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Anatomía del microscopio Lente ocular Tubo de observación Cuerpo Estativo Lente objetivo Pinza portamuestras Platina Mando de enfoque macrométrico Diafragma iris Camino de luz Mando de enfoque micrométrico Fuente de iluminación Base © 2002, Neo/SCI Corporation. Quedan reservados todos los derechos. 1 Anatomía del microscopio ESTATIVO Dispositivo vertical que apoya al tubo. BASE Dispositivo de soporte que le proporciona estabilidad al microscopio. TUBO Aquella parte del microscopio que contiene los objetivos. BODY TUBE Sujeta el ocular por encima de la lente objetivo y en línea con la misma. Este tubo puede ser recto o inclinado. MANDO DE ENFOQUE MACROMÉTRICO El botón de mando largo, situado en el estativo, sirve para el enfoque macrométrico de la distancia entre la lente objetivo y la platina, o sea, se utiliza para enfocar la muestra de una manera rápida y aproximada. LENTE CONDENSADORA Conjunto de lentes, situado bajo la platina, concentra la luz en el objeto que se está visualizando. DIAFRAGMA Situado también bajo la platina, el diafragma sirve para limitar el tamaño del cono de luz que atraviesa el orificio en la platina y desde allí entra en el objeto que se está visualizando. Existen dos tipos de diafragma: el diafragma de disco y el diafragma iris. El diafragma de disco consiste en una rueda móvil con varios orificios de diferentes tamaños. El diafragma iris es un conjunto de "láminas" de metal finas, el cual controla la cantidad de luz que pasa. El diafragma se maneja a través de una palanca. LENTE OCULAR La "lente ocular" es la lente de aumento situada más cerca de tu ojo. Sirve para aumentar la imagen primaria producida por la lente objetivo. Si el microscopio tiene una sola lente ocular, entonces se habla de un microscopio monocular. También existen microscopios de dos lentes oculares para ver con ambos ojos, los cuales se llaman microscopios "binoculares" o estereomicroscopios. MANDO DE ENFOQUE MICROMÉTRICO El botón más pequeño situado en el estativo - sirve para el ajuste exacto, es decir en incrementos finos, de la distancia entre la lente objetivo y la platina. Proporciona una imagen nítida de la muestra. ILUMINADOR La fuente luminosa. En algunos tipos de microscopios está integrada en la base, en otros viene como una pieza separada. Microscopios no provistos de iluminadores suelen tener espejos. ESPEJO Situado por debajo de la platina. Tiene dos superficies: una superficie plana de reflexión y otra cóncava que concentra la luz. REVÓLVER Un conjunto giratorio de piezas que abarca las lentes objetivo. El revólver es girable para poder desplazar determinados objetivos hacia el camino óptico. LENTES OBJETIVO © 2002, Neo/SCI Corporation. Quedan reservados todos los derechos. 2 Aquella lente de aumento que está situada más cerca de la muestra que se está visualizando. Cuanto mayor es la capacidad de aumento de una lente, más larga será la misma. La mayoría de los microscopios tienen tres lentes objetivo: 4x, 10x, y 40x. Estas lentes están montadas en el revólver. CAMINO OPTICO El camino recorrido por los rayos de luz: parte desde la fuente luminosa, atraviesa la muestra visualizada y el sistema de lentes, continuando de allí a un punto imagen visible para el ojo. PLATINA Una plataforma horizontal sobre la cual se coloca la muestra que se quiera examinar. PINZA PORTAMUESTRAS Para mantener el portaobjetos en su sitio en la platina. Algunos microscopios más sofisticados están provistos de una platina mecánica, la cual desplaza el portaobjetos. CONJUNTO DE PIEZAS SITUADO BAJO LA PLATINA Estas son aquellas piezas del microscopio que están situadas bajo la platina y en el camino óptico. Entre estas piezas figuran el diafragma iris / de disco y la lente condensadora, situada bajo la platina. En algunos microscopios, este conjunto de piezas puede ajustarse arriba / abajo. © 2002, Neo/SCI Corporation. Quedan reservados todos los derechos. 3 Trabajar con el microscopio Cómo sujetar el microscopio Si es necesario desplazar el microscopio de un lado a otro, primero enrosca y sujeta el cable de alimentación. A continuación, agarra el microscopio sujetando el estativo del microscopio con una mano y la base con la otra. ¡Ten cuidado al caminar con el microscopio en las manos! Instalar el microscopio en un sitio Coloca el microscopio sobre una mesa estable, de superficie plana. No pongas el microscopio en un sitio que pueda mojarse o donde no haya espacio suficiente. Capacidad de aumento La capacidad de aumento depende de cuál de las lentes es la más cercana a la muestra que se está visualizando. Cuanto mayor es la capacidad de aumento de una lente, más larga será la misma. La mayoría de los microscopios tienen tres lentes objetivo: de aumentos 4x, 10x y 40x. Algunos microscopios también pueden tener un objetivo de aceite de inmersión (100x). Estas lentes están sujetadas al revólver. Resolución equivale a información Lo que se verá con un mayor grado de aumento depende de la capacidad de separación (resolución) del microscopio. La resolución óptica suele definirse como la distancia más corta posible entre dos objetos que se perciben como dos entidades separadas. Faros de automóvil que se están aproximando son un buen ejemplo de cómo la distancia (el aumento) influye sobre la resolución. A partir de una determinada distancia, un punto luminoso único empieza a separarse en dos faros distintos. Cuanto mayor el número de aumentos, tanto mejor la resolución; el tamaño del campo visual y la profundidad