Download Coloraciones - NOTAS Y LIBROS DE MEDICINA
Transcript
HISTOLOGIA + INTRODUCCION A LA HISTOLOGIA: - Anatomía Microscópica (Marcelo Malpighi) +PODER DE RESOLUCION El poder de resolución es lo mínimo que se puede 2 puntos diferentes de l objeto examinado El poder de resolución del ojo humano sin ningún tipo de elemento que contribuya a su desempeño es hasta de 0,25mm Existen muchas medidas para el estudio en histología las que se van a trabajar principalmente son - Micra = 10-3 mm se denota con la letra griega miu / también se conocen como micrómetros Nanómetros = 10 -3 micras se denota con nm / también son 10-6 mm Angstroms = 10-3 nm se denota con una A con una bola arriba. 1 Glóbulo rojo mide aprox. 7micras Se pueden usar instrumentos para poder observar cosas muy pequeñas como: - Microscopio Óptico : tiene un poder de resolución de 0,25 micras Funciona al someter la muestra a la luz reflejada que pasa por unos lentes y facilita su examinación, el microscopio óptico tiene cuatro lentes diferentes que aportan un diferente aumento El lente ocular = 10x Lentes de objetivo= 4x, 10x, 40x, 100x El aumento se obtiene al multiplicar el lente ocular por el lente objetivo. + HISTOTECNOLOGIA. Es una carrera técnica para la realización de láminas histológicas, se debe realizar el proceso de obtención del tejido en las 6 primeras horas posteriores a la defunción y después se realiza el siguiente proceso. - Obtención del Tejido. Preparación del tejido Fijación : se realiza al introducir el tejido en una solución de formol al 10% el cual penetra el tejido con una velocidad de 1mm x H Procesamiento del tejido para corte a. Deshidratación: se somete el tejido a una serie de soluciones de alcohol a diferentes concentraciones primero una al 25%, 75%, 95% todas por un par de horas para extraer el agua del tejido. b. aclaramiento: se introduce el tejido en una solución de xilol C inclusión en parafina: Una vez deshidratado y aclarado el tejido se lo introduce en paradina calentada a 70 C por dos horas D. Bloque de parafina - Corte del tejido: se usa un micrótomo para cortar el tejido en laminas de un espesor aproximado de unas 5 a 10 micras Tejido en lamina portaobjeto: se lo pone en una lamina de vidrio “pescando” el tejido de una mescla de agua y una gelatina especial Coloración del tejido – Rehidratación: se realiza el proceso inverso con los alcoholes para rehidratar el tejido. Y se procede a colorear el tejido con algunos procedimientos como. HEMATOXILINA EOSINA (H-E) Hematoxilina Eosina Base Acido Se une a lo acido se une a lo básico Basófilo colorea los núcleos de un color azul acidofilo Eosinofilas HISTOQUIMICA Otros métodos de coloración INMUNOHISTOQUIMICA: se utiliza para identificar el tipo de célula por medio de antígenos y anticuerpos - Inmunofluorecencia : si es positivo se tornan fluorescentes partes de la célula Inmunoperoxidasas. 8. Montaje de Placa. +COLORACION DE PLATA (PLATAMETAMINA DE GOMORI) -Método de tinción utilizado principalmente en Hongos - En presencia de acido peryódico los polisacáridos de la pared celular se oxidan a aldehídos Estos reducen el complejo nitrato-plata metanomina. Esto produce un color Café – Negro. Esto por la plata reducida en los lugares que se localiza los aldehídos - Este proceso también identifica la melanina en la piel - PREPARACION DE LA MUESTRA: (No se deben usar objetos metálicos) Se debe fijar la muestra con formol y posteriormente seccionarlo a 5 micras - RESULTADOS Membranas basales, los hongos y el glucógeno se van a tornar de un color negro El fondo de la muestra dependerá de la tinción de contraste y los núcleos marrón oscuro a negro +COLORACION DE TRICOMICO (TRICOMICO DE MASSON) Es una técnica de coloración de fibras - - Colágenas Son moléculas proteicas que están presentes en todos los animales y en ellos son mas comunes en la piel y en los huesos, una de sus características mas notables en este tejido es su flexibilidad y su resistencia a la tracción. Elásticas: Entre este tipo de fibras son comunes la elastina y la fibrilina, las fibras elásticas son de un aspecto ramificado, como su nombre lo indica son extremadamente elásticas, al ser estiradas pueden aumentar 1,5 veces su longitud y volver a su estado normal, se encuentra en lugares como la tráquea, las cuerdas vocales, y en vasos sanguíneos como la Aorta. + Colores: Finalizado el procedimiento ciertos lugares de la célula se tornaran. - Tejido conjuntivo Verde Tejido muscular Verde pardo Eritrocitos Rojizo Núcleos Azul Negro Citoplasma y fibras musculares Rosa +Procedimiento Igual que con algunas técnicas de teñido se debe realizar un desparafinado y una posterior hidratación por medio de diferentes concentraciones de alcohol. Después se debe lavar en agua destilada y sumergirla en Hematoxilina de weigert por unos 5 min. Se lava con agua normal por 10min y se pasa a fuscina de ponceau por 5min. Posteriormente se mete en Acido Fosfomolibdico por 10 min Y SE PONE EN UNA SOLUCION ACETICA DE 5 A 7 MINUTOS se deshidrata y se monta en la lámina de vidrio.