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COLEGIO DE LOS SAGRADOS CORAZONES PADRES FRANCESES Microscopía y Tinciones La observación de los microorganismos puede hacerse con tinción o sin tinción. Al proceder a la observación de bacterias sin tinción se hace una suspensión de estas en líquido y se coloca esta entre lámina y laminilla. Su utilidad es la observación de la motilidad bacteriana. La observación de las bacterias fijadas sobre una lámina portaobjetos debe hacerse mediante el empleo de tinciones. Tinción de Gram Es tal vez la tinción de mayor trascendencia en microbiología. Nos permite la clasificación de las bacterias en dos grandes divisiones: las grampositivas y las gramnegativas. Fundamento Se usa primero el cristal violeta (violeta genciana) el que penetra la pared celular tanto de bacterias grampositivas como gramnegativas. A continuación se agrega el lugol (yodo + yoduro), que actúa como mordiente formando un complejo con el cristal violeta. Al decolorar con una mezcla de alcohol y acetona, la pared de los grampositivos formada por una gruesa capa de peptidoglicano impide la salida del complejo cristal violeta-lugol, manteniéndose la coloración violeta. En los gramnegativos por el contrario el complejo cristal violeta-lugol sale por los poros que ha generado el alcohol-acetona en la membrana externa de la pared celular. La bacteria por lo tanto se decolora y al agregar la safranina se tiñe de rojo. Técnica 1. Se cubre con cristal violeta el frotis ya fijado por calor y se deja por 1 minuto 2. Se lava el frotis con agua y se agrega lugol y se espera por 30 segundos 3. Se decolora con alcohol-acetona 4. Se lava con agua 5. Se agrega la safranina y se espera por un minuto 6. Se lava, se seca y se observa bajo inmersión cocáceas bacilos espirilos Utilidad clínica de la Tinción de Gram Es importante para el clínico contar con esta información, pues le permitirá plantear una hipótesis diagnóstica, que le servirá para dar pie al comienzo de la terapia antibiótica. La sensibilidad analítica de esta técnica es de 100.000 bacterias por ml de muestra. Averigua qué significa cada una de las simbologías que aparece en el lente objetivo del diagrama Plan 25/0.45 160/0.17 Plan 25 0.45 : : : 160 : 0.17: COLEGIO DE LOS SAGRADOS CORAZONES PADRES FRANCESES Complete la figura, nominando las estructuras señaladas por las líneas.
