Download Diagnostico de las enfermedades de trasmisión sanguínea

Diagnóstico Inmunológico de
las enfermedades infecciosas
Dra. N. Marisol Córdova
Definición de enfermedad infecciosa



Una enfermedad infecciosa, es una infección provocada
por un microorganismo que puede ser: Bacterias,
parásitos y virus
Cuando los microbios entran en el organismo, necesitan
cierto tiempo para reproducirse y multiplicarse lo
suficiente como para causar síntomas de enfermedad.
Ese tiempo se conoce como periodo de incubación.
Vías de transmisión de las enfermedades
infecciosas

Transmisión por vía transfusional.

Transmisión por vía congénita.

Transmisión por accidentes laboratoriales en
personal de salud
¿Cuales son las causas para la transmisión de
enfermedades infecciosas por vía transfusional ?


La primera y principal es la colecta de la
donación de sangre durante el período de
ventana
Definido como el lapso durante el cual el
donante está infectado con un virus, no tiene
signos ni síntomas, y los resultados de la
pesquisa serológica son negativos).
Ejemplos: VIH y Hepatitis B
Cuales son las causas para la transmisión de
enfermedades infecciosas por vía transfusional ?


La segunda está dada por infecciones con mutantes
o cepas no detectables por las pruebas. (Virus)
La tercera los errores técnicos en el laboratorio
(muestra seropositiva se informe como no reactivafalso negativo, lo que conduciría a la transfusión de
componentes contaminados).
Patógenos causantes de las enfermedades infecciosas de
transmisión sanguínea


Bacterias: T. pallidium
Sífilis
Parásitos: Plasmodium
Paludismo
T. cruzi
Chagas
Patógenos causantes de las enfermedades
infecciosas de transmisión sanguínea?

T. gondii
Toxoplasmosis

Leishmania.sp
Leishmaniasis
Inmunología
¿ Que es Inmunidad ?
Es el estado de tener suficientes defensas biológicas para evitar la infección,
enfermedad u otra invasión biológica no deseada.
En el medio ambiente existen microorganismos que para prosperar, necesitan
introducirse en nuestro cuerpo. Estos microorganismos (virus, bacterias, protozoos,
hongos) o moléculas producidas por ellos pueden causar potencialmente
alteraciones en los organismos que invaden, por lo que se denominan patógenos.
Estas invasiones se denominan infecciones, que en algunos casos pueden llegar a
producir enfermedades infecciosas.
El sistema inmunitario reconoce todo tipo de sustancias extrañas al organismo, que
se denominan antígenos, y desarrolla frente a ellos una respuesta inmunitaria para
defenderse de las posibles consecuencias que el antígeno pueda provocar en el.
Basa su principio de acción en distinguir aquello que no es
reconocido como propio

Capacidad de aprendizaje y memoria
Inmunología
Inmunología
¿La Respuestas Inmunitarias son la mismas en cada
exposición?
¡ ….. !Las respuesta Inmunitaria se vuelve mas potente después del
contacto reiterado con el mismo antígeno. ( Respuesta
Inmunitaria…..).
Las que no lo hacen son: ( Respuesta Inmunitaria…….)
Inmunología
Tipos de respuesta Inmune
El sistema inmune, cuando detecta la presencia de un antígeno, reacciona
desencadenando la respuesta inmune. Ésta puede ser de dos tipos
fundamentalmente:
- Inespecífica o innata: actúa de manera similar para cualquier agente externo y no
requiere sensibilización previa.
- Específica o adquirida: se desarrolla sólo frente a la sustancia extraña que indujo
su iniciación y en ella participan prioritariamente los linfocitos y las sustancias
liberadas por los mismos, anticuerpos y citocinas.
Características generales de la Respuesta Inmunitaria Innata y la
Adquirida
Inmunidad Innata
(Inespecífica)
Inmunidad
Adaptativa
(Específica)
Características
Resistencia que no mejora
por sucesivos contactos con
el agente infeccioso.
Actúa con carácter general
contra agentes patógenos.
Resistencia que mejora
notablemente tras una
infección repetida.
Memoria inmunológica.
Acción muy específica contra
agentes patógenos.
Células Implicadas
Polimorfonucleares,
macrófagos, células NK
Linfocitos Th (Th0, Th1,
Th2)
Linfocitos Tc
Células implicadas en la respuesta innata
¿Cuáles son las Células implicadas en la Respuesta Innata?
Células de estirpe mieloide
Células de estirpe linfoide
A) Granulocitos
Eosinófilo Neutrófilo
Basófilo
Células NK
B) Monocitos/ Macrófagos
Monocito
Macrófago
C) Mastocitos (células cebadas)
Inmunología
¿Algunos Agentes patógenos eluden la Inmunidad Humoral?
Muchos Microorganismos (virus, algunas bacterias y muchos parásitos ) eluden
estas defensas , haciéndose patógenos intracelulares y se multiplican dentro de las
células del huésped.

