Los anticuerpos monoclonales (AM) descubiertos superan en mucho las limitaciones de un suero inmune.O Su obtención se basó en la fusión de células de mieloma de ratón con linfocitos de ratones inmunizados con un antígeno predeterminado. Las células hibridas resultantes expresan, de esta manera, tanto la propiedad del linfocito de producir anticuerpos, como la capacidad de replicarse indefinidamente (tanto in vivo como in vi/ro) de la célula tumoral. Al clonar diversas poblaciones de dichos híbridos, se pueden obtener líneas celulares productoras de anticuerpos altamente específicos y de extrema homogeneidad estructural. Además de su estricta especificidad, teóricamente los AM pueden ser producidos en cantidades ilimitadas, no importando que éstos sean dirigidos contra determinantes antigénicas corrientes o raras. Las abundantes publicaciones cientificas sobre AM y el interés que éstos han despertado en numerosas compañías comercíalea/" son el 251 Aguilar Setién A. Kretschmer R reflejo de sus múltiples aplicaciones prácticas actuales o potenciales. La viro logia, asl como la mayoría de las diciplinas biomédicas, han hecho de los AM reactivos que en la actualidad resulten indispensables para su desarrollo y progreso. En diversos palses, muchos laboratorios han obtenido AM dirigidos contra las protelnas estructurales, tanto internas como externas de diversos virus; asl como contra los antlgenos virus inducidos no estructurales (vg. antlgenos inducidos en la membrana de la célula huésped, enzimas virus especificas, etc.). La propiedad que tienen los AM de reconocer a un solo determinante antigénico de entre una mezcla compleja de ellos, tal vez sea la propiedad más importante en virología. Este reconocimiento selectivo hubiera sido imposible de obtener con un suero inmuneconvencional producido in vivo, pues a la respuesta múltiple de un animal hay que agregar la dificultad de obtener preparaciones virales libres de algún contaminante antigénico que perturbe los resultados deseados. Si analizamos someramente los títulos de alguna revista especializada en virologla, encontra remos que los AM son frecuentemente empleados con algunos de los siguientes propósitos: 1. El mapeo de los sitios antigénicos de las protelnas virales, con el fin de examinar las bases moleculares de su variación. 2. La tipificación y la subtipificación de los virus. 3. La localización y definición de las proteínas virus-inducidas y su expresión celular. 4. El aislamiento en forma pura de los diferentes componentes virales y de otros componentes relacionados, tales como el interferón. S. La detección de protelnas de origen viral, que se expresan en cantidades muy pequeñas. 6. El análisis de la habilidad protectora de los AM dirigidos contra los diferentes componentes virales, asl como la habilidad protectora de las diferentes clases de anticuerpos. 7. La estandarización del diagnóstico de las enfermedades virales. Es evidente la importancia de los AM en las enfermedades de origen viral. Podemos decir que las posibilidades de su utilización en esta rama de la' microbiología están aún en proceso 252 de exploración y seguramente el número de artlculos virológicos que recurran a su empleo, irá en aumento. En este reporte, sin pretender ser exhaustivos, trataremos de presentar, mediante algunos ejemplos, una imagen general de lo que ha sido el empleo de los AM o técnicas afines en la virologla. LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES Y LA VARIABILiDAD ANTIGENICA DE LOS VIRUS Una de las familias virales que más capacidad de variación antigénica tiene en la naturaleza es la de los mixovirus. La gran variabilidad de este grupo ha impedido hasta nuestros días el control inmunológico de la influenza, pues por el mismo motivo el desarrollo de vacunas eficaces contra esta enfermedad ha sido lento. Con el objeto de examinar las bases antigénicas de la variación de los mixovirus, numerosos laboratorios han fabricado AM contra sus hemoaglutininas y sus otros componentes. Estos AM han sido utilizados