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Transcript
MARCADORES DE DETERMINACIÓN DIRECTA
Introducción
Enzimas de restricción
La reacción en cadena de la polimerasa
Secuenciación
PCR cuantitativa
Micromatrices (Microarrays)
Técnicas complementarias
Polimorfismos de longitud de los fragmentos de restricción
Repeticiones en tándem de número variable
Frecuencias alélicas de genes
Polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs)
ADN mitocondrial
Inserciones Alu
Enzimas de restricción
Enzima
Eco RI
Bcl I
Nco I
Bam HI
Alu I
Hae III
Apa I
Not I
Bal I
Hind III
Cfo I
Secuencia
GAATTC
TGATCA
CCATGG
GGATCC
AGCT
GGCC
GGGCCC
GCGGCCGC
TGGCCA
AAGCTT
GCGC
Enzima
Nar I
Nae I
Sma I
Acc III
Taq I
Mae II
Mae I
Nde I
Ssp I
Spe I
Swa I
Secuencia
GGCGCC
GCCGGC
CCCGGG
TCCGGA
TCGA
ACGT
CTAG
CATATG
AATATT
ACTAGT
ATTTAAAT
Secuencias de corte de algunas enzimas de restricción
Enzimas de restricción
Esquema de un análisis básico con enzimas de restricción
Enzimas de restricción
Enzimas de restricción
Tests sencillos
de paternidad
Mix
Marcador
Padre alegado
Madre
Hijo
Marcador
Mix
Marcador
Padre alegado
Hijo
Madre
Marcador
Enzimas de restricción
Reacción en cadena de la polimerasa
1
2
Número de cadenas obtenido. Ciclo 2: 2 - Ciclo 3: 2 - … - Ciclo 30: 2
29
Reacción en cadena de la polimerasa
Reacción en cadena de la polimerasa
La PCR se realiza mediante termocicladores
Secuenciación
Lectura manual de una secuencia
Secuenciación
Secuenciación
Electroferograma de una secuencia
Secuenciación
Analizador de ADN
Secuenciación
Analizador de ADN
PCR cuantitativa
PCR cuantitativa
Micromatrices
Micromatrices
Extracción de ADN
Extracción de ADN
Cuantificación de ADN
Cuantificación de ADN
Fluorímetro