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NOTIFICACIÓN GRAS
I. Declaración de Estado GRAS
A. Excepciones en las Declaraciones de
los Requerimientos para Publicidad conforme a la Intención de Uso
Super Beta Glucan Inc. (el notificador) ha determinado que los β-glucanos derivados de hongo es Generalmente Reconocido Como Seguro, consistente
con la Sección 201(s) de -. Esta determinación está basada en procedimientos científicos como describe en
las siguientes secciones, bajo las condiciones para su
uso previsto en alimentos. Por lo tanto, el uso de setas
β-glucanos esta exento del requisito para la aprobación
previa a su comercialización.
B. Nombre y Dirección del Notificador
Sherwin Chen,
Jefe de Asuntos Regulatorios
Super Beta Glucan Inc.
5 Holland, Suite 109
Irvine, CA 92618
Teléfono: +1 626 354 1617
Fax: +1 626 203 0655
E-mail: sherwingsuperbetaglucan.com
C. Nombre común o usual de la sustancia
notificada
Sets β-glucanos
D. Condiciones de uso
Seta β-glucanos está principalmente compuesto por
β-glucanos (mínimo 50%) derivado de Ganoderma lucidum está destinado para uso como ingrediente alimentario en productos de panadería y mezclas para hornear,
bebidas y bases de bebidas, cereales y productos de ce-
reales, análogos de productos lácteos, leche y productos lácteos, productos de proteínas vegetales, frutas y
jugos de frutas, caramelos blandos, y sopa y mezclas
de sopas a un nivel de 150 mg de seta β-glucanos por
porción (Referencia cantidades habitualmente consumidas, 21 CFR 101.12). El uso previsto de β-glucanos de
hongo encuentra en los mismos productos alimenticios
y en los mismos niveles mencionados en el GRN 309 1.
Las categorías de los alimentos propuestos son también
idénticas a otra notificación GRAS (GRN 239 2) en este
tema. La intención de uso previsto seta β-glucanos sobre las categorías de alimentos mencionadas estiman
resultados para “usuarios únicos” en ingesta media a 90
º percentil de 338,7 y 678,4 mg / persona / día o 7,3 y
16,4 mg / kg de peso corporal / día, respectivamente.
Seta β-glucanos no se pretende para su comercialización en alimentos para lactantes y niños pequeños.
E. Bases para la Determinación de la denominación GRAS (Generalmente Reconocidos Como Seguros)
En conformidad con 21 C FR 170,30, la intención de
uso de seta β-glucanos ha sido determinada para ser
generalmente reconocido como seguro (GRAS), basado
en procedimientos científicos. Una búsqueda exhaustiva en literatura científica fue realizada para esta revisión.
β-glucanos derivados de levadura fue objeto de dos
notificaciones GRAS (Notas al pie 1 y 2). Para estas notificaciones GRAS (GRN 309 a 2010 y GRN 0002392008), FDA respondió que la agencia no tenía preguntas
acerca de las conclusiones sobre el uso de β-glucanos
derivados de levadura para ser Generalmente Reconocido Como Seguro bajo las condiciones de uso que se
describen en estos avisos. Existe suficiente evidencia
científica cualitativa y cuantitativa, incluyendo datos en
humanos y animales, para determinar la seguridad de
uso de setas β-glucano. La determinación de seguridad
de seta β-glucano está basada en su totalidad en evidencia disponible, incluyendo estudios específicos de
toxicidad en animales así como otros estudios in vitro,
en animales y en humanos, corroborando aún más es
la seguridad.
1.
http:/www.accessdata.fda.gov/scripts/fcn/
gras_notices/grn_309.pdf
2.
http:/www.accessdata.fda.gov/scripts/fcn/
gras_notices/grn000239.pdf
Los resultados de un estudio de toxicidad subcrónica
en ratas realizado según directrices de la OCDE y de la
FDA muestran que la seta β-glucanos no tuvo efectos
adversos a dosis de hasta 2000 mg de peso corporal
seta β-glucanos/kg / día, la dosis más alta probada. Este
estudio sugiere un nivel efectos adversos no observados (NOAEL) de 2000 mg de seta β -glucanos / kg de
peso corporal / día. La ingesta diaria estimada de hongo
β-glucanos para la intención de uso es de 90° percentil
está determinada como 678,4 mg / persona / día (16,4
mg / kg de peso corporal / día). La ingesta estimada es
más de 120 veces menor que el NOAEL determinado
en estudios animales. El estimado consumo diario, si se
ingiere diariamente durante toda la vida, está determinado como seguro.
F. Disponibilidad de la información:
Los datos y la información que sirve como la base
para esta determinación GRAS estará disponible para
la revisión y copia de la Administración de Alimentos y
Drogas (FDA) en la siguiente dirección o será proporcionada a la FDA a su solicitud:
Edward A. Steele, EAS Consulting Group, LLC, 1940
Duke Street, Suite 200, Alexandria, VA 22314, Teléfono:
(703) 684-4408, Fax: (703) 684-4428, E-mail:esteele@
easconsultinggroup.com
El toxicólogo a cargo, el Dr. G. Madhusudan Soni,
responsable de la preparación de este monografía
GRAS y quien también es miembro del panel de expertos también puede ser contactado para la obtención
de datos y la información que sirve como la base para
esta determinación del GRAS en la siguiente dirección:
Madhusudan Soni G., Ph.D., 749 46 ª plaza, Vero Beach
FL, 32968; Teléfono: (772) 299-0746, E-mail: sonim@
bellsouth.net
II. Información Detallada Acerca de la Identidad de la
Sustancia Notificada
A. Nombre Químico
Hongo β-glucanos. Este producto esta principalmente compuesto de β-glucanos
B. Nombre Común/Comercial
El sujeto de esta notificación será comercializado
como Hongo Beta Glucano/MBG® y Beta136®.
C. Número de Registro de Abstracto Químico
No disponible
D. Fórmula Química
(1 -3), (1-6)-3-D-glucano, poli-(1-6)-PD-glucopiranosil-(1,3)-3-D-glucopiranosa
E. Estructura
Los principales componentes del hongo β-glucanos
junto con ubicaciones y orientaciones de los diferentes
β-glucano enlaces se muestra el diagrama a continuación y en la Figura 1.
Diagrama mostrando la orientación y localización de diferentes enlaces β-glucano.
Fig. 1 Estructura Química del Hongo β
F. Peso Molecular
El peso molecular del hongo β-glucano varia de 9.6
kDa a 298 kDa
G. Características Físicas
El hongo β-glucano es un fino polvo de color beige
claro.
H. Composición y Especificación
Las especificaciones típicas de calidad alimentaria
de hongos β-glucanos se presentan en la Tabla 1. Es un
polvo fino de color beige claro, soluble en agua. Los
análisis de 5 producidos de forma independiente, y no
consecutivos lotes (Anexo I) del hongo β-glucanos demuestran que el proceso de fabricación y el producto final son altamente reproducible y que el proceso
es capaz de producir material que cumple siempre la
especificación. El producto se compone de β-glucanos (50%) con un contenido total de carbohidratos de
más de 95%. Los Hongos β-glucanos también contiene
aproximadamente 1% de grasa, 1% de proteínas, 3% de
ceniza y 2% humedad. Como se muestra en la Tabla 1,
la suma de todos los componentes analizados demuestra que los β-glucanos de hongos se ha caracterizado
totalmente (casi 100%) por sus componentes. Extensos
análisis de los diferentes lotes por posibles contaminantes externos de hongos β-glucanos como metales pesados y microorganismos, generalmente asociados con
dichos productos alimenticios, reveló que estos contaminantes no se detectaron dentro de los límites de detección del método utilizado. En esos casos, se supuso
que el contaminante podría estar presente en el límite
de detección. En estos niveles bajos, se concluyó que el
contaminante, si está presente, es improbable que causen algún efecto adverso.
I. Proceso de manufactura
El hongo β-glucano es manufacturado de acuerdo a
las correspondientes Buenas Prácticas de Manufactura (Cgmp) utilizando ingredientes apropiados de grado
alimenticio. La producción de hongo β-glucano es sistemáticamente representado en la Figura 2. El hongo de
la especie Ganoderma lucidum es utilizado en la producción de hongo β-glucano como una especie estándar (G. lucidum ATCC 32472). El micelio de la cepa de
G. lucidum se subcultivaron y se mantuvieron en medio
de agar estéril. El proceso de manufactura comienza
con la preparación de un medio de cultivo que contenga glucosa, galactosa, sacarosa, manosa y extracto de
levadura. Siguiendo un procedimiento de esterilización
a una temperatura y presión determinada por un tiempo específico, el micelio de G. lucidum es inoculado en
un medio estéril y cultivado utilizando una incubadora
a cierto rango de temperaturas por 3-5 semanas para
permitir el crecimiento total del cultivo del hongo. Subsecuentemente, el hongo β-glucano en micelio es extraído usando un homogeneizador de alta velocidad y
vibración ultrasónica. La solución resultante es después
filtrada y separada usando membranas cerámicas para
retirar la mayoría de las pequeñas moléculas de carbohidratos residuales. El concentrado de hongo β-glucano es después agrupado, secado y molido hasta la
obtención del polvo característico. Al finalizar, el hongo
β-glucanos se empaqueta en bolsas de grado alimentario. La muestra de cada lote se analizó para determinar
la presencia de moléculas de carbohidratos utilizando
Cromatografía de Líquidos de Alta Presión (HPLC). Todo
el equipo y los materiales utilizados en el proceso de
producción tienen un historial de uso en el procesamiento de alimentos. Todos los materiales utilizados en
los pasos de procesamiento cumplen con las regulaciones de la FDA.
Medio de Cu lt iv o Enrique
cido c on Gl uc osa, Gal ac to sa, Man oa , Sacarosa y Extr
ac to de Le v adura
ESTERILIZACIÓN
ESTERILIZACIÓN DEL MEDIO DE CULTIVO
INOCULACIÓN DE MICELIO G. LUCIDUM
INCUBACIÓN
EXTRACCIÓN
FILTRADO Y SEPARADO USANDO MEMBRANA CERÁMICA
PARA AISLAR MOLÉCULAS DE CARBOHIDRATOS RESIDUALES
SECADO
Figura 2. Proceso de manufactura de hongo β-glucano
III. Resumen de los Fundamentos de parte del Notificador para la Determinación del Hongo β-Glucano como GRAS
Un panel independiente de expertos reconocidos,
calificados por su formación científica y relevante experiencia nacional e internacional para evaluar la seguridad de los alimentos e ingredientes alimentarios, fue
solicitado por Super Beta Glucans Inc. para determinar
el estado de Generalmente Reconocido Como Seguro
(GRAS) de hongo β-glucanos destinados al uso como
ingrediente de alimentos, en particular como fuente de
fibra dietética. Una búsqueda exhaustiva de la literatura
científica fue realizada a fin de identificar los estudios de
seguridad pertinentes para esta evaluación.
