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Transcript
Microscopía de Contraste de Fases.
USOS: es de un valor incalculable para el estudio de células
vivas, en el exámen de preparaciones húmedas y de gota
pendiente.
JUSTIFICACIÓN: con la iluminación normal, resulta muy
difícil el estudio de preparaciones de densidad homogénea
y transparentes como bacterias y células cuya capacidad
de absorción de la luz es tan pequeña que la imagen no
presenta diferencias de luminosidad entre sus elementos
.
Estas diferencias de absorción de la luz y su trayectoria
en las células y el medio externo, retrasan y desvían las
ondas luminosas que atraviesan la célula.
El microscopio de
Contraste de Fase pone de
manifiesto estas pequeñas diferencias en las células, sus
estructuras y su medio externo, las cuales no son
discernibles por otros métodos ópticos.
Diferencias entre Microscopio Optico
Convencional y Microscopio de
Contraste de Fases
El Microscopio de Contraste de Fases Contiene:

Diafragma anular en el Condensador que consta de
un anillo transparente con la parte central oscurecida y
que forma un cono de luz hueco como el del
microscopio de campo oscuro.

Placa de Difracción ó Placa de Fase dentro del tubo
del sistema de lentes objetivos, la cual consta de un
anillo ranurado a manera de disco.

Ocular similar al del microscopio de campo claro.
Diafragma Anular del Condensador y
Anillo de Fase ó Placa de Difracción
Anillo de Fase
Lente del Condensador
Oscurecida en el Centro
Funciones del Condensador
Cuenta con un dispositivo similar al del
campo oscuro que forma un cono de luz
hueco en el centro.Su sistema óptico
descompone la luz en dos partes:


Luz que llega a velocidad normal al ocular
Luz que llega retrasada ¼ de longitud de
onda respecto a la primera. Para lograr
dicho retardo, se necesita un objetivo
especial.
Funciones del Objetivo
Contiene en su interior, una Placa de Fase
ó Placa de Difracción
que es un anillo
ranurado a manera de disco dentro del tubo
del sistema de lentes objetivos, el cual es un
disco de vidrio óptico, recubierto con una fina
capa metálica para absorber la luz, así como
con una capa de material dieléctrico, que
retarda la luz.
Así, la luz que pasa por el exterior del
anillo ( luz desviada ) se
retrasa ¼ de
longitud de onda con respecto a la que pasa
por su interior ( luz no desviada ).
Cono de Luz que Incide sobre el
Objetivo en Microscopio Óptico
Trayectoria que Sigue la Luz en el
Microscopio de Contraste De fases.
Mecanismo de Función del
Microscopio de Contraste de Fases.
En las células y en las bacterias existen
pequeñas diferencias ópticas debido a sus
densidades
apenas
diferentes
y
las
consiguientes diferencias de absorción de la luz
y con respecto a su medio exterior.
Estas diferencias de densidades ( y de
absorción y trayectoria de la luz ) de las células,
su medio interno y su medio externo, retrasan
y desvían las ondas luminosas que atraviesan
la célula.
Mecanismo de Función del
Microscopio de Contraste de Fases.
La luz proveniente de la muestra es descompuesta
por el condensador en 2 partes: los rayos no desviados
que llegan con velocidad normal al ocular y los rayos
desviados y retrasados ¼ de long. de onda con respecto
a los primeros
Al pasar por el objetivo, el anillo de fase que se
encuentra dentro de él hace que la luz que pasa por su
exterior ( luz desviada ) , se retrase ¼ con respecto a la
que pasa por el interior ( luz no desviada
Ambos componentes de la luz siguen su curso
normal y llegan al ocular, pero uno de los rayos ( luz
desviada que pasó por el exterior del anillo ) llega
atrasado, retardándose en total ½ de long. de onda.( ¼
del condensador y ¼ del anillo de fase ).
Así, se forman 2 haces de luz, uno retrasado en su
long. de onda con respecto al otro.
El ojo humano distingue así el objeto a observar
oscurecido sobre un fondo brillante.
Ocular de AMICI-Bertrand