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Laboratorio de Química Biológica
“Estudio de diversos agentes en la reactivación de la enzima ALA-D
inhibida por plomo en gastrópodos de la especie Biomphalaria
glabrata”
Directora del proyecto: Dra. Noemí R. Verrengia Guerrero
Tutora: Lic. Natalia Piol
Lugar de Trabajo: Lab. Destino y Efectos de Contaminantes Químicos, Área de
Toxicología y Química Legal, Dpto. Química Biológica.
Estudiante: Carolina P. Risso
La enzima ácido δ-amino levulinicodehidrasa (ALA-D) es una enzima citosólica
que cataliza la condensación de dos moléculas de ácido δ-aminolevulinico (ALA) para
formar porfobilinógeno (PBG), participando en el camino de biosíntesis del grupo
hemo. El ALA-D es una enzima Zn- dependiente que resulta inhibida por plomo ya que
este metal desplaza al cinc del sitio activo. En consecuencia, esta enzima ha sido
reconocida como un útil parámetro biomarcador de exposición y de efecto a plomo,
tanto en humanos como en otras especies animales. Además, se ha demostrado que en
muestras humanas o de tejidos de peces, una vez que la enzima ha sido inhibida, su
actividad puede recuperarse mediante el empleo de diversos agentes reactivantes, tales
como Zn, ditiotreitol (DTT), o mezclas de ambos.
Diversas especies de invertebrados acuáticos pueden ser usadas como
organismos bioindicadores en ensayos de toxicidad tanto de agua como de sedimentos.
Sin embargo, la utilidad del ALA-D como parámetro biomarcador en organismos
acuáticos está limitada a aquellas especies de invertebrados que presenten al grupo
hemo como pigmento respiratorio, tal como en el caso ejemplares de Biomphalaria
glabrata).
B. glabrata es un gastrópodo pulmonado, de agua dulce, y entre su población
natural se pueden distinguir organismos pigmentados y no pigmentados. Ambos se
reconocen en la actualidad como útiles bioindicadores de la exposición a plomo por su
elevada sensibilidad frente a pequeñas concentraciones de este metal que son de
relevancia ambiental.
El objetivo de este trabajo consiste en investigar, mediante ensayos in vitro, la
capacidad de los diversos agentes en la reactivación del ALA-D en organismos de B.
glabrata que previamente han estado expuestos a plomo, mediante bioensayos agudos.
Para ello, los organismos serán expuestos a niveles que induzcan una inhibición
enzimática apreciable, cercana al valor que induce aproximadamente un 50% de
inhibición. Luego, se determinará la influencia de concentraciones variables de Zn,
DTT, o mezclas de ambos, en los niveles de actividad enzimática. Las determinaciones
de ALA-D se realizarán a en el tejido blando total de los gastrópodos.
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