Download UTILIDAD FUNDAMENTO DEL TEST

UTILIDAD
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Método UV para la determinación de Ácido LMálico en alimentos, bebidas y otros materiales.
100 determinaciones.
Se determinan los valores de Absorbancia (A1
y A2) tras la adición de la enzima, tanto para
los blancos como para las muestras, para
obtener la ∆AÁcido L-Málico
FUNDAMENTO DEL TEST
La concentración de Ácido L-Málico puede
calcularse como se indica en la siguiente
fórmula:
La cuantificación del Ácido L-Málico requiere de
dos reacciones enzimáticas:
El Ácido L-Málico se oxida cuantitativamente a
Oxalacetato por la acción de la L-Malato
Deshidrogenasa (L-MDH).
L-MDH
Ác. L-Málico + NAD+
Oxalacetato + NADH + H+
Para favorecer el equilibrio de esta reacción hacia
la formación de Oxalacetato, éste debe ir
eliminándose, mediante el acoplamiento de la
siguiente reacción:
Oxalacetato + L-Glutamato
FT: 30.K-LMAL
GOT
c = (V x MW x ∆AÁc.L-Málico) / (ε x d x v) [g/L]
V = volumen final (mL)
v = volumen de muestra (mL)
d = paso óptico (cm)
MW = Peso Molecular del Ácido L-Málico
(g/mol)
ε = coeficiente de extinción molar del NADPH
a 340nