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PETRIFILM
SALMONELLA EXPRESS
Curso optativo: Microbiologia de los alimentos
Alumna: Neira, Mailen Guadalupe
Introducción
La salmonelosis es reconocida mundialmente como la
mayor causa de diarrea en humanos, siendo los
productos avícolas uno de los mayores vehículos de la
infección.
Es una enfermedad producida por la ingestión de
alimentos y líquidos contaminados con desechos y
productos de animales, se caracteriza por una
intoxicación o infección intestinal.
En general, se necesita una inoculación relativamente
grande, entre 105 y 106 organismos.
Estas infecciones son mas frecuente en países en vías de
desarrollo donde las condiciones higiénico sanitarias de
los alimentos como del agua son deficientes.
Salmonella
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Enterobacteria
Bacilo gram (-)
Anaerobio facultativo
No desarrollan capsula, excepto la especie
Salmonella tiphy
No esporulados
Posee flagelos peritricos
No fermentadores de lactosa
Oxidasa (-)
Catalasa (+)
pH de crecimiento optimo 3,7 - 9,5, se desarrolla en
un ambiente con aw=0,93
Son bacterias ubicuas teniendo como principal
reservorio el intestino de animales.
Transmisión de Salmonela
• La principal puerta de entrada es la vía oral.
• Consumo de alimentos o aguas contaminados con la bacteria.
Cualquier alimento se puede contaminar si el ambiente o los
utensilios no están debidamente lavados.
• Transmisión sexual: el hombre es el único reservorio, S. typhi.
• Contacto directo con heces de una persona o animal infectado y
transfiriendo las bacterias por el ciclo ano-mano-boca.
• El mayor riesgo proviene de los portadores crónicos sanos
(personas que albergan la bacteria por 12 meses o mas),
responsables de transmitir la bacteria en la mayoría de los casos.
Salmonelosis tifoidea
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Producida por S. typhi y S. paratyphi A/B/C,
especificas de humanos.
Ingestión
de
agua
y
alimentos
contaminados con heces de hombre
Invasión no inflamatoria
Establece infección sistémica.
Periodo de incubación de 3- 21 días.
Se distingue por la hipertrofia de las placas
de peyer y los ganglios mesentéricos.
Fiebre prolongada 38,5 – 40,5ºC con
escalofríos, cefalea, dolor de garganta, tos,
debilidad, anorexia, mareos, mialgias.
Fiebre entérica presenta exantema maculo
papuloso, estado toxico caracterizado por
síntomas neuropsiquiatricos.
Diarrea mas frecuente en personas con SIDA
y niños menores de 1 año.
Tratamiento hay que rehidratar, administrar
ATB via oral o intravenosa.
Salmonelosis no tifoidea
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Producida por S. typhimurium y S.
enteritidis, infectan varias especies.
Invasión inflamatoria
Se establece locamente tracto intestinal,
ciego, y órganos internos.
Se relaciona con estaciones lluviosas en
climas tropicales.
Indistinguible de otras gastroenteritis
producidas por virus u otras bacterias
patógenas.
Periodo de incubación de 6 - 48hs luego de
la ingesta.
Fiebre de 38 - 39ºC, nauseas y vomito,
diarrea de heces blandas no sanguinolentas
de
volumen
moderado,
calambre
abdominales.
Cura
espontáneamente,
la
diarrea
desaparece entre 3 – 7 días y la fiebre a las
72hs.
Patogenia de Salmonella
-
Son bacterias invasoras y enterotoxigénicas.
La infección se localiza principalmente en el íleo terminal y en el intestino
grueso.
- Reservorio natural:
tubo digestivo de
aves, cerdos y
bovinos.
- Vehículo: huevos,
carne, portadores,
manipuladores.
Determinación de Salmonella
Métodos convencionales
Petrifilm Salmonella Express System
25 gr muestra en bolsa polietileno + 225ml Combine la muestra y los medios 3M™ base
de APB
para enriquecimiento de Salmonella más
3M™ Suplemento para enriquecimiento de
Incubar 18hs a 37ºC
Salmonella.
Transferir la muestra enriquecida a caldos
Incubar 18hs a 41,5ºC
TT y caldo RV.
Transfiera la muestra enriquecida a R-V
Incubar 24 hs a 37ºC
R10. Incube 8 hrs. a 41,5ºC. (Evite este paso
y 42ºC.
en alimentos procesados con nivel bajo de
Siembre por estriado cada caldo
micro-flora)
seleccionado en placas de agar SS.
Incubar 24hs a 37ºC.
Hidrate la placa, transfiera la muestra y
siembre por estriado en el gel.
Seleccionar las colonias sospechosas
Incube 24. a 41,5 0C.
Transfiera las presuntas colonias positivas
a tubos de prueba TSI y LIA.
Marcar con un circulo los presuntos (+) en la
Incubar 24 hrs. a
película superior.
37ºC
Métodos convencionales
Petrifilm Salmonella Express Sistem
Se transfieren las presuntas colonias a
pruebas serológicas y bioquímicas
adicionales para obtener una
confirmación.
Tiempo total a neg:
40-44hs (alimentos procesados, con bajo
contenido en microflora)
48-52hs (alimentos no procesados, con
altos niveles de microflora).
Ensayos de aglutinación en placa con
antisuero polivalentes
Resultados confirmados bioquimicamente:
Añade el disco de confirmación a la placa e
incube 4hs a 41,5ºC.
Enviar las cepas al Instituto Nacional de
enfermedades infecciosas en Bs.As. Para
determinar serovariedad
TIEMPO TOTAL DE CONFIRMACION:
88 – 124hs.
TIEMPO TOTAL HASTA LA CONFIRMACION:
44 – 48 HS (alimentos procesados)
52 – 56 HS (alimentos no procesados)
Placa y disco de confirmacion 3M petrifilm
Salmonella express.
Suplemento y enriquecimiento base para
Salmonella
Difusor plano de 3M petrifilm.
Placas petrifilm para Salmonella
Método de petrifilm
3M Petrifilm Salmonella Express System (SALX) es utilizado como prueba
cualitativa para la rápida detección y confirmación bioquímica de Salmonella
en alimentos y muestras ambientales reemplazando la metodología
tradicional.
• Medio listo para usar:
- Fácil de usar
- No requiere de equipos especiales
- Permite gran uniformidad de resultados.
- Mayor consistencia si la comparamos contra la variabilidad asociada a la
preparación de agar, la fórmula estandarizada de 3M mejora la
consistencia entre los técnicos, los turnos y las plantas.
- Elimina la necesidad de adquirir, preparar y almacenar placas de agar
maximiza la eficacia y productividad.
- Mayor vida util.
- Plato compacto/disco reducen los desechos, el espacio.
- Todo en un solo método.
- Un solo proceso de enriquecimiento para alimentos procesados con baja
carga microbiana.
- Mas rápido para resultados bioquímicos confirmados.
- Colonias confirmadas en un plato.
1. Colonias rojas aisladas con zonas
amarillas y asociadas a burbujas de gas.
2. Colonias aisladas rojas solo en zonas
amarillas.
3. Flora de acompañamiento colonias
azul, azul verdosa.
Las colonias presuntivas (+) marcadas con
un circulo son de color azul o azul
oscuro/negro con un precipitado azul luego
de la adición del disco de confirmación 3M
Petrifilm SALX. Estas colonias marcadas con
un circulo están bioquímicamente
confirmadas como (+) para Salmonella.