para seleccionar variantes del virus influenza, cultivando a esos agentes en huevos embrionados que han sido impregnados con un determinado anticuerpo monoclonal.w Esta técnica produce variantes que no reaccionan con el anticuerpo monoclonal utilizado para su selección, pero que sí son neutralizados por otros AM obtenidos con el virus original. Con esta metodología ha sido posible definir cuatro determinantes antigénicos en las hemoaglutininas virales que están sujetos a una hipervariacíón.u» Es un hecho que los sueros hiperinmunes o provenientes de un animal convaleciente, no son capaces de distinguir las variantes obtenidas experimentalmente con un solo anticuerpo monoclonal, lo que nos hace dudar del significado epidemiológico de estas cepas de laboratorio. De hecho, se ha establecido que las variantes que surgen en la naturaleza, presentan generalmente cambios en más de un determinante antigé- nico.O Contrariamente a los mixovirus, el virus de la rabia había sido considerado durante mucho tiempo como antigénicamente estable. No obstante, estudios relativamente recientes han permitido constatar que in vitro es tan inestable SALUD PUBLICA DE MEXICO Anticuerpos monoclonales en enfermedades de origen viral como el virus de inf1uenza, que ya es muy fácil obtener variantes en el laboratorio, cultivándolo en presencia de un determinado anticuerpo monoclonal.é' Es evidente que las variaciones del virus rábico en la naturaleza, son mucho menos frecuentes que las que se observan en el virus de la influenza o de la anemia infecciosa equina.r" Sin embargo, la variabilidad del virus rábico observada en el laboratorio con ayuda de los AM, puede al menos explicar en parte las fallas en los intentos de erradicación de esta enfermedad en países como Bélgica o Alemania, en los que se ha observado un recrudecimiento de la enfermedad, a pesar de la existencia de cuidadosos programas de vacunación en los animales domésticos. • Si bien el virus rábico es más estable en la naturaleza que otros grupos virales, este agente se encuentra sometido en estas condiciones a una multitud de presiones selectivas a causa de la gran variedad de géneros y especies que puede afectar. Dichas presiones podrían ser mayores en algunos miembros de la familia Togaviridae, cuyo espectro de afrección incluyephilum, clases, órdenes, familias, géneros y especies (vgr. encefalitis equina Venezolana, encefalitis equina del este, dengue, etc.). Un paramixovirus, el sarampión, constituye otro ejemplo de virus que había sido considerado antigénicamente estable durante mucho tiempo. De hecho, sabernos que una sola exposición al virus del sarampión, puede conferir una inmunidad de por vida contra esta enfermedad. A pesar de esto, Birrer y colaboradores, en 1981(10) nos informan que, como en los casos anteriores, el cultivo del virus del sarampión en presencia de un anticuerpo monoclonal dirigido contra un determinante antigénico de su hemoglutinina, produce el surgimiento espontáneo de variantes antigénicas. Estas observaciones hechas en el laboratorio, nos sugieren que, como en el caso del virus de la rabia, lo mismo podría suceder en la naturaleza, lo que explicaría también, al menos en cierta medida, la persistencia en el ser humano de infecciones provocadas por virus semejantes al del sarampión. Esto último po'" Pastoret PP; Profesor de la Universidad de Lieja. Comunicación personal. MAYO·JUNIO DE 19R5 dría extrapolarse a otros paramixovirus que presentan grandes semejanzas biológicas yantigénicas con el virus del sarampión como el virus de la enfermedad de Carré (moquillo canino) o el virus de la peste bovina. En términos generales podemos decir que las posibilidades de variación antigénica de los virus son muy grandes, tanto por la presión selectiva que impone la respuesta inmune de los organismos que parasitan, como por su gran velocidad de replicación y su simplicidad genérica. Es claro que esta variabilidad antigénica dificulta el control de las enfermedades virales. Los A M han sido una herramienta que nos