de campo, en cambio, son mejores a aumentos más bajos. Resolución de pequeños detalles La capacidad de un objetivo de resolver pequeños detalles se define como su "abertura numérica" o "A.N.". Cuanto mayor sea la A.N. de una lente, tanto mejor es su capacidad de resolución, es decir, su capacidad de separar dos objetos a la menor distancia posible. El valor de la A.N. normalmente está grabado en las lentes objetivo. Lentes objetivo secas tienen un valor de A.N. inferior a 1.0; lentes objetivo de aceite de inmersión tienen un valor A.N. superior a 1.0 Nunca utilices lentes objetivo secas con aceite de inmersión — ésto dañaría la óptica. Distancia de trabajo La distancia entre el frontal de la lente objetivo y la superficie superior del vidrio cubreobjetos se llama "distancia de trabajo". El objetivo enfoca en esta distancia. Los objetivos de altos aumentos tienen distancias de trabajo menores que los de bajos aumentos. He aquí la distancia de trabajo media de algunos objetivos: Objetivo 10x 20x 40x 100x Distancia de trabajo 8 mm 2 mm 0.3 mm 0.1 mm © 2002, Neo/SCI Corporation. Quedan reservados todos los derechos. 4 Hay que tener mucho cuidado a la hora de enfocar con objetivos de altos aumentos, ya que entonces las distancias de trabajo son mínimas! Información grabada en lentes objetivo Normalmente, los objetivos llevan grabada la información siguiente: 100X -A.N. 1,25 -ACEITE no. de aumentos valor A.N. -tipo de objetivo Número de aumentos ¿Qué quiere decir '10x' en realidad? Si un fabricante de óptica graba un número como p.e. 10x en una lente, eso quiere decir que el aumento de la lente es de 10 veces. Abertura numérica La capacidad de un objetivo de resolver pequeños detalles se define como su "abertura numérica" o "A.N.". Cuanto mayor sea la A.N. de una lente, tanto mejor es su capacidad de resolución, es decir, su capacidad de separar dos objetos a la menor distancia posible. Tipo de objetivo Esta información indica, si se trata de una lente de aceite de inmersión, de una lente de contraste de fase o de otro tipo especial de lente. Lente ocular En los microscopios compuestos, la lente ocular produce el aumento secundario, aumentando de nuevo la imagen primaria producida por la lente objetivo. La lente ocular genera la imagen virtual, que es percibida por el ojo. Es decir, el aumento total se obtiene multiplicando la capacidad de aumento de la lente objetivo con la capacidad de aumento de la lente ocular. Ejemplo: Objetivo 40x Ocular 10x Aumento total = 400x Limpiar los objetivos Si las lentes están sucias, hay que limpiarlas. Para limpiarlas hay que utilizar, únicamente, metanol y un trapo especial para limpiar lentes. Otros materiales podrían dañar la lente. Girar el revólver Ten cuidado al girar cualquier objetivo de grandes aumentos hacia el camino óptico. Vas a sentir un "clic" en el momento que el objetivo quede posicionado correctamente. Enfocar el objetivo Bajar la platina utilizando el mando de enfoque macrométrico. Para esto, gira el mando de enfoque hacia ti. © 2002, Neo/SCI Corporation. Quedan reservados todos los derechos. 5 Posicionar el portaobjetos en la platina Posiciona el portaobjetos mediante las pinzas portamuestras o colocando el portaobjetos en la platina mecánica. Platina mecánica La platina mecánica es una pieza muy útil para el posicionamiento preciso del portaobjetos en el camino óptico. Graduaciones a lo largo de ambos ejes de la platina facilitan volver a colocar y observar muestras visualizadas con anterioridad. Ajustar el diafragma Ajusta la fuente de luz (espejo plano o iluminador) y el diafragma de disco o de condensador de forma que la luz pasa hacia arriba, atravesando la platina. El contraste se controla o a través del diafragma iris o del diafragma de disco situado debajo de la platina. El contraste aumenta cuando se reduce el tamaño de la abertura del diafragma. En cambio, el contraste se disminuye, si la abertura del diafragma se amplía. Camino óptico El camino óptico o camino de luz comienza cuando los rayos de luz entran en el sistema de lentes del microscopio, atravesando la muestra y terminando en la retina del ojo. Sitúa el portaobjetos en la platina del microscopio de forma que el cubreobjetos esté hacia arriba y quede centrado respecto al cono de luz. Coloca el portaobjetos con la pinza portamuestras o mediante la platina mecánica. Paso de enfoque no. 1 — enfoque macrométrico Mirando el microscopio de lado, subir la platina con el mando de enfoque macrométrico hasta que esté muy cerca (1 a 2 mm) del objetivo. Al subir la platina observa siempre la distancia que queda entre la platina y la muestra para no dañar ni la una ni la otra. Paso de enfoque no. 2 — enfoque macrométrico Ahora, mira por el ocular y - girando el mando de enfoque macrométrico en el sentido contrario de las agujas del reloj - baja la platina hasta que la muestra quede enfocada. Paso de enfoque no. 3 — enfoque micrométrico A continuación, optimiza el enfoque mediante el mando de enfoque micrométrico. ¡No utilices nunca el mando de enfoque macrométrico para enfocar con objetivos de grandes aumentos! Ajusta el diafragma hasta obtener la iluminación óptima. Si trabajas con objetivos de mayor grado de aumento, necesitarás más luz (o sea, una abertura más grande del diafragma). Cambiar los objetivos Ten cuidado al girar cualquier objetivo de grandes aumentos hacia el camino óptico. Mira de lado para asegurar que el objetivo no toque la superficie del cubreobjetos. © 2002, Neo/SCI Corporation. Quedan reservados todos los derechos. 6