Basados en una evaluación critica de los datos e información pertinente resumida en este documento, los
miembros del panel de expertos han determinado tanto individual como colectivamente por procedimientos
científicos que la adición de hongos β-glucanos en un
nivel de hasta 150 mg de hongo β-glucanos por porción
en productos de panadería y mezclas para hornear, bebidas y bases de bebidas, cereales y productos de cereales, análogos de productos lácteos, leche y productos
lácteos, productos de proteínas vegetales, frutas y jugos
de frutas, caramelos blandos, y sopa y mezclas de sopas
que satisfagan las condiciones citadas anteriormente y
fabricados de acuerdo con las Buenas Prácticas de Manufactura, es Generalmente Reconocido Como Seguro
(GRAS) en las condiciones de uso previsto en alimentos
seleccionados, como se especifica en este documento.
Para llegar a la determinación de que el hongo β-glucanos es GRAS, el grupo de expertos examinó la toxicología y estudios clínicos publicados y otra información
relevante que corrobora la seguridad del producto y
se concluye de que ni el hongo β-glucanos ni ninguno
de sus productos de degradación plantea ningún riesgo toxicológico o de seguridad referentes a los niveles
de intención de uso. En adición a su opinión y a la de
otros cualificados y competentes científicos, revisando
la misma información toxicológica y de seguridad a disposición del público, se llegaría a la misma conclusión.
Además, el panel de expertos revisó los datos de
producción y seguridad en GRNs 239 y 309 para la levadura derivada de β-glucanos. La información de estos
GRNs se incorpora en su totalidad como referencia en
este documento.
IV. Fundamentos para una Conclusión sobre el
Hongo β-Glucano como GRAS para sus intenciones
de uso
DECLARACION DEL PANEL DE EXPERTOS
DETERMINACIÓN DEL ESTADO DE GENERALMENTE
RECONOCIDO COMO SEGURO (GRAS) DEL HONGO
β-GLUCANO COMO INGREDIENTE ALIMENTICIO
TABLA DE CONTENIDOS
1. INTRODUCCIÓN
1.1. Antecedentes
1.2. Actividad Química y Biológica
1.3. Descripción, Especificaciones y Proceso de
Manufactura
1.4. Consumo de β-Glucano como Alimento
1.5. Niveles Según Intención de Uso y Categorías
Alimentarias
1.5.1. Ingesta Diaria Estimada Según Intenciones
de Uso
2. SEGURIDAD DEL Β-GLUCANO
2.1. Conocimiento Común de Seguridad de Uso
2.2. Avisos GRAS sobre β-Glucanos
2.2.1 GRN 309- Levadura Negra β-Glucanos
2.2.2 GRN 239- Levadura de Panadería β-Glucanos
2.3 EFSA Declaración de Seguridad de Levaduras
β-Glucanos
2.4 Datos Biológicos
2.4.1. Absorción Metabólica
2.5. Información Toxicológica
2.5.1. Estudios Específicos de Toxicidad
2.5.2. Estudios Sub-crónicos de Hongo β-Glucano
2.5.3. Estudios Geno tóxicos
2.5.3.1. Ensayos Ames
2.5.3.2. Aberraciones Cromosómicas
2.5.3.3. Ensayos Micro nucleicos In vivo
2.6. Otros Estudios de Toxicidad
2.7. Potencial Alergénico
2.8. Estudios en Humanos
3. RESUMEN
4. COCLUSION
5. REFERENCIAS
6. APENDICE I
DETERMINACIÓN DEL ESTADO
DE GENERALMENTE RECONOCIDO
COMO SEGURO (GRAS) DEL HONGO β-GLUCANO COMO INGREDIENTE ALIMENTICIO
1. INTRODUCCIÓN
Un panel independiente de expertos reconocidos (3),
calificados por su formación científica y las organizaciones nacionales e internacionales experiencia para
evaluar la inocuidad de los alimentos e ingredientes de
alimentos, fue convocada a petición de Super Beta Glucans Inc., EE.UU., para determinar el estado de Generalmente Reconocido Como Seguro (GRAS) del hongo
β-glucanos como nuevo ingrediente alimentario productos de panadería y mezclas para hornear, bebidas
y bases de bebidas, cereales y productos de cereales,
análogos de productos lácteos, leche y productos lácteos, productos de proteínas vegetales, frutas y jugos de
frutas, caramelos blandos, y sopa y mezclas de sopas
en uso a niveles de hasta 150 mg hongo β-glucanos por
porción cuando no sea impedido de otra manera por
un estándar de identidad. Una búsqueda exhaustiva de
la literatura científica para la producción, la seguridad y
la información de toxicidad específicamente referente
al hongo β-glucanos y su componente principal β-glucanos se llevó a cabo hasta octubre de 2011 y puesto a
disposición del grupo de expertos. Super Beta Glucan
Inc. garantiza que toda la información en su poder inédito y relevante para el tema de esta determinación se
ha proporcionado para esta evaluación y se han resumido en esta monografía. El panel de expertos evaluó
de manera independiente y crítica los materiales enviados por Super Beta Glucanos Inc., EE.UU., y demás información que consideró apropiada o necesaria.
Tras una evaluación independiente y crítica, el panel
de expertos confiere 11 de noviembre 2011 y acordó por
unanimidad la decisión descrita en este documento.
1.1 Antecedentes
Las principales fuentes de β-glucanos son la cebada,
la avena, las levaduras y hongos. Los β-glucanos derivados de hongos se han utilizado en muchos países
de Asia para fines de salud por un largo tiempo. Varias
especies de hongos han sido reportados por contener
compuestos bioactivos o funcionales tales como polisacáridos, polisacáridos-péptidos, nucleósidos y que
triterpenoles que han reportado poseer actividad hipoglucémica, inmunomoduladora, anti-inflamatoria,
antiviral, antibacteriana o antiparasitaria (Wasser y Weis,
1999; Cheung, 2009). Entre estos compuestos, los poli-
sacáridos son considerados como potentes compuestos activos (Borchers et al., 1999). Ricos en polisacáridos, hongos y plantas se han utilizado durante siglos
por las culturas alrededor el mundo por sus beneficios
dietéticos y terapéuticos. En los últimos años, los polisacáridos tales como β-glucanos extraídos de hongos
han sido examinados por su potencial anti-cancerígeno/tumoral (Wasser y Weis, 1999; Ooi y Liu, 2000; Ling
y Zhang, 2004). El efecto anticancerígeno de estos polisacáridos ha sido atribuido a un efecto inmunomodulador en lugar de tener actividad cito tóxica directa.
Uno de estos hongos, Ganoderma lucidum (también
conocido como Lingzhi en chino o Reishi en japonés)
se ha utilizado e investigado ampliamente por sus posibles beneficios terapéuticos (Ling y Zhang, 2004). Los
beneficios terapéuticos de los hongos se han atribuido
al polisacárido β-glucanos. En varios países, el marketing confiere propiedades como la reducción de colesterol de fibras de cereales, en particular los que contiene β-glucanos de avena y cebada han sido reconocidos
por los organismos gubernamentales (FDA, 1997). Dados los beneficios potenciales para la salud de β-glucanos, Super Beta Glucan Inc. planea comercializar
determinados productos que contienen hongos β-glucanos extraídos del hongo (G. lucidum) 3 Siguiendo el
modelo descrito en la sección 201 (s) de la Ley Federal
de Alimentos, Medicamentos y Cosméticos, según enmienda. Véase también, archivos adjuntos (curriculum
vitae) que documenta la experiencia de los miembros
del grupo de expertos.
tienen una variabilidad estructural diversa incluyendo el
peso molecular, el patrón de vinculación, grado de ramificación, triple conformación helicoidal, y solubilidad
en agua (Driscoll et al., 2009).
Recientemente, Zhao y Cheung (2011) trató de aclarar las estructuras de β-glucanos de diferentes fuentes
tales como la inulina (tubérculos), cereales (cebada),
bacterias (Curdlan), algas marinas (Laminarina) y hongos. Estas investigaciones revelaron que todos estos
β-glucanos contenidos casi todas las fracciones de glucosa como su componente de azúcar con cantidades
traza solamente de manosa (<2%) estando en la laminaria. El análisis de ligamiento glicosídico en el β-glucanos por medio de metilación de β-glucanos de cebada
dio como resultado un polisacárido de cadena lineal en
combinación con 1,3 y 1,4 β-enlaces en relación de 1:3,
mientras que β-glucanos tanto de Curdlan y laminaria
tenía un β-(1,3) enlace de cadena lineal, el Curdlan se
encontraba sin ramificaciones mientras que la laminaria
se encuentra altamente ramificado.
En comparación con otras fuentes, los β-glucanos
de hongos tuvieron una cadena principal muy ramificada con mezcla de glicosídico 1,3, 1,4 y 1,6 β-enlaces.
Kim et al. (2011) reportaron que los β-glucanos obtenidos a partir de hongos contenían 514 g / kg de (1,3)
-β-glucanos con (1,6) -β-enlaces de cadenas laterales
y su estructura química se confirmó por espectroscopia CNMR y FTIR (13). Zhang et al. (2007) informó de
que la estructura química más común de β-glucanos de
hongos es una columna vertebral β-1,3 con diferentes
grados de ramificaciones β-1, 6 y / o β-1,4.
1.2 Actividad Química y Biológica
Los β-glucanos, constituida por polímeros de D-glucosa, se produce principalmente en los hongos, levaduras y plantas (granos), pero no en células de mamífero (Driscoll et al., 2009). Es uno de los principales
componentes de la pared celular en la mayoría de los
hongos y plantas. Como un hidrato de carbono polímero, β-glucanos existe como una cadena de moléculas de glucosa unidas por enlaces glucosídicos P (Figura 1). Los anillos de D-glucosa con seis lados pueden
estar conectados entre sí, en una variedad de posiciones en el anillo estructural de la D-glucosa. Algunos
compuestos β-glucanos se repiten constantemente
de D-glucosa unidas en una posición específica. La
estructura química primaria de β-glucanos polímeros
difiere de fuente a fuente, pero se compone principalmente de un polímero de glucosa lineal con enlaces
β (1,3), β (1,4) o β (1,6). Los β-glucanos de la avena y
la cebada son principalmente lineales con grandes regiones de β (1,4) que separan tramos cortos de β(1,3),
mientras que las estructuras β-glucanos de levadura
tienen un β(1,3) con columna vertebral β(1,6)-vinculado
β(1,3) ramas (Yan et al., 2005). β-glucanos de hongos
son similares a la levadura excepto que se componen
de ramificaciones cortas β(1,6) que salen de una columna vertebral β(1,3), así que carece de la capacidad
β (1,3) que se extiende desde la rama β(1,6) punto de
ramificación (Borchers et al., 2004). Estos polímeros
1,3. Descripción, Especificaciones y Proceso de Manufactura
El hongo β-glucanos, derivado de G. lucidum, es
un polvo fino de color beige claro con un olor suave y
sabor suave. Las especificaciones del hongo β-glucanos fabricado por Super Beta Glucan Inc. se resumen
en la Tabla 1 (Sección II-H). Los resultados analíticos de
los cinco productos de forma independiente producidos, lotes representativos para demostrar que el hongo
β-glucanos cumple con estas especificaciones (Anexo
I). Un amplio análisis de posibles contaminantes externos de β-glucanos de hongos, tales como metales
pesados [cadmio, arsénico, mercurio, plomo], y de carácter microbiológico (incluyendo el recuento de placas aeróbicas, levaduras y hongos, coliformes totales,
E. coli, Salmonella sp.) que están generalmente asociados con los productos alimenticios, de estos cinco lotes
revelado, ya sea la ausencia de estos contaminantes o
su presencia en niveles muy bajos que se consideran
seguras. El hongo β-glucanos de G. lucidum se fabrica
de acuerdo con las actuales Buenas Prácticas de Manufactura (cGMP).