ha permitido comenzar a explorar las bases de esta variabilidad y en un futuro tal vez nos permitan conocerla mejor y controlarla. LA SEROTIPIFICACION VIRAL CON ANTICUERPOS MONOCLONALES Las pruebas serológicas más corrientes para la detección de antígenos son: la virus-neutralización, la hemaglutinación y la inhibición de la hemoaglutinación, la inmunof1uorescencia, la inmunodifusión, la fijación de complemento, el radioinmunoensayo (RIA) y el ensayo inmunoenzimático (ELISA). Antes de que existieran los AM, la diferenciación intratípica de los virus pertenecientes a un mismo serotipo se hacía mediante pruebas cinéticas de neutralización, fijación de complemento, etc., o mediante pruebas cruzadas con sueros absorbidos con los virus a caracterizar. La implementación de estas pruebas, además de ser fastidiosa, no siempre daba buenos resultados. Las variaciones tan sutiles en la composición antigénica que es posible detectar mediante las diferentes pruebas serológicas de los AM, aunado a las nuevas técnicas bioquímicas de análisis del genoma viral, han permitido un diagnóstico extremadamente fino en virología. No obstante, es necesario mencionar que debido a su naturaleza, la especificidad de los AM va a depender de la prueba serológica utilizada,"! 12) El primer autor señala que el poder de la inhibición de la hemoaglutinación de algunos AM dirigidos contra la hemoaglutinina de la cepa A/USSR/G0/70 del virus de inf1uenza, disminuye o desaparece frente a las variantes de esta; mientras que en lo que res253 Aguilar Setién A. Kretschmer R pecta a las pruebas de RIA, la eficiencia de dichos AM es idéntica, tanto con la cepa original, como con las variantes. Por su parte, Russell y colaboradores'!" encontraron que en una serie de ocho AM producidos contra el adenovirus humano tipo cinco, ninguno neutraliza ba el virus ni tenía la capacidad de fijar el complemento y s610 uno de la serie era capaz de inhibir la hemoaglutinaci6n. Este último anticuerpo monoclonal también podía inhibir la hemoaglutinaci6n de otros tipos de adenovirus, siendo a la vez tipo-específico en cuanto a la prueba de inmunofluorescencia se refiere. Los trabajos hechos en el Instituto Wistar de Filadelfia, E. U.A., utilizando AM para la tipificaci6n y subtipificaci6n del virus de la rabia(8.'}.'6) han culminado en la producci6n comercial, de un panel de AM que permiten diferenciar, mediante pruebas de inmunofluorescencia, las infecciones provocadas por el virus de la rabia de las infecciones provocadas por otros Iyssavirus relacionados con esta enfermedad, como son los virus Lagos, Mokola y Duvenhage. El mismo panel permite también la identificaci6n de diferentes cepas del virus rábico. Sobra señalar que antes de la existencia de estos reactivos, era prácticamente imposible establecer las mencionadas diferencias. La tipificaci6n y subtipificaci6n del virus rábico por medio de AM descubre nuevos horizontes para un conocimiento más cabal de la epidemiología de esta enfermedad y permitirá mejorar los programas de vacunaci6n en un área determinada, ya que se ha observado que en ocasiones existen diferencias antigénicas entre las cepas utilizadas para vacunar y las que prevalecen en determinada poblaci6n, lo que resulta en una protecci6n inadecuada.t'v La rabia continúa siendo un problema de salud pública en nuestro país. Se calcula que en México existen de 75 a 100 casos de rabia humana anuales comprobados (datos de la Secretaria de Salud). Las pérdidas causadas por esta enfermedad en la ganadería nacional de las zonas tropicales y subtropicales, en donde los quir6pteros hemat6fagos son los principales vectores, son cuantiosas; estas pérdidas se calculan en aproximadamente 30,000 bovinos y 3,000 equinos por afio (datos del Departamento de Epizootiología del Instituto Nacio254 nal de Investigaciones Pecuarias SARH). No obstante, a la fecha, no se han aprovechado las ventajas que traería la implementaci6n de un diagn6stico fino con AM. En base a esta problemática, en nuestro laboratorio hemos comenzado a producir AM contra las vacunas que produce el sector oficial (vacuna tipo Fuenzalida: SSA y vacuna contra el derriengue, cepa Acatlán V319; SARH). Actualmente contamos con clonas que producen anticuerpos capaces de aglutinar los gl6bulos rojos que han sido acoplados a los antígenos de la vacuna tipo Fuenzalida que se produce en México." Con estos reactivos se piensa hacer estudios que nos permitan constatar si en nuestro país existen discrepancias antigénicas entre las cepas utilizadas para vacunar, las cepas pat6genas que afectan al ser humano (virus urbano) y aquellas que afectan a los animales; estas últimas precisamente relacionadas con los quir6pteros. Un gran número de AM han sido preparados con el objeto de contar con reactivos que permitan la identificaci6n rápida y precisa de diferentes virus de interés biomédico. Al igual que en el caso del virus de la rabia, los estudios hechos con A M('7)dirigidos contra los antígenos de superficie del virus de la hepatitis B, han culminado en la producci6n comercial de AM para el diagn6stico de dicha enfermedadP' Con este mismo prop6sito, se han creado también AM contra los poliovirus.r'v los adenovírus.t'- 19) contra los arenavirus.P" los rotavirus,(21)el virus del dengue,<22)por citar s610 algunos ejemplos de una lista muy larga. Podemos afirmar que la utilización de los AM en el diagnóstico de las enfermedades virales es una realidad. Es probable que el empleo extensivo de estos reactivos nos conduzca a una taxonomía viral más detallada y adecuada que la que existe hasta el momento. PERSPECTIVAS TERAPEUTICAS Todos los usos que a la fecha se le han dado a los sueros inmunes convencionales, pueden también ser considerados para los AM. Es, por tanto, lógico pensar que estos últimos puedan • Aguilar S y cols.: Resultados no publicados. SALUD PUBLICA DE MEXICQ Anticuerpos monoclonales en enfermedades de origen viral ser utilizados en seroterapia, con la gran ventaja de ser reactivos sumamente puros desde su origen. La inmunoterapia pasiva podría emplear de manera útil AM de la clase más apropiada y estos constituirían excelentes herramientas en la comprensión de ciertos mecanismos en este tipo de protección. Un buen ejemplo de la utilidad de los AM en inmunoterapia nos lo dan Letchworth III y Appletonv" en su trabajo con el virus de la lengua azul de los borregos. Estos autores encuentran que un anticuerpo monoclonal de origen murino de la clase IgG2, dirigido contra un epítope de la cepa americana BTV 17 del virus de la lengua azul, puede prevenir esta enfermedad en el borrego y en el ratón. Por otra parte, hay que considerar que sería conveniente que los AM empleados en terapéutica fueran homólogos de cada especie, particularmente en el caso de la especie humana, pues es conocido que los anticuerpos son buenos antígenos y por lo tanto potencialmente dañinos a través de reacciones adversas (anafilaxia, enfermedad del suero). De hecho, la seroterapia homóloga con suero inmune se practica, aunque esporádicamente, en el ser humano (vgr. seroterapia antirrábica). Sin embargo, es difícil imaginar la hiperinmunización de seres humanos con diversos antígenos, sobre todo virales, para ser sometidos posteriormente a la toma de grandes cantidades de suero en forma repetida. Frente a esta problemática, se han buscado híbridos que produzcan anticuerpos específicos. Primeramente se intentó la creación de híbridos entre linfocitos humanos y células de mieloma de ratón;(24)encontrándose que este tipo de híbridos era difícil de obtener, pues existe un pérdida rápida y preferencial de los cromosomas humanos.(2S) Posteriormente se desarrollaron las investigaciones sobre la creación de hibridomas humano-humano yactualmente han tenido éxito.(u, 27)Sin embargo, parece ser que la frecuencia de hibridación en la especie humana es mucho menor que la que se obtiene en sistemas murinos. Otras alternativas para la producción de AM humanos es la transformación de linfocitos B por medio del virus Epstein Barr.(23-30) El mayor problema que se ha encontrado mediante la transformación de linfocitos B con el MAYO·JUNIO DE 1985 virus Epstein Barr es que las células una vez transformadas parecen tener una vida limitada Recientemente se encontró-'!' que con la hibridación de linfocitos B (de origen humano) transformados con el virus Epstein Barr, con células de mieloma de ratón, se obtienen híbridos estables, capaces de producir AM humanos en forma continua. A la fecha, esta metodología parece ser la más eficiente para la producción de aloanticuerpos monoclonales humanos, lo que abre nuevas perspectivas dentro de la inmunoterapia antiviral con AM en medicina humana. Sin embargo, al plantearnos la cuestión de si los AM por sí solos son suficientes para una terapia antiviral completa, diremos que al igual que los sueros hiperinmunes, los AM tendrían una utilidad limitada y estaría orientada en la mayoría de los casos, hacia la prevención, más que hacia el tratamiento propiamente dicho. En muchas enfermedades virales el papel principal de la inmunidad humoral es el de prevenir una reinfección, más que el de controlar una primo-infección incipiente. Esto último correspondería sobre todo a los mecanismos inmunes de destrucción temprana de las células infectadas (vgr. citotoxicidad celular directa, citotoxicidad celular mediada por anticuerpos y ayudada por el complemento). Para ilustrar estas afirmaciones podemos citar trabajos hechos con virus herpes.(32)En ellos se señala que los virus herpes, como muchos otros, pueden pasar de una célula infectada a otra susceptible, sin la necesidad de salir al medio extracelular, utilizando para ello los puentes membranales que existen entre células contiguas y escapando así a la acción neutralizante de los anticuerpos. Este avance intercelular precede al menos en nueve horas la liberación de partículas virales al medio extracelular, convirtiéndose en la punta de lanza de la infección. En este caso, sólo la destrucción de la célula infectada antes de que produzca partículas infecciosas va a ser capaz de detener el avance de las lesiones que el virus provoca en el tejido u órgano susceptible. De hecho, aún en experimentos realizados in vi/ro, es imposible detener el efecto citopático de un virus herpes, agregando anticuerpos al 255 Aguilar medio de cultivoP3-35)Para que se detenga la propagación viral in vitro, es necesario agregar los linfocitos y el complemento que conduzcan a la destrucción de las células infectadas. Desde 1958,el profesor MathéC36propuso ) la estrategia de unir químicamente sustancias antineoplásicas a los anticuerpos dirigidos contra los epítopes propios de las células cancerosas.(37)Con estos "anticuerpos armados", el profesor Mathé pensaba poder destruir en forma selectiva las células cancerosas de un organismo enfermo. Sin embargo, en los primeros experimentos, la toxicidad insuficiente de las drogas utilizadas se tradujo en resultados poco halagadores. De hecho, se llegó a la conclusión de que se necesitaría fijar una gran cantidad de moléculas del compuesto antineoplásico a los anticuerpos, para que éstos tuvieran una eficaz actividad citotóxica; pero que esto a su vez conducirla a una pérdida de la actividad especifica de los anticuerpos. Actualmente se hacen experimentos en este sentido, acoplando a los anticuerpos compuestos tóxicos mucho más activos como la toxina diftérica y algunos extractos de diversos hongos. Una sola molécula de estos compuestos es suficiente para destruir una o varias células a la vez y se ha demostrado que al menos in vi/ro, los anticuerpos armados con estas sustancias resultan muy eficaces en la destrucción de células cancerosas. (37) Existe la posibilidad de producir AM dirigidos contra los antígenos tempranos de membrana que han sido inducidos por el genoma viral, en una célula infectada antes de la producción de partículas infecciosas. Si estos AM se acoplan a una de las mencionadas toxinas, se obtienen anticuerpos monoclonales "armados" capaces de destruir a una célula infectada antes de que comience a producir partículas infectantes, lo que permitirla controlar una infección incipiente. Más aún, el problema de la latencia viral podría ser resuelto produciendo anticuerpos monoclonales "armados" que identifiquen a las células que alberguen al genoma viral. Debido a su poder transformante o a su acción citolltica, muchos agentes virales realzan o suprimen la respuesta inmune. De esta manera sabernos que el parvovirus que produce la enfermedad aleutiana del visón transfor256 Setién A. Kretschmer R ma varias clases de linfocitos B, desencadenando una grammagrafla policlonal en su huésped. El virus de la enfermedad de Marek transforma los linfocitos B, produciendo linfomas T en las aves de corral. Por el contrario, el virus de la enfermedad de Gumboro destruye selectivamente las células de la bolsa de Fabricio en las aves y el togavirus de la diarrea viral bovina ataca a los linfocitos localizados en las placas de Peyer. La acción patógena de estos agentes se debe entonces sobre todo a las alteraciones del sistema inmune que sufre el organismo. Los AM "armados" podrian ser utilizados para corregir estas alteraciones, pues con ellos podría modificarse ésta, si los AM son dirigidos hacia diferentes po blaciones de linfocitos. Los experimentos hechos in vi/ro con células neoplásicas como blanco a destruir, son prometedores. No obstante, qu'edan muchas preguntas por resolver en cuanto a la eficacia de estas "inmunotoxinas tt in vivo. Sin lugar a dudas, las aplicaciones cllnicas de los anticuerpos monoclonales "armados" no son inmediatas. Aún se necesita vencer muchos obstáculos para que este producto de la ingeniería molecular sea más que una promesa. LA PURIFICACION BIOQUlMICA Una de las aplicaciones más exitosas que se les ha dado a los AM es la de su utilización en la purificación rápida de sustancias antigénicas, que se encuentran formando parte de mezclas complejas de diferentes compuestos. Para lograr esta purificación se requiere acoplar el anticuerpo monoclonal especifico a un soporte insoluble y con este material, hacer una columna de afinidad. Cuando la mezcla compleja es pasada en estas columnas, únicamente la sustancia que interesa será retenida.v" En virología, la purificación del interferón leucocitariov?' ha sido una de las aplicaciones espectaculares de esta metodología. El material que estos autores utilizaron para inmunizar a los ratones, antes de colectar las células esplénicas contenía únicamente de 0.1 a 1% de interferón. Las clonas fueron seleccionadas en base a su poder para secretar anticuerpos que inhibían la actividad antiviral de la mezcla que contenía el interfeSALUD PUBLICA DE MEXlCO Anticuerpos monoclonales en enfermedades de origen viral rón. A pesar de que el material inmunizan te era completamente impuro, el anticuerpo monoclonal seleccionado fue de una especificidad perfecta. Las columnas de afinidad fabricadas con este anticuerpo monoc1onal permitieron la purificación y concentración con un rendimiento 5,000 veces mayor que el obtenido con otros procedimientos. Actualmente la tendencia en virología es la de obtener vacunas sub-unitarias desprovistas de ácido nucleico, compuestas únicamente por una o dos proteínas virales que se haya demostrado sean lo suficientemente antigénicas para conferir una protección sólida. Con este tipo de vacunas fraccionarias se piensa eliminar totalmente el poder oncogénico potencial de ciertos virus y además, también se piensan eliminar los problemas epidemiológicos inherentes al fenómeno de la latencia y la diseminación de cepas vacunales activas. La fabricación de columnas de afinidad con AM ha sido útil también para separar las diferentes proteínas estructurales de diversos virus; por ejemplo: sabernos que las glicoproteínas que cubren a los virus pueden ser separadas mediante centrifugación diferencial o por su afinidad a ciertas lectinas como la concanavalina A. No obstante, otras proteínas como la neuraminidasa, en el caso de los mixovirus, son difíciles de obtener mediante los procedimientos descritos, pero pueden ser fácilmente obtenidos en columnas de afinidad hechas con AM. La cromatografía de afinidad con AM puede encontrar una utilidad industrial en la purificación y concentración de proteínas antigénicas, para la elaboración de vacunas antivirales fraccionarias. OTRAS PERSPECflv AS Como en el caso del ser humano, existe un gran interés en medicina veterinaria de poseer, para cada especie,lí neas continuas de mieloma especificas. Se ha demostrado que muchos animales como el perro, el gato, el caballo, la vaca, el cerdo y el conejo, presentan espontáneamente mielomas múltiples que podrían ser la base para la creación de líneas continuas aptas para la hibridación.wn La producción de AM producidos en otros sistemas que no sean el muriMAYO-JUNIO DE 1985 no, podrían ofrecer ventajas a la fecha desconocidas. La propiedad que tienen ciertos virus de transformar linfocitos B, ha sido poco explotada con el fin de producir AM. De hecho, únicamente se han realizado experimentos en este sentido, utilizando el virus de Epstein Barr y linfocitos humanos. Resta estudiar el potencial que con este mismo fin tendrían otros virus transformantes, tales como el virus de la enfermedad Aleutiana del visón o los que forman parte del complejo leucémico de las aves. Después del descubrimiento hecho por Barski y sus colaboradores en 1960,141) de la existencia de las células híbridas, se forjó toda una tecnología para la fusión de células animales y para la selección de las nuevas líneas generadas que tuvieran un interés particular. Esta tecnología contribuyó enormemente al advenimiento de los AM. En el caso de células vegetales, también es posible obtener líneas híbridas que posteriormente pueden dar origen a plantas con propiedades inimaginables.O! Los ensayos de hibridación no han sido la excepción en virología. La viruela ha podido ser universalmente erradicada gracias a la existencia del virus vacunal. Este virus produce una protección durable y además tiene la propiedad de replicarse en la gran mayoría de las especies superiores. Actualmente el virus vacunal ha sido utilizado como "vector-productor" de proteínas antigénicas de otros virus diferentes como el virus de la hepatitis B, el virus de la fiebre aftosa y el virus de la rabia.142.43) Esto último ha sido logrado mediante la hibridación de los genomas de los virus mencionados con el virus vacunal. De esta manera, el híbrido resultante guarda las características morfológicas y biológicas del virus vacunal, pero además puede prod ucir las proteínas antigénicas del virus con el cual fue hibridado. Se ha demostrado que la aplicación de estos híbridos virales a los animales de laboratorio, por simple escarificación, como se efectuaba en la vacunación antivariólica, protege contra un desafío con el virus de la rabia, de la hepatitis B o de la fiebre aftosa, según sea el caso. Si estos resultados fueran los mismos fuera del laboratorio, entonces contaríamos con un medio de vacunación contra una gran variedad 257 Aguilar Setién A. Krctschmcr de enfermedades virales, tan simple como el que permitió erradicar la viruela de la faz de la tierra. Queda mucho trabajo por hacer, y el campo Aguilar Setién A. Kretschmer R de estudio es ciertamente apasionante. Ojalá existan medios financieros adecuados en nuestros países, para poder seguir este tipo de investigaciones que se revelan promisorias. R: Monoclonal antibodies in viral diseases. Salud Pública Méx .• 198;; 27: 251-259. Summary: This artide reviews the current situation of monodonal antibodies in the field ofvirology.discussing the role that these have had ln the following areas: exploration of the basis for viral antigen variability; diagnosis; therapeutics as well as in immunologic and chemical purification. This document also comments on sorne possible future uses for monodonal antibodies in virology. REFERENCIAS 1. Kdhler G. Howe ve, Milstein C: Fusion between ímmunoglobulin-secreting and nonsecreting myelloma celllines. Eur J Immunol 1976; 6: 292·310. 2. 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