Para deshacerse de estas infecciones el sistema inmune a desarrollado sistemas
específicos para reconocer y destruir las células infectadas Trabajo que lo realiza la
Inmunidad…………..!

INMUNIDAD CELULAR
¿Qué es la inmunidad celular?
Es una forma de respuesta inmunitaria adaptativa mediada por linfocitos T.
Actúa como mecanismo de ataque en contra de los microorganismos
intracelulares, como virus y algunas bacterias, capaces de sobrevivir y proliferar
en el interior de los fagocitos y otras células del huésped, lugar al que no tienen
acceso los anticuerpos circulantes. La defensa frente a este tipo de infecciones
depende de la inmunidad celular, que induce la destrucción del microorganismo
residentes en los fagocitos o de las células infectadas.
¿ Cuáles son las Células implicadas?
Existen varios tipos de células T que tienen distintas funciones.
Células T Colaboradoras tipo 1 o TH1 y
Células T Colaboradoras tipo 2 o TH2
• El primer grupo de células interactúa con los fagocitos mononucleares y les
ayuda a destruir los patógenos intracelulares.
• El segundo grupo Interactúa con las células B y les ayuda a dividir ,
diferenciar y fabricar anticuerpos.
Células T Citotóxicas (CTL o Tc)
¿Qué hacen Células T Citotóxicas ?
Son las responsables de destruir las células huésped que están infectadas por
virus u otros patógenos intracelulares, este tipo de acción se llama
citotoxicidad, de ahí el nombre de estas células.
Técnicas inmunológicas en el diagnostico de
las enfermedades infecciosas


Las técnicas desarrolladas en estos
últimos tiempos, basadas en mecanismos
inmunológicos posibilitan la detección de
ciertas sustancia, que facilitan el
diagnóstico y el pronóstico de numerosos
procesos patológicos
Conocer las reacciones inmunes permite la
comprensión de las enfermedades
relacionadas con ellas.
OBJETIVOS

Aplicar técnicas de Inmunología Celular
para el estudio de la respuesta inmune de
pacientes con enfermedades infecciosas.
TECNICAS INMUNOLÓGICAS





Obtención de las PBMC
Recuento y observación de la viabilidad
de las PBMC
Cultivo de células
Estimulación de las PBMC con
antígenos y mitógenos
Proliferación celular
PBMC - Células mononucleares de sangre
periférica
• Es cualquier célula sanguínea que tiene un núcleo redondo
• Importantes para el sistema inmunológico para combatir las infecciones
• La población de linfocitos se compone de células T, Células B y NK
• Estas células se pueden extraer a partir de sangre entera usando Ficoll , un
polisacárido hidrófilo que separará la sangre en una capa superior de plasma,
seguido por una capa de PBMC
• Una fracción inferior de células polimorfonucleares (tales como neutrófilos
y eosinófilos) y los eritrocitos.
¿Cómo se podría separar las células polimorfonucleares?
Centrifugar a 2200
rpm x 30 min
Diluir 1:5 con
RPMI-P/S
Ajustar
concentración a
2 mill. Células/ml
RPMI
Centrifugar
2 lavados
PBMC anillo
Recuperar
PBMC
Ficoll
Medidas de control a tomar en cuenta

En la interpretación de los resultados obtenidos por técnicas
inmunológicas, es fundamental introducir suficientes medidas
de control que aseguren la calidad de los mismos.

Es imprescindible incluir controles positivos y negativos.

No debe descuidarse el registro de control de lotes,
temperaturas de neveras para la conservación de los
reactivos y calibración de las pipetas automáticas y de los
equipos necesarios.
Tomar todas las medidas de precaución al trabajar con
muestras biológicas.

GRACIAS