1,4. Ingesta de β-G1ucanos Proveniente de Alimentos
Los β-glucanos están presentes en el salvado de cereales como la cebada y la avena y son comúnmente
producidos como subproductos agrícolas. Debido a
sus beneficios para la salud, la FDA (1997) permitió una
declaración de propiedades saludables en la reducción
de colesterol en una etiqueta de alimentos para cereales con β-glucanos (0,75 g por porción) cuando es
incluido en dichos alimentos (FDA, 1997). Del mismo
modo, la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria
(EFSA) autorizó una declaración referente al mantenimiento de concentraciones normales de colesterol
en la sangre por parte de fibras de cereales solubles,
en particular los β-glucanos de avena y cebada (EFSA,
2009). Aunque los β-glucanos derivados de distintas
fuentes difieren ligeramente en estructura, se esperan
comportamientos similares en los sistemas bioquímicos. Esto se discute en más detalle a continuación.
No hay números específicos disponibles sobre la exposición pre-existente al hongo β-glucanos. Sin embargo, según 21 CFR 101.81, la justificación de declaraciones de propiedades saludables de la fibra soluble de
ciertos alimentos y el riesgo de enfermedad cardiaca
coronaria requiere la ingestión diaria de 3 g o más por
día de β-glucano provenientes de fibra de granos enteros de avena y cebada, o una combinación de ellos
(FDA, 2005). Por lo tanto, se puede estimar que una
dieta con el objetivo de reducir el riesgo de cardiopatía
coronaria debe incluir al menos 3 g de β-glucanos/día.
Dado que la avena y la cebada tienen un contenido de
β-glucano en promedio 5 y 7%, respectivamente (Peterson et al, 1995;. Oscarsson et al, 1996;. Izydorczyk y
Dexter, 2008), se puede estimar que una porción de 50
g de avena grano entero o cebada proporciona 2,5 y
3,5 g de β-glucanos, respectivamente. La FDA ha aprobado el uso de levadura de panadería glicano (A veces llamado como sinónimo glucanos) para su adición
directa como aditivo alimentario multiuso para diversos productos alimenticios, incluyendo aderezos para
ensaladas, postres helados, crema agria y análogos
de quesos untables, y aperitivos saborizados (21 CFR
172.898). Estos usos aprobados de glicano también sugieren un consumo seguro de β-glucanos como alimentos para los seres humanos. Además, los consumidores han estado expuestos a β-glucanos a través del
consumo de la levadura del pan, champiñones y otros
alimentos que contienen β-glucanos.
Ko y Lin (2004) estimaron los niveles de β-1,3-glucanos en 17 artículos de seis categorías alimenticias que
incluyen legumbres, cereales, tubérculos, hortalizas,
frutas y setas. Los resultados de esta cuantificación reveló niveles significativos de β-1,3-glucanos presentes
de manera natural en una serie de alimentos, como las
setas comestibles, específicamente el Shiitake (Lenbnus edodes), Maitake (Grifola frondosa), Coliflor Silvestre (Sparassis crispa Fr), y de variedades de hongos de
nieve (Tremella fucifomis). Se ha informado de que los
hongos de nieve (peso seco) tuvieron el mayor contenido de β-1,3-glucanos (2,5%), además de ser ricos en
agua (0,67%) y en alcalinos solubles (1,87%).
Además, estos investigadores también reportaron
que varias fuentes no-derivados de los hongos tales
como apio, chi-chian hojas, zanahoria y rábano, con-
tienen casi un 20% de β-1 ,3-D-glucanos en su fracción
total de carbohidratos, y la soja se informó que contienen hasta 0,8% de β-1 ,3-D-glucanos (peso en seco).
1,5. Intención de Uso y Categorías Alimentarias
Super Beta Glucan Inc. tiene la intención de utilizar
hongo β-glucanos obtenidos de G. lucidum como ingrediente en productos, productos de panadería y mezclas para hornear, bebidas y bases de bebidas, cereales y
productos de cereales, análogos de productos lácteos,
leche y productos lácteos, productos de proteínas vegetales, frutas y jugos de frutas, caramelos blandos, y
sopa y mezclas de sopas a un nivel de 150 mg de hongo
β-glucanos por porción (importes de referencia consumida, 21 CFR 101.12). Aunque algunos alimentos con
normas de identidad se incluye en la lista de los alimentos, los usos de la hongos β-glucanos están destinados
a alimentos sin un estándar de identidad. Las categorías de alimentos destinados al uso y la utilización de
los niveles de hongo β-glucanos en la Tabla 2. El hongo
β-glucano está destinado está destinado al uso en los
mismos alimentos y en niveles idénticos de adición a
los anteriormente descritos en la notificación GRAS por
PeopleAndTechnologies LLC para β-glucanos de levadura negra en GRN 309.
1,5.1. Valor De Ingesta Estimado Para Las Intenciones de Uso
Las intenciones de uso de hongo β-glucano (Concentración al 50%) en los mismos alimentos y a los mismos niveles que aquellos incluidos en la GRN 309 (FDA,
2010) no se esperan efectos notables por la ingesta de
β-glucanos en el total de la dieta del público a partir de
la inducción en el mercado de otros suplementos los
cuales completaron en esencia los mismos mercados y
alimentos. Basados en un análisis estadístico acerca de
la potencial ingesta dietética presentada en el GRN 309,
se estimó que la media y el noventa por ciento de todos
las ingestas de parte de los usuarios por el total de la
población seria de 338.7 y 678.4 mg/persona/día o 7.3
y 16.4 mg/ kg bw/día, respectivamente. El análisis dietético descrito en la GRN 309 no fue cuestionado por la
FDA en respuesta a una carta del 14 de Junio de 2010.
Los datos más relevantes de este análisis dietético proveniente de la GNR 309 son presentados en la Tabla 2. El
análisis reportado en GRN 309 fue ensayado utilizando
el estudio del United States Department of Agriculture
(USDA) 1994-1996 Continuing Survey of Food Intakes
by Individuals (USDA CSFII 1994-1996). Los datos presentados en la Tabla 2 muestran que, excepto en infantes y niños, la ingesta diaria de β-glucanos expresada
en peso corporal es menor a 17 mg/kg bw/día. Aunque
los infantes fueron incluidos en la estimación de ingesta
diaria, el hongo β-glucanos no pretende su inclusión en
formulas infantiles o comidas para bebes.
a Adaptado de GRN 309 b Aunque se incluyeron infantes en esta estimación, el hongo β-glucanos no pretende su inclusión en formulas
infantiles o alimentos para bebes c Valores en mg/persona/día d Varones en paréntesis representados como mg/kg bw/día
2. SEGURIDAD DE β-GLUCAN
2.1 Conocimiento Popular de Seguridad de Uso
A pesar de que Super Beta Glucan Inc. Está basando
sus conclusiones acerca de que los β-glucanos derivados de hongos cumplen con la clasificación GRAS
basado en procedimientos científicos, existe una larga historia y riqueza en evidencia e información que
relatan el uso de estas sustancias en alimentos. Esta
información es resumida a continuación.
Existe conocimiento popular de la larga historia humana acerca del consumo de hongos como alimentos. Como un popular hongo comestible, G. lucidum
(Reishi), la fuente de β-glucanos declarados en este
aviso, ha sido ampliamente consumido en países Asiáticos por la creencia popular de promover la salud y la
longevidad (Sliva, 2003). El G. lucidum es utilizado en
preparaciones dietéticas p, particularmente en la elaboración de tés o sopas (Ghorai et al., 2009). El G. lucidum es utilizado como suplemento alimenticio y bastantes beneficios de este hongo han sido reportados
(Ogbe et a., 2010). La utilidad del hongo comestible G.
lucidum como suplemento preventivo/terapéutico ha
sido sugerido en La Medicina China (TMC) por miles de
años y recientemente ha ganado interés por parte de
los países Occidentales. Como se mencionó previamente, bastantes han sido los efectos benéficos atribuidos al G. lucidum. La mayoría de estos atributos no
han sido estudiados en pruebas clínicas controladas,
aunque existen abundantes usos clínicos, así como in
vitro y pruebas animales que apoyan su seguridad. La
seguridad está fuertemente sustentada por el uso común de G. lucidum (Reishi) como hongo comestible y
su extensa exposición a los consumidores sin reportes
de efectos adversos, indicando que los componentes
de este hongo son bien tolerados. Así. La evidencia disponible provee apoyo basado en el conocimiento popular la seguridad de exposición humana a los β-glucanos encontrados en el hongo G. lucidum.
2.2 Avisos de Estado GRAS en β-Glucano
Recientemente, la FDA recibió de manera separada
dos notificaciones GRAS sobre β-glucanos derivados de
levadura [GRN 309 (FDA, 2010) y GRN 239 (FDA, 2008)].
En estas sumisiones, una amplia gama de datos provenientes de literatura publicada fueron presentados por
estos notificadores. La FDA no cuestiono la aceptabilidad e idoneidad de la evidencia disponible para sustentar la seguridad de uso de β-glucanos en las cartas
que fueron enviadas a los notificadores. La discusión
presentada a continuación sugiere que la agencia está
conforme con la determinación GRAS de β-glucanos
para sus niveles de intención de uso en una selección de
alimentos presentados en los GRNs. Como el sujeto de
esta determinación GRAS es substancialmente similar a
los productos de estas notificaciones mencionadas, los
estudios descritos en estas notificaciones pueden ser
también utilizadas para fundamentar la determinación
de uso seguro en la presente valoración para la obtención del estatus GRAS del hongo β-glucanos. Aunque
existes algunas diferencias en la estructura química entre los β-glucanos de levadura y hongo, la información
disponible, particularmente sobre perspectiva metabólica, indica que estas moléculas se comportan de
manera similar en el cuerpo. Un resumen de las similitudes de producto entre los β-glucanos notificados a
la FDA y el sujeto de la presente evaluación de estatus
GRAS se encuentra anexado en la Tabla 3.
2.2.1. GRN 309 β-Glucanos de Levadura Negra
El sujeto de la mayoría de notificaciones GRAS recientes son los β-glucanos derivados de Aureobasidium pollulans (FDA, 2010). Los β-glucanos fueron
identificados como un beta-1,3/1,5-glucano y descrito
como un polvo café/beige claro con una alta solubilidad en agua. La declaración del notificador acerca de
la seguridad de los β-glucanos derivados de A. pullulans está apoyada por publicaciones sobre estudios de
toxicidad aguda, toxicidad subcrónica oral y genotoxicidad ensayados en ratones. Estas toxicidades aguda
y oral subcrónica no mostraron ninguna evidencia de
2.2.2 GRN 239 – β-Glucanos de Levadura de Panificación
En esta sumisión acerca de β-glucanos de levadura
de panificación (FDA, 2008), el notificador discute estudios publicados e inéditos en roedores y humanos,
incluyendo toxicidad aguda en ratas y ratones, toxicidad subcrónica oral en ratas, y estudios ciegos y controlados con placebos en humanos por 10 y 30 días.
No se observaron efectos adversos en ninguno de los
toxicidad. Adicionado a esto, los estudios de genotoxicidad no mostraron ningún efecto adverso. El notificador además corroboro la seguridad de los β-glucanos
derivados de A. pullulans con una publicación sobre estudios de toxicidad subcrónica oral ensayados en ratas
(Babicek et al., 2007), y un estudio inédito ensayado en
humanos. En este estudio de toxicidad subcrónica oral,
las ratas no mostraron toxicidad sistémica o gastrointestinal a los más altos niveles probados de 2000 mg/kg
bw/día (1000 mg/kg bw dos veces al día) de β-glucanos
derivados de A. pollulans. En estudios humanos, el notificador concluyó que 400 mg/persona/día de β-glucanos derivados de A. pullulans no revelaron efectos adversos. El notificador concluyo que los resultados de los
estudios publicados e inéditos apoyan la seguridad de
β-glucanos derivados de A. pullulans. La agencia revisó
el aviso y no se cuestionó la conclusión del notificador
acerca de que los β-glucanos derivados de A. pullulans
son GRAS dentro de las condiciones de intención de
uso.
estudios. El notificador concluyo que los roedores en
los estudios de toxicidad aguda no tuvieron evidencia
de efectos adversos de toxicidad quimio clínica o histopatológica. En el estudio de toxicidad subcrónica oral,
las ratas no mostraron evidencia de toxicidad sistémica o gastrointestinal al nivel máximo (100 mg/kg bw/
día) de β-glucanos de levadura de panificación. El notificador resumió los resultados de estudios clínicos en
humanos, y concluyó que niveles mayores a 500 mg/
persona/día de β-glucanos de levadura de panificación
fueron bien tolerados no hubieron diferencias significativas en los parámetros bioquímicos en sangre. La
FDA revisó el aviso y no cuestiono la conclusión del
notificador acerca de que los β-glucanos de levadura
de panificación son GRAS dentro de las condiciones
de intención de uso.
Un resumen de las publicaciones recientes siguiendo la
revisión por parte de la agencia de los recientes avisos
de estado GRAS con algún hallazgo relevante es descrito a continuación.
2.3 Evaluación de la EFSA Acerca de la Seguridad de
β-Glucanos de Levadura
La tasa metabólica de β-glucanos se asemeja a las
de otros prebióticos y otros carbohidratos no digeribles/
fermentables como la insulina, fructooligosacáridos
(FOS) , galactooligosacaridos, almidón resistente, polidextrosa, ciclodextrinas y lactulosa, de las cuales todas
permanecen largos periodos sin digerir en la parte superior del tracto gastrointestinal (Macfarlane et al., 2006).
Los humanos son incapaces de digerir carbohidratos
poliméricos con enlaces β-glucósidos (Wisker et al.,
1998). Por lo tanto, la absorción en el epitelio intestinal
y una significante exposición sistémica a β-glucanos de
hongo es improbable. Similar a otros polisacáridos no
digeribles, los β-glucanos de hongo son resistentes a la
digestión en la parte superior del tracto gastrointestinal
hacia abajo del íleon distante. Sin embargo, en el colon,
es probable que sea fermentado por la microbia residente resultando en la formación de H2, CO2 y cadenas
cortas de ácidos grasos (SCFA) (Park and Floch, 2007;
Zhao and Cheung, 2011). Ninguna dieta rica en fibra que
comprende fuentes de fibra fermentable conduce a la
generación, absorción y excreción de los metabolitos
mismos que será el caso de la digestión de β-glucanos
de hongo. De esta manera, el metabolismo de β-glucanos de hongo no presenta ningún riesgo a la salud y no
existe toxicidad sistémica esperada continuando con su
ingesta.
Es estudios humanos, la tolerancia y absorción de
preparaciones de levaduras de panificación soluble
β-1,3/β-1,6-D-glucanos fueron investigadas (I.chne et
al., 2005). En esta clasificación abierta en el estudio de
dosis escalada, 8 voluntarios sanos (6/grupo) fueron
aleatoriamente elegidos para recibir 100, 200 o 400 mg
de SBG (preparación de levadura de panificación β-1,3/
β-1,6-D-glucanos)/persona por un periodo consecutivo
de 4 días. Las concentraciones en plasma de β-glucanos
fueron monitoreadas en el primer día a -1, +1 horas del
tratamiento y en los días 2, 5 y 8. El límite de detección fue de 5 pg./ml. Las concentraciones de plasma
de β-glucanos no difirieron de valores pre-estudiados y
valores registrados a los 5 y 8 días, demostrando que no
existe absorción sistémica. El resultado de este estudio
indica que no hubo absorción sistémica de β-1,3-glucano siguiendo una administración oral a corto plazo.
En estudios recientes, Zhang y Cheung (2011) evaluaron el efecto bifidogénico de β-glucanos de cebada,
algas, bacterias y hongos comparando sus fermentaciones in vitro por tres bifidobacterias encontradas comúnmente en el lumen intestinal de humanos incluyendo
Bifidobacterium infantis (en lactantes) y Bifidobacterium
logum y Bifidobacterium adolescentes (ambos en humanos adultos). Los β-glucanos fueron incubados con
cultivos puros de estas bacterias la fermentación del
lote durante 24 hrs. La inulina se utilizó como control.
El Panel EFSA de Productos Dietéticos, Nutrimentales y Alergénicos, evaluó la seguridad de los β-glucanos derivados de S. cerevisiae para uso como ingrediente novedoso en una variedad de alimentos y
bebidas para la población en general la cual resultó
en una ingesta diaria a dosis mayores a 600 mg/día de
β-glucanos (EFSA, 2011). El panel notó que el escenario de ingesta para β-glucanos es de alguna manera
similar a los antecedentes de ingesta de β-glucanos
de otras fuentes dietéticas. Los datos revisados pertinentes a toxicidad aguda y sub-crónica, absorción y la
limitada información respecto a humanos, no resulta
de gran interés. El Panel consideró que el riesgo alergénico de los β-glucanos no presenta un mayor riesgo
que otros productos que contienen levaduras de panificación. El Panel notó que los β-glucanos de otras
fuentes ya habían sido evaluados para su seguridad
por parte de la EFSA. El Panel concluyó que con base
en la naturaleza de los β-glucanos de levadura de panificación, la significante historia del uso de su fuente
(levadura de panificación), provee una ingesta estimada y datos suplementarios provenientes de estudios
humanos y animales, los β-glucanos de levadura son
seguros para las condiciones de intención de uso.
2.4 Datos Biológicos
La determinación de seguridad de β-glucanos de
hongos está basada en su totalidad en evidencia disponible, particularmente de estudios experimentales
de β-glucanos de hongos y aquellos ensayados con
β-glucanos de otras fuentes en animales, así como
también en pruebas ensayadas en humanos. Los estudios experimentales de β-glucanos de hongos fueron
diseñados para evaluar su seguridad como suplementos alimenticios. Los relevantes estudios biológicos y
toxicológicos con β-glucanos de hongos y otras fibras
dietéticas similares son incluidos en la siguiente sección a fin de brindar soporte para las conclusiones encontradas en esta determinación. Subsecuente a la reciente evaluación de la FDA en relación a los avisos de
estatus GRAS de β-glucanos de levadura que también
contienen todo tipo de datos relevantes de otras fuentes de β-glucanos, muy pocos estudios que relaten la
seguridad de los β-glucanos aparecen en la literatura
publicada. Recientemente la EFSA (EFSA, 2011) también evaluó la seguridad de los β-glucanos de levadura
y concluyeron que el consumo a niveles mayores de
600 mg por día es seguro. Estos estudios no revelaron
ninguna nueva preocupación referente a seguridad.
2.4.1 Absorción Metabólica
Los parámetros controlados durante la fermentación
incluyeron cambios en el pH, la proliferación microbiana y la producción de AGCC. El valor de pH en todos los medios de cultivo se redujo en 0.5 a 1.5 unidades y los β-glucanos apoyaron el crecimiento de las
tres bifidobacterias. B. infantis produce casi el doble
de cantidad de SCFA total que las otros dos bifidobacterias. El perfil de SCFA de B. infantis tenían una
proporción relativamente mayor de ácido butírico y
propiónico pero menor cantidad de ácido acético que
el de las otras bifidobacterias. La utilización de todos
los β-glucanos procedentes de distintas fuentes, independientemente de sus diferencias en enlaces glucosídicos y peso molecular por las tres bifidobacterias
fue comparable le al de la inulina. Los resultados de
este estudio indican que los β-glucanos derivados de
hongos son fermentados de manera similar a los de
otras fuentes en el tracto gastrointestinal humano.
2.5 Información Toxicológica
2.5.1. Estudios Específicos de Toxicidad
En una serie de estudios de toxicidad, Chen et al.
(2011) investigó la toxicidad subcrónica y los posibles
efectos genotóxicos de los hongos β-glucanos (el
sujeto de esta determinación GRAS). Por lo tanto en
el estudio de toxicidad subcrónica y los estudios de
mutagenicidad, los β-glucanos de hongo utilizados
fueron producidos por Super Beta Glucan Inc. Estos
estudios se describen en las secciones siguientes.
2.5.2. Estudio de Toxicidad Subcrónica en β-Glucanos de Hongo
Chen et al. (2011) evaluó la seguridad de la seta
B-glucanos extraídos de G. lucidum en dosis de hasta 2000 mg / kg de peso corporal / día en ratas. En
este estudio, a 96 ratas Sprague-Dawley (I2 / sexo /
grupo, 6 semanas de edad) se les administró (por sonda) β-glucanos de hongos disueltos en agua estéril
una vez al a niveles de dosis de 0 (control), 500 (dosis baja), 1000 (dosis media), o 2000 (dosis alta) mg
/ kg de peso corporal durante 90 días consecutivos.
El estudio se realizó en de acuerdo con un protocolo
basado en las directrices de la Organización para la
Cooperación y el Desarrollo Económico (OCDE) para
Productos Químicos de Ensayo siguiendo los Lineamientos de Pruebas para Efectos sobre la Salud, para
Estudios de Toxicidad Oral en Roedores con Dosis Repetidas durante 90 días, Sección 408, de acuerdo con
las Buenas Prácticas de Laboratorio para Estudios No
Clínicos (FDA, 21 CFR, Parte 58), y los principios de la
OCDE sobre Buenas Prácticas de Laboratorio.
A lo largo del periodo de estudio los animales fueron observados para detectar signos clínicos de toxicidad y mortalidad / morbilidad (todos los días), las
observaciones clínicas detalladas (diario), el peso corporal y consumo de alimento (semanal), y exámenes
oftalmológicos en el día antes de agrupación y eu-
tanasia. Los pesos corporales se registraron antes de
la primera dosis; semanalmente después de ello; antes
de la finalización del estudio, y en el día de la necropsia. La media de peso corporal y la ganancia media de
peso corporal se registraron. El consumo de alimento
se midió a intervalos semanales. Hematología, química
del suero, y análisis de orina se realizaron para los animales que sobrevivieron después de 13 semanas de tratamiento (en la terminación). Al terminar, se efectuó una
necropsia y el peso de los tejidos fue registrado. Más de
40 tejidos y órganos presentaron una fijación en un 10%
por taponamiento de una forma neutra de formalina. El
examen histopatológico se realizó en el conjunto completo de los tejidos recogidos de alta dosis y los grupos
de control.
No hubo muertes reportadas durante el período de
tratamiento que se relacionan con β-glucanos de hongos. Una hembra en el grupo de dosis baja fue sacrificada el día 82 debido a trauma accidental aislado con el
tratamiento con β-glucanos de hongos. No hubo ningún signo clínico observado de toxicidad relacionado
con el tratamiento. Los exámenes oftalmológicos no
revelaron ninguna anormalidad. Los pesos corporales
de los grupos de tratamiento eran comparables con el
grupo de control de animales durante el período de tratamiento y no se observaron diferencia estadísticamente significativas (p <0,05) fue con algunas excepciones.
En las hembras, la ganancia de peso corporal medio fue
estadísticamente menor en el grupo de dosis baja en la
semana 9 de medición y en el grupo de alta dosis en la
semana 13. Estos cambios no se consideraron relacionados con el tratamiento ya que se encontraron dentro
del rango de control normal de laboratorio. El consumo
de alimento promedio (g / rata / día) fue comparable en
todos los grupos de dosis en ambos sexos. Los parámetros de análisis de orina, como el volumen, pH, gravedad
específica, urobilinógeno y no mostraron diferencias
significativas entre los grupos de control respectivos
(Chen et al., 2011).
No se observaron efectos adversos relacionados con
el tratamiento de β-glucanos de hongos de importancia biológica en los parámetros hematológicos en ratas
macho y hembra. Sin embargo, algunas diferencias estadísticamente significativas fueron observadas. En ratas
hembras, hubo un aumento estadísticamente significativo de MCV y MCH observado en el grupo de dosis alta
(2000 mg / kg / día) de tratamiento. De manera similar,
un aumento significativo en los niveles de hematocrito
se observó en el grupo tratado con dosis baja (500 mg /
kg / día). Estos cambios no se observaron en ambos sexos, cambios correlativos en los parámetros de las células en la sangre, fueron pequeños, y/o no se observaron
estar de alguna manera relacionados con la dosis, por lo
que fueron considerados como los cambios fortuitos/
variaciones biológicas y no relacionada con efectos adversos en el tratamiento (Chen et al., 2011).
No se observaron efectos adversos de importancia
biológica relacionados con el tratamiento de β-glucanos de hongos sobre los parámetros químicos de suero.
Sin embargo, algunas diferencias estadísticamente sig-
nificativas se observaron. En las ratas macho, un aumento significativo de la concentración sérica de sodio se observó en el tratamiento con dosis baja (500
mg / kg / día) y en dosis alta (2000 mg / kg / día) en
comparación con el grupo control. De manera similar
en las ratas hembras, en comparación con el grupo
de control, un aumento significativo en los niveles de
sodio se observó en los grupos de dosis media (1.000
mg / kg / día) y altas (2000 mg / kg / día). Estos cambios observados en los niveles de sodio en suero se
encontraban dentro de la gama normal de control en
laboratorio, por lo que se consideraron como cambios fortuitos/variaciones biológicas y no como relacionadas con efectos del tratamiento (Chen et al.,
2011).
No hubo cambios toxicológicamente significativos
observados en el peso de los órganos en comparación al grupo de control. Sin embargo, en los machos,
el peso de los testículos fue estadísticamente menor
en el grupo de dosis baja, y el peso del corazón fue
inferior en el grupo de dosis alta. Estos cambios fueron de pequeña magnitud, y/o no se observó relación con la dosis por lo tanto no se consideró como
prueba relacionada con el artículo. No hubo hallazgos
macroscópicos relacionados con el tratamiento en
ninguno de los grupos. Todos los cambios macroscópicos observados fueron considerados como espontáneos y/o incidentales en la naturaleza, sin una
tendencia relacionada con la dosis, y sin anormalidad
histopatológica. No hubo hallazgos histopatológicos
en ninguno de los órganos relacionados con el tratamiento de β-glucanos de hongos. Todos los cambios
histopatológicos observados fueron considerados
como espontáneo e incidental a las ratas de esta edad
y grupo en particular. Basándose en los resultados de
este estudio, el nivel de efecto no observado (NOAEL)
la dosis más alta probada de β-glucanos de hongos se
determina como 2000 mg / kg de peso corporal / día
(Chen et al., 2011).
2.5.3. Estudios de Genotoxicidad
2.5.3.1. Prueba de Ames
El potencial mutagénico de β-glucanos de hongo
evaluó mediante el Ensayo de Mutación Inversa Bacteriana, también conocida como la prueba de Ames
(Chen et al., 2011). Cepas de Salmonela typhimurium
TA98, TA 100, TA102, TA1535, TA1537 y fueron utilizados, y el método de incorporación de placa en presencia o ausencia del sistema de activación metabólica S9 fue aplicada. Las siguientes concentraciones
de β-glucanos se probaron: 0,313, 0,625, 1,25, 2,5, y
5 mg/ placa. Los productos químicos usados como
control positivo para los ensayos con o sin activación
metabólica incluyeron mitomicina C y benzo(a)pireno. No hubo un aumento significativo en el número
de colonias revertientes. Los β-glucanos de no presentaron ningún efecto genotóxicos a cualquiera de
las concentraciones probadas con o sin la presencia de
S9. El número de colonias revertientes en el grupo negativo de control de cada cepa estaba dentro del rango
de datos de control históricos. Las colonias revertientes
en el grupo de control positivo eran más de dos veces
(TA98, TA100, TA102 y) y tres veces (TA1535 y TA1537)
que los grupos de control negativo. No hubo un aumento significativo en el número de colonias revertientes en
cualquiera de las concentraciones en la presencia o ausencia de mezcla S9, lo que sugiere que los β-glucanos
de hongo no fueron genotóxicos.
2.5.3.2. Aberraciones cromosómicas
El potencial genotóxicos de los β-glucanos de hongo para inducir aberraciones cromosómicas en Células
ováricas de hámster chino (CHO-K1) se evaluó (Chen et
al., 2011). La prueba fue realizada de acuerdo con la directriz de la OCDE para este ensayo. Cinco dosis (0,313,
0,625, 1,25, 2,5 y 5 mg / ml) de β-glucanos de hongo
se ensayaron para determinar la citotoxicidad utilizando
el ensayo MTT. Los controles positivos en los diferentes tratamientos incluyen mitomicina C (3 y 18 horas) y
benzo(a)pireno (3 horas). Las dosis no citotóxica de 1,25,
2,5 y 5 mg / ml de β-glucanos de hongos con o sin S9
a corto plazo (3 horas) y sin S9 a largo plazo (18 horas)
fueron seleccionados para el ensayo de aberración cromosómica.
En las tres horas de exposición grupal, la viabilidad celular en ausencia de activación metabólica S9 en las siguientes concentraciones 5, 2,5, 1,25, 0,625, y 0,313 mg/
ml fueron 83,53 ± 2,64%, 85,38 ± 3,60%, 91,96 ± 0,77%,
91.54 + 1.12%, 96.79 ± 3.27%, respectivamente. A corto
plazo el tratamiento en presencia de la mezcla metabólica S9, las viabilidades de células a 5, 2,5, 1,25, 0,625, y
0,313 mg / ml fueron 96,17 ± 3,88%, 85,83% ± 1,75, 93,49
± 0,39%, 97,39 ± 3,10%, 100,82 ±2,11%, respectivamente. En el tratamiento a largo plazo en ausencia de la
mezcla metabólica S9, las viabilidades celulares fueron
67,05 ± 5,59%, 69,40% ± 1,88, 81,46 ± 1,92%, 82,01% ±
3,15, 95,61 ±3,11%, respectivamente. El tratamiento con
β-glucanos de hongo con células CHO-K1 no mostró
genotoxicidad. Los resultados de esta investigación indican que, en comparación con el control negativo, el
tratamiento con β-glucanos de hongo no dieron lugar
a ninguna diferencia tanto a corto como a largo plazo
en la prueba de aberraciones cromosómicas (Chen et
al., 2011).
2.5.3.3. Ensayo In Vivo de Micronúcleos
El ensayo de micronúcleos en sangre periférica de
mamíferos se llevó a cabo de acuerdo con las directrices
de la OCDE para ese estudio (Chen et al., 2011). Β-glucanos de hongo fueron administrados por vía oral a CD-1
® (ICR) ratones (5 / sexo / grupo) en dosis de 0, 1250,
2500 y 5000 mg/kg de peso corporal. La Ciclofosfamida (80 mg / kg de peso corporal) fue elegida como el
control positivo y administrado por vía intraperitoneal.
Las muestras de sangre periférica de la vena de la cola
fueron recogidos a las 24, 48, y 72 horas después
de la dosificación. No se observaron síntomas clínicos anormales o mortalidad durante el estudio. No
hubo diferencias significativas observadas en el peso
corporal promedio entre los grupos. Los porcentajes
PCE del grupo de control positivo a 48 horas después
de la dosificación en hembras y machos fueron 1,05
± 0,23% y 1,25 ± 0,34%, respectivamente. Una disminución en el porcentaje de PCE el grupo de control
positivo a las 48 horas después de la dosificación, indica la inhibición de la eritropoyesis por ciclofosfamida. Sin embargo, el porcentaje de PCE en todos los
grupos de tratamiento no mostró disminución obvia
a la observada para el grupo de control negativo lo
que indica que los β-glucanos de hongos no inhibieron la eritropoyesis. La frecuencia de micronúcleos
en mil eritrocitos policromáticos (PCE) del grupo de
control negativo a los 24, 48, y 72 horas después de la
dosificación fueron 1,00 ± 0,71%, 1,20+ 0,84%, y 0,80
± 0,84 ° / oopcE en las hembras, y 1,00 ± 0,71%, 1,20
± 0,45%, y 1,00 ± 0,71% en los machos, respectivamente. La frecuencia de micronúcleos en mil PCE del
grupo de control positivo a las 48 horas después de
la dosis fue 21,00 ± 8,49% en las hembras y 21,00 ±
2,55% en los machos. Después de realizar un análisis
de distribución de Poisson, no hubo diferencia significativa entre los tres grupos tratados y el grupo control
negativo, lo que sugiere que los β-glucanos de hongos no fueron genotóxicos.
2,6. Otros estudios sobre Toxicidad
Babicek et al. (2007) investigaron la toxicidad aguda y subcrónica de β-glucanos derivados ingredientes de levaduras (WGP 3-6) en ratas. En el estudio de
toxicidad aguda en ratas F344, el valor DL50 de WGP
3-6 se encontró que era mayor que 2000 mg / kg.
En el estudio de toxicidad subcrónica, ratas F344 (10
/ sexo / grupo; 5-6 semanas de edad con un peso
de entre 80 y 100 g al inicio del tratamiento) se les
administró (sonda) a diario con WGP 3-6 a dosis de 0,
2, 33.3, o 100 mg / kg de peso corporal / día durante
90 días. El estándar de control toxicológico completo
y criterios de valoración fueron investigados. Administración de WGP 3-6 no afectó significativamente
pesos de los animales o el consumo de alimento. No
hubo mortalidad u observaciones de patologías clínicas, funcionales/conductuales, microscópicas o de
aumento de peso que indiquen toxicidad observada.
Cambios esporádicos observados en algunos parámetros bioquímicos y hematológicos no fueron considerados de importancia toxicológica.
Basándose en los resultados de este estudio, el
investigador determinó un NOAEL de 100 mg / kg
de peso corporal / día, la dosis más alta probada. En
un estudio de toxicidad oral de 52 semanas en ratas,
Feletti et al. (1992) investigaron los efectos de β-glucanos extraídos de Candida albicans ATCC 20955.
Ratas Sprague Dawley (20 /sexo / grupo) fueron ad-
ministradas a través de sonda con el material de ensayo
a dosis de 0, 50, 100, o 200 mg en total β-glucanos / kg
de peso corporal / día durante 52 semanas. No se observaron desviaciones relacionadas con el tratamiento
en la normalidad respecto a mortalidad, aspecto físico
y comportamiento general. La Alimentación, la ingesta
de agua y el aumento del peso corporal de los grupos
alimentados con β-glucanos no difieren de las de los
grupos de control. No se observó alteración en el peso
de los órganos principales. Los resultados de hematología, química sanguínea, análisis de orina y de la autopsia
estuvieron dentro de los rangos normales. A una dosis
de 200 mg / kg se observaron, heces blandas o diarrea y
ampliación cecal con hiperplasia variable de la mucosa
del colon. Como plantean los autores, estos síntomas
son típicos de la exposición a sustancias que son absorbidas incompletamente en el intestino delgado y por el
sometimiento a metabolismo microbiano en el ciego y
el colon. La ampliación cecal es una respuesta bien establecida en los roedores que consumen grandes cantidades de polioles (Newberne et al., 1988), y dicha respuesta
no se considera toxicológicamente significativa y no es
relevante para los humanos (OMS, 1987) Los investigadores estiman que el NOEL para ser 100 mg / kg / día.
Sin embargo, dados los cambios observados en este estudio, una NOAEL de 200 mg / kg / día es más apropiada,
la dosis más alta probada.
En un estudio 28 días por administración oral de β-glucanos de cebada, Jonker et al. (2010) investigaron la seguridad de una alta pureza (> 75%) β-glucanos de cebada. En este estudio, se alimentaron ratas Wistar (5 / sexo
/ grupo) con β-glucanos de cebada a niveles dietéticos
de 0 (control), 1%, 5 y 10 (0, 500, 2500, 5000 mg / kg de
peso corporal / día) durante 28 días. Las observaciones
clínicas y conductuales, el crecimiento, la alimentación
y el consumo de agua, oftalmoscopia, hematología, química clínica, análisis de orina, peso de los órganos, necropsia e histopatología no revelaron efectos adversos
de β-glucanos de cebada. Las ratas macho en el grupo
de dosis alta mostraron una reducción del colesterol en
plasma y los niveles de fosfolípidos y un plasma de mayor nivel de urea. Estos cambios no se consideraron de
importancia toxicológica. La reducción de colesterol es
un efecto conocido de los β-glucanos en animales y es
un efecto que se pretende en los seres humanos. Los
niveles plasmáticos más bajos de lípidos de altas dosis de
los machos estaban dentro del rango normal para ratas
de este grupo y edad. Además, los cambios en los lípidos plasmáticos no se acompañaron de ningún cambio
relevante en otros puntos finales, incluyendo la histopatología, los niveles plasmáticos más bajos de lípidos en
altas dosis de sexo masculino se consideraron no toxicológicamente relevantes. En el grupo de machos expuestos a la dosis media y alta, los pesos ciegos llenos
y vacíos aumentaron, y esto se considera que es debido
a una respuesta fisiológica al consumo de altas cantidades de carbohidrato indigerible. El resultado de este
estudio muestra que la alimentación de β-glucanos de
cebada en niveles dietéticos hasta un 10% durante 28
días fue bien tolerada sin ningún signo de toxicidad. Este
nivel dietético fue equivalente a 5,8 y 5,9 g β-glucanos de cebada / kg de peso corporal / día en ratas
machos y hembras, respectivamente (NOAEL = g /
kg de peso corporal / día). En dos estudios separados
de toxicidad de 28 días, Delaney et al. (2003a, 2003b)
también informaron que consumo de concentrado
de β-glucanos de cebada (10% en la alimentación) no
se asoció con ningún signo evidente de toxicidad en
ratas y ratones, incluso tras el consumo de grandes
cantidades.
2,7. potencial alergénico
Es una creencia popular de que los hongos son capaces de provocar síntomas de alergia. Sin embargo,
estudios sobre este tema son pocos y no tienen en
cuenta muchas de las familias importantes de hongos y su potencial para causar alergias. En un artículo
de revisión, Koivikko y Savolainen (1988) reportaron
que el alcance general de la alergia por hongos sigue
siendo desconocido. Puede ser muy leve (<1%) a partir su consumo, pero podría, alternativamente, ser tan
frecuente como la alergia al polen y moho (10-30%
de una población alérgica). La mayoría de los estudios publicados sobre la alergenicidad de especies de
Ganoderma se relacionaron con las esporas de estas especies. Entre los diferentes hongos, los géneros
que producen basidiosporas son distinguibles Ganoderma, Boletus, Rhodophyllus, Thelephora, Russula y
Lactarius. Con respecto al riesgo alergénico de β-glucanos de levadura, el panel de la EFSA observó que el
riesgo alergénico a este ingrediente no es mayor que
el riesgo de la exposición a otro productos que contengan levadura de panadería (EFSA, 2011).
Bruce (1963) investigó la piel y la reactividad bronquial en los asmáticos a diferentes extractos alérgenos compuestos por basidiosporas, incluidos los de
Ganoderma applanatum. Se observó reactividad en
la prueba bronquial, cutánea e intradérmica. En este
estudio, los extractos con basiodiospora dieron una
mayor frecuencia de reacciones positivas a la provocación bronquial en comparación con los extractos
de polvo caseros, o el polen o esporas de royas, carbones o mohos. Las reacciones en las pruebas cutáneas fueron frecuentes, pero menos que los alérgenos comunes. En otro estudio, Herxheimer et al.
(1966) reportaron tres pacientes asmáticos con resultados positivos al extracto de Ganoderma applanatum. Cabe señalar que en este estudio, se utilizaron
extractos de esporas.
Toda et al. (2010) informaron de un caso de una
mujer de 38 años de edad con asma bronquial y reacciones de hipersensibilidad después de ingerir hongos
matsutake (Tricholoma matsutake). La paciente presentó una reacción positiva en la prueba de punción
cutánea (pápula de 5 x 4 mm y los brillos de 26 x 15
mm a 15 minutos) para el hongo matsutake, pero fue
negativo para hongos Shiitake. Por otro lado, diez voluntarios sanos mostraron resultados negativos para
esta prueba. La anafilaxia causada por hongos matsutake
se considera poco común: un total de sólo 13 casos han
sido reportados en Japón.
Huang et al. (2010) investigaron los efectos de polisacáridos extraído de G. lucidum después de un proceso
de extracción alcalina sobre la función inmune en los ratones. Ratones machos NIH fueron alimentados con el
extracto a dosis de 50, 100, y 200 mg / kg / día durante
hasta 30 días. Una serie de pruebas inmunológicas tales
como la remoción de carbono, hipersensibilidad retardada, hemolisina suero y actividad de células NK fueron
realizados. Los resultados de los ensayos inmunológicos
revelaron que los polisacáridos alcalinos solubles tuvieron efectos perceptibles sobre la fagocitosis de monocitos y peso de los órganos inmunológicos (Bazo, timo) en
ratones inmunodeprimidos a las dosis probadas. Sin embargo, se podría restaurar una reacción de hipersensibilidad de tipo retardado a dinitrofluorobenceno (DFNB),
niveles de hemólisis de anticuerpos a las tres dosis aplicadas, y mejorar la actividad de las células asesinas naturales a la dosis de dosis alta y media.
En resumen, las alergias hongos son causadas por
partículas en el aire o por contacto con la piel. La alergia
a esporas de G. lucidum se ha informado, sin embargo,
la información disponible no reveló ningún caso de alergia producida a partir del consumo de hongo G. lucidum
como un alimento. Pocos casos de alergia de consumo
de otros tipos de hongos, tales como Matsutake han sido
reportados. Un caso con de asma bronquial con reacciones de hipersensibilidad después de la ingesta de hongo
Matsutake (Tricholoma matsutake) ha sido reportado. La
cantidad residual de proteína en los β-glucanos de hongo objeto de la presente GRAS es muy baja (<1%; Tabla
1). Además, como el ingrediente será etiquetado como
β-glucanos de hongos, se prevé que los individuos con
alergia o sensibilidad a hongos o a β-glucanos eviten la
ingestión de este producto.
2,8. Estudios Humanos
En un reciente estudio aleatorizado, doblemente ciego, controlado con placebo, ensayado en grupos paralelos intervencionistas, con 50 individuos sanos (con
riesgo a diabetes tipo 2) (edad 30-70 años, IMC 25-40) se
les administraron bebidas que contenían placebo (control), una dosis menor (3 g / día), o una dosis mayor (6 g
/ día) de extracto de β-glucanos de cebada con viscosidad reducida durante 12 semanas (Bays et al., 2011). Los
sujetos (68% mujeres, con una media de edad-56 años,
IMC 32 kg/m2, y glucemia basal en ayunas 102 mg / dL)
fueron instruidos para seguir manteniendo un programa
de mantenimiento de peso denominado Therapeutic Lifestyle Changes. Los resultados de este estudio sugieren
que el consumo de 6 g / día de β-glucanos de cebada
en una bebida por más de 12 semanas puede mejorar
la sensibilidad a la insulina en personas hiperglucémicas.
Todas las bebidas fueron en general bien toleradas, sin
experiencias adversas graves y no se observaron diferencias significativas entre los grupos observados. Los even-
tos adversos más frecuentes fueron diarrea, dolor
abdominal, distensión y flatulencia. Estos eventos adversos fueron generalmente leves y autolimitados, sin
diferencias significativas entre los grupos de estudio.
En un estudio doble ciego, controlado con placebo ensayo clínico descrito en GRN 239 (FDA, 2008),
los voluntarios sanos (n = 20) consumieron una única cápsula que proporciona 250 mg WGP 3-6 / día
durante 10 días. No se observaron diferencias significativas en el recuento diferencial de leucocitos, fenotipificación sangre total o actividad de las células
natural killer. La fagocitosis de Staphylococcus aureus
aumentó significativamente por el tratamiento con
WGP 3-6. Los niveles de factor de suero de necrosis
tumoral (TNF)-alfa aumentaron 6 veces en relación
con los niveles de referencia, pero se informó que no
tuvieron efectos sobre la interleucina (IL) -1 o interferón (INF)-gamma. Los perfiles de química sanguínea
se encontraron dentro de la normalidad para la mayoría sujetos con las siguientes excepciones: 6 de 10
sujetos habían aumentado los niveles de potasio; se
aumentaron de los niveles de glucosa en un sujeto
y disminuyó en otro, y se aumentaron los niveles de
calcio en 1 paciente. En general, WGP 3-6 a una dosis
de 250 mg / persona / día durante 10 días fue seguro
y bien tolerado y los parámetros bioquímicos sanguíneos no se vieron afectadas por el tratamiento con
β-glucanos.
En el segundo estudio, doble ciego y controlado
con placebo, también informó en GRN 239 (FDA,
2008), 62 sujetos con el resfriado común (exposición
a rinovirus) fueron evaluados para la seguridad de los
WGP 3-6 y su impacto sobre los biomarcadores inmunológicos. Todos los voluntarios fueron pre-seleccionados para excluir sujetos que mostraron niveles de
anticuerpos rinovirus, y cada participante consumió
250 mg de WGP 3-6 dos veces al día durante 10 días
consecutivos. Un número biomarcadores hematológicos asociados al sistema inmunológico, incluyendo
variables de seguridad estándar fueron investigados.
La suplementación de WGP 3-6 aumento insignificativamente el aumentó el número de células NK en relación con el placebo, mientras que no se observaron
efectos significativos en las células T o los niveles de
citoquinas. En general, WGP 3-6 fue bien tolerado y
no se reportaron efectos adversos en el artículo atribuibles a la prueba.
Nicolosi et al. (1999) evaluaron el efecto sobre los
lípidos en suero de un derivado de β-glucanos de fibra de levaduras en 15 hombres de vida libre, obesos,
hipercolesterolémicos. En este estudio, después de
un período de 3 semanas en que los sujetos consumieron su dieta habitual, 15 g de β-glucanos fibra /
día se añadieron a una dieta de 8 semanas y luego
se detuvo durante 4 semanas. Los lípidos en plasma
se midieron semanalmente durante la línea base y en
la semana 7 y 8 del consumo de fibra, y de nuevo en
la semana 12. En comparación con el valor inicial, el
consumo de β-glucanos de levadura disminuyó los
niveles plasmáticos de colesterol total en 8 y 6% en
la semana 7 y 8, respectivamente. Estos valores volvieron a la normalidad tras la interrupción de la ingesta de
β-glucanos. Sin embargo, un aumento significativo (16%)
en lipoproteínas de alta densidad (HDL)-colesterol se informó en la semana 12. Los efectos adversos reportados
son típicamente característicos del el consumo de fibra,
tales como diarrea, náuseas, malestar abdominal, distensión abdominal y flatulencia, eran mínimas. Los resultados de este estudio indican que los β-glucanos de levadura a una dosis de 15 g / persona / día fue bien tolerada
en adultos en la población general.
Lehne et al. (2005) investigaron la seguridad de un
β-1,3-glucano ramificado soluble (SBG) derivado de S.
cerevisiae en un estudio abierto de dosis escalada en
18 voluntarios sanos. En este estudio, los voluntarios (6
/ grupo) fueron aleatorizados para recibir 100, 200, o
400 mg SBG / persona en un período de 4 días consecutivos. Una serie de parámetros relacionados con la
seguridad, incluidos los datos hematológicos, datos de
química clínica, análisis de orina, la inmunoglobulina (Ig)
A, IgG, IL-6 y TNF-alfa fueron investigados. No se observaron anomalías en los signos vitales y no hubo eventos
adversos que pudiesen considerarse relacionados con
la administración de SBG. Se observaron lesiones menores en la mucosa de la cavidad oral en 7 sujetos las
cuales se consideraron como variaciones fisiológicas
normales. El aumento de la proteína C-reactiva, recuentos de fibrinógeno y diferencias anormales de leucocitos
se observaron en 5 sujetos con preexistente infecciones
respiratorias, incluyendo 1 con herpes labial. Todos los
demás parámetros hematológicos y bioquímicos fueron
normales dentro de los rangos fisiológicos. En el día 5
un aumento significativo de IgA en la saliva fue observó
en el grupo de dosis de 400 mg, pero no se reportaron
diferencias significativas en los valores de IgA o IgG en
suero o saliva. No hubo cambios significativos en la IL-lp,
IL-6, TNF-a o entre los grupos tratados. Los investigadores concluyeron que el SBG fue seguro y bien tolerado
por los voluntarios sanos, cuando se administra por vía
oral una vez al día durante 4 días consecutivos a dosis de
hasta a 400 mg.
3. RESUMEN
Super Beta Glucan Inc. ha desarrollado un proceso
para fabricar un producto estandarizado con β-glucanos
del hongo de la especie Ganoderma lucidum. Los β-glucanos de hongo se encuentran como un polvo fino de
color beige claro soluble en agua con un olor característico leve y sabor suave. La composición analítica de
β-glucanos de hongos demostraron que contiene principalmente hidratos de carbono (> 95%) de los cuales los
β-glucanos constituyen > 50%. Super Beta Glucan Inc.
tiene la intención de utilizar β-glucanos en concentraciones de hasta 150 mg / dosis (cantidades de referencia
consumida habitualmente, 21 CFR 101.12) en productos
de panadería y mezclas para hornear, bebidas y bases de
bebidas, cereales y productos de cereales, análogos de
productos lácteos, leche y productos lácteos, productos
de proteínas vegetales, frutas y jugos de frutas, caramelos blandos, y sopa y mezclas de sopas. La intención de uso de β-glucanos de hongo anteriormente mencionadas en las categorías de alimentos dará
como resultado una media y 90 º percentil estimando
una ingesta diaria de 338,7 y 678,4 mg / persona / día
o 7,3 y 16,4 mg / kg de peso corporal / día, respectivamente. La intención de uso de β-glucanos de hongo
se pretende en los mismos productos alimenticios y
en los niveles indicados en la 309 GRN.
El hongo fuente del cual se derivan los β-glucanos es una especie comestible que ha sido consumida durante siglos. Adicionalmente, los β-glucanos se
encuentran comúnmente en el salvado de cereales
granos, la pared celular de levadura, hongos, algas,
ciertos hongos y bacterias consumidos por los seres
humanos. La FDA ha permitido que la declaración de
propiedades saludables en una etiqueta de alimento
para la reducción los niveles de colesterol cuando
algún β-glucano de cereal se incluye en dichos alimentos. Además, la agencia aprobó el uso de glicano
producto levadura de panificación para la adición directa como aditivo alimentario multiuso para diversos productos alimenticios (21 CFR 172.898). Además,
la FDA no puso en duda las conclusiones del estado
GRAS y la seguridad de la utilización de β-glucanos
de levadura fue el tema de dos notificaciones GRAS
(GRN 309; GRN 239). Toda esta información sugiere
que hay un común conocimiento de consumo seguro de β-glucanos a partir de diferentes fuentes de alimentos o productos.
Desde un punto de vista químico, los β-glucanos
están constituidos por polímeros de D-glucosa. La estructura primaria de los polímeros β-glucanos derivados de diferentes fuentes difiere, pero principalmente
consta de un polímero de glucosa lineal con 13 (1,3),
13 (1,4) o 13 (1,6). Los β-glucanos de hongos son similares a los β-glucanos de levadura, excepto que se
compone de ramificaciones cortas β (1,6) - ramas que
viene fuera de una columna vertebral β (1,3), y carece
de la ramificación extra β (1,3) que se extiende desde
la ramificación β (1,6) . A pesar de estas diferencias
estructurales menores, la ruta metabólica de β-glucanos es similar y se asemeja a la de otros prebióticos
y carbohidratos no digestibles / fermentables. Los seres humanos no pueden digerir carbohidratos de polímeros con enlaces β-glucosídicos y por lo tanto la
exposición sistémica a partículas β-glucanos, incluida
la de hongos, es poco probable. Sin embargo, similar
a otras fibras dietéticas, los β-glucanos se fermentan
en el colon por la microbiota residente resultando en
la formación de H2 y CO2 y SCFA.
En una serie de estudios específicamente diseñados que siguieron las directrices estándar de reglamentación, la toxicidad subcrónica y el potencial
mutagénico de β-glucanos de hongos fueron investigadas. En el estudio de toxicidad subcrónica, administración (sonda) de β-glucanos de hongo a niveles
de dosis de 0, 500, 1000 y 2000 mg / kg de peso corporal / día durante 90 días consecutivos, no produjo
ningún signo de toxicidad clínica, mortalidad, cambios
en el peso corporal, ganancia de peso de peso corporal
humano y animal relacionadas con el consumo.
No se observaron efectos toxicológicamente significativos relacionados con el tratamiento, incluidos cambios en la hematología, química clínica, parámetros de
orina, y peso de los órgano analizados. No se observaron al final del periodo de tratamiento anormalidades macroscópicas y microscópicas. Los resultados de
los estudios de mutagenicidad incluyendo el ensayo de
Ames, aberración cromosómica in vitro y en ensayo de
micronúcleos in vivo no reveló ninguna genotoxicidad
de β-glucanos de hongo. Basándose en el estudio subcrónico, el nivel no observado efectos adversos (NOAEL)
para β-glucanos de hongos fue de 2000 mg / kg de peso
corporal / día, la dosis más alta probada. La ingesta diaria estimada de β-glucanos de hongos en los alimentos
destinados para su uso es más de 120 veces menor en
comparación con el NOAEL determinado a partir del estudio de la toxicidad subcrónica.
Además de los estudios específicos de β-glucanos de
hongos, otras investigaciones que incluyeron estudios
en animales, tales como estudios de toxicidad subcrónica y crónica (52 semanas) de β-glucanos de levadura
en ratas y ensayos clínicos de β-glucanos de levadura en
sujetos humanos tampoco reveló ningún efecto adverso
por parte de los β-glucanos La seguridad de los β-glucanos de hongos está fundamentada por la similitud en la
composición del ingrediente a los β-glucanos de levadura y glicanos que han sido revisados por la FDA como
parte de Notificaciones GRAS. Además, niveles significativos de 1,3-β-glucanos también ocurren naturalmente
en una serie de alimentos, incluyendo hongos comestibles resultantes de la exposición actual.
En resumen, en base a procedimientos científicos4
y antecedentes de exposición de fuentes naturales, el
consumo de β-glucanos de hongo derivados de G. lucidum (Reishi) como un ingrediente alimentario agregado
se considera segura en la ingesta de 90avo percentil con
una ingesta diaria estimada de 678,4 mg / persona / día
(16,4 mg / kg de peso corporal / día). Los usos previstos
son compatibles con la normativa vigente, es decir, los
β-glucanos de hongos se utilizan en productos de panadería y mezclas para hornear, bebidas y bases de bebidas, cereales y productos de cereales, análogos de productos lácteos, leche y productos lácteos, productos de
proteínas vegetales, frutas y jugos de frutas, caramelos
blandos, y sopa y mezclas de sopas en los niveles de uso
de 150 mg β-glucanos de hongo por porción cuando de
otra manera no impedida por un Estándar de Identidad, y
se produce de acuerdo con las Buenas Prácticas de Manufactura actuales (cGMP).
4. CONCLUSIÓN
Basado en una evaluación crítica de los datos disponibles al público resumido más arriba, Los miembros del
Panel de Expertos cuyas firmas aparecen a continuación,
tienen, individual y colectivamente la conclusión de que
los β-glucanos de hongo, que cumplan las especificaciones antes citada, y cuando se utiliza como un
alimentos ingrediente en productos alimenticios seleccionados (en productos de panadería y mezclas
para hornear, bebidas y bases de bebidas, cereales y
productos de cereales, análogos de productos lácteos, leche y productos lácteos, productos de proteínas vegetales, frutas y jugos de frutas, caramelos
blandos, y sopa y mezclas de sopas) a nivel de hasta
150 mg de β-glucanos de hongo / porción (importes
de referencia consumida, 21 CFR 101.12), cuando de
otro modo no impedida por una norma de identidad
tal como se describe en esta monografía y que resulta
en el percentil 90avo de todos los usuarios ingesta
estimada de 678,4 mg / persona / día (16,4 mg / kg de
peso corporal / día) es seguro y generalmente reconocido como seguro (GRAS).
También es nuestra opinión que otros científicos
calificados y competentes, tas la revisión de la misma
información toxicológica y de seguridad a disposición
del público llegaría a la misma conclusión. Por lo tanto, también hemos concluido que los β-glucanos de
hongos, cuando son usados como se describe, son
seguros y GRAS basada en procedimientos científicos.
4 Referencias
Babicek K., Cechovd, I., Simon, R.R., Harwood, M.,
Cox, D.J., 2007. Toxicological assessment of a particulate yeast (1,3/1,6)-(β-D-glucan in rats. Food Chem.
Toxicol. 45: 1719-1730.
Bays, H., Frestedt, J.L., Bell, M., Williams, C., Kolberg, L., Schmelzer, W., Anderson, J.W., 2011. Reduced viscosity Barley 13-Glucan versus placebo: a
randomized controlled trial of the effects on insulin
sensitivity for individuals at risk for diabetes mellitus.
Nutr. Metab. (Lond). 8:58.
Borchers, A.T., Keen, C.L., Gershwin, M.E., 2004.
Mushrooms, tumors and immunity: An update. Exp.
Biol. Med. (Maywood) 229:393-406.
Borchers, A.T., Stern, J.S., Hackman, R.M., Keen,
C.L., Gershwin, M.E., 1999. Mushrooms, tumors, and
immunity. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 221: 281-293.
Chen, S.N., Nan, F.H., Chen, S., Wu, J.F., Lu, C.L.,
Soni, M.G., 2011. Safety assessment of mushroom
β-glucan: Subchronic toxicity in rodents and mutagenicity studies. Food Chem. Toxicol. 49: 2890-2898.
Cheung, P. C. K. (ed). 2009. Mushrooms as Functional Foods, John Wiley & Sons, Inc., Hoboken, NJ,
USA.
Delaney, B., Carlson, T., Frazer, S., Zheng, G.-H.,
Hess, R., Ostergren, K., Kierzek, K., Haworth, J., Knutson, N., Junker, K., Jonker, D., 2003a. Evaluation of
the toxicity of concentrated barley β-glucan in a 28day feeding study in Wistar rats. Food Chem. Toxicol.
41: 477-487.
Delaney, B., Carlson, T., Zheng, G.-H., Hess, R.,
Knutson, N., Frazer, S., Ostergren, K., van Zijverden,
M., Knippels, L., Jonker, D., Penninks, A., 2003b. Repeated
dose oral toxicological evaluation of concentrated barley
β-glucan in CD-1 mice including a recovery phase. Food
Chem. Toxicol. 41: 1089-1102.
Driscoll, M., Hansen ,R., Ding, C., Cramer, D.E., Yan, J.,
2009. Therapeutic potential of various beta-glucan sources in conjunction with anti-tumor monoclonal antibody
in cancer therapy. Cancer Biol. Ther. 8:218-225.
EFSA, 2009. Scientific Opinion on the substantiation of
health claims related to beta-glucans and maintenance
of normal blood cholesterol concentrations (ID 754, 755,
757, 801, 1465, 2934) and maintenance or achievement
of a normal body weight (ID 820, 823) pursuant to Article
13(1) of Regulation (EC) No 1924/2006. EFSA Journal 7:
1254.
EFSA, 2011. Panel on Dietetic Products, Nutrition and
Allergies (NDA); Scientific Opinion on the safety of “Yeast
beta-glucans” as a Novel Food ingredient. EFSA Journal
9(5):2137.
FDA, 1997. Food labeling: Health claims; oats and coronary heart disease. Fed. Regist. 62: 3584-3601. 000028
Mushroom beta-glucan Page 26 of 30 GRAS
FDA, 2005. Food labeling: Health claims; soluble dietary fiber from certain foods and coronary heart disease.
Interim final rule. Fed. Regist. 70: 76150-76162.
FDA, 2010. GRN 000309. Beta-glucan derived from
Aureobasidium pullulans. GRAS Notification by Glucan
Corporation, Limited. Document available at: http://
www.accessdata.fda.gov/scripts/fcn/gras
notices/gm
309.pdf
FDA, 2008. GRN 000239. Bakers yeast beta-glucan.
GRAS Notification by Biothera Inc. Document available
at: http://www.accessdata.fda.gov/scripts/fcn/gras notices/grn000239.PDF
Feletti, F., De Bernardi di Valserra, M., Contos, S., Mattaboni, P., Germogli, R., 1992 Chronic toxicity study on a
new glucan extracted from Candida albicans in rats Arzneimittelforschung 42: 1363-1367.
Ghorai, S., Banik, S.P., Verma, D., Chowdhury, S., 2009.
Fungal biotechnology in food and feed processing. Food
Research International 42: 577-587.
Herxheimer, H., Hyde, H. A., Williams, D. A., 1966. Allergic asthma caused by fungal spores. Lancet 1 572-573.
Huang, S.Q., Li, J.W., Wang, Z., Pan, H.X., Chen, J.X.,
Ning, Z.X., 2010. Optimization of alkaline extraction of
polysaccharides from Ganoderma lucidum and their
effect on immune function in mice. Molecules 15:36943708.
Izydorczyk, M.S., Dexter, J.E. 2008. Barley β-glucans
and arabinoxylans: Molecular structure, physicochemical
properties, and uses in food products—a Review. Food
res. Int. 41: 850-868.
Jonker, D., Hasselwander, 0., Tervild-Wilo, A., Tenning,
P.P., 2010. 28-Day oral toxicity study in rats with high purity barley beta-glucan (Glucagel). Food Chem. Toxicol.
48: 422-428.
Kim, J., Lee, S.M., Bae, I.Y., Park, H.G., Gyu, Lee, H., Lee,
S., 2011. (1-3)(1-6)-13-Glucanenriched materials from
Lentinus edodes mushroom as a high-fibre and low-calorie flour substitute for baked foods. J. Sci. Food Agric.
doi: 10.1002/jsfa.4409.
Ko, Y.-T., Lin, Y. -L., 2004. 1,3-3-glucan quantification by a fluorescence microassay and analysis of its
distribution in foods. J. Agric. Food Chem. 52: 33133318.
Koivikko, A., Savolainen, J., 1988. Mushroom allergy. Allergy 43: 1-10.
Lehne, G., Haneberg, B., Gaustad, PI Johansen,
P.W., Preus, H., Abrahamsen, T.G. 2005. Oral administration of a new soluble branched β-1,3-D-glucan is
well tolerated and can lead to increased salivary concentrations of immunoglobulin A in healthy volunteer. Clin. Exp. Immunol. 143: 65-69.
Ling, Z.B., Zhang, H.N., 2004. Anti-tumor and immunoregulatory activities of Ganoderma lucidum
and its possible mechanisms. Acta Pharmacol. Sin.
25:1387-1395.
Macfarlane, S., Macfarlane, G.T. 1995. Proteolysis
and amino acid fermentation. In: Human Colonic
Bacteria: Role in Nutrition, Physiology and Pathology.
Gibson GR Macfarlane GT (eds.) CRC Press, Boca Raton, FL., pp. 75-100.
Newberne, P M., Conner, M.W., Estes, P., 1988. The
influence of food additives and related materials on
lower bowel structure and function. Toxic01 Pathol
16: 184-197.
Nicolosi, R., Bell, S J., Bistrian, B R., Greenberg, I.,
Forse, R.A., Blackburn, G.L., 1999 Plasma lipid changes after supplementation with P-glucan fiber from
yeast Am. J. Clin. Nutr. 70: 208-212.
Ogbe, A.O., Atawodi, S.E., Abdu, P.A., Oguntayo,
B.O., Dus, N., 2010. Oral treatment of Eimeria tenella-infected broilers using aqueous extract of wild
mushroom (Ganoderma sp): Effect on haematological parameters and histopathology lesions. African
Journal of Biotechnology 9(52): 8923-8927.
Ooi, V.E., Liu, F., 2000. Immunomodulation and
anti-cancer activity of polysaccharide-protein complexes. Curr. Med. Chem. 7: 715-729.
Oscarsson, M., Andersson, R., Salomonsson, A.-C.
and Aman, P. 1996. Chemical composition of barley
samples focusing on dietary fibre components. J. Cereal Sci. 24: 161-170.
Park, J., Floch, M., 2007. Prebiotics, probiotics, and
dietary fiber in gastrointestinal disease. Gastroenterol.
Clin. Nutr. Am. 36: 47-63.
Peterson, D.M., Wesenberg, D.M., Burrup, D.E.,
1995. β-Glucan content and its relationship to agronomic characteristics in elite oat germplasm. Crop
Sci. 35:965-970.
Sliva, D., 2003. Ganoderma lucidum (Reishi) in
Cancer Treatment. Intergr. Cancer Ther. 2: 358- 364.
Wasser, S.P., Weis, A.L., 1999. Therapeutic effects of
substances occurring in higher Basidiomycetes mushrooms: a modern perspective. Crit. Rev. Immunol.
19:65-96.
WHO, 1987. Toxicological versus physiological
responses. In: Principles for the Safety Assessment
of Food Additives and Contaminants in Food. World
Health Organization
(WHO), International Programme on Chemical Safety
(IPCS); Geneva. Environmental Health Criteria, No. 70, p.
82. Wisker, E., Daniel, M., Feldheim, W., 1998. Fermentation of nonstarch polysaccharides in mixed diets and single fibre sources: comparative studies in human subjects
and in vitro. Br. J. Nutr. 80: 253-261.
Yan, J., Allendorf, D.J., Brandley, B., 2005. Yeast whole
glucan particle (WGP) beta-glucan in conjunction with
antitumour monoclonal antibodies to treat cancer. Expert. Opin. Biol. Ther. 5:691-702.
Zhang, M., Cheung, P.C.K., Zhang, L., Chiu C. Mand.,
Ooi, V.E.C., 2004. Carboxymethylated β-glucans from
mushroom sclerotium of pleurotus tuberregium as novel water-soluble antitumor agent. Carbohydr. Polym.
57:319-325.
Zhang, M., Cui, S. W., Cheung, P. C. K., Wang, Q., 2007.
Antitumor polysaccharides from mushrooms: a review
on their isolation, structural characteristics and antitumor
activity. Trends Food Sci. Technol. 18: 4-19.
Zhao, J., Cheung, P.C., 2011. Fermentation of13-glucans derived from different sources by bifidobacteria: evaluation of their bifidogenic effect. J. Agric. Food
Chem. 59: 5986-5692.
5. Apéndice I
Datos analiticos provenientes de cinco no-consecutivos lotes manufacturados de β-glucanos de hongos Especificaciones de β-glucanos de hongo (Super Beta Glucan Inc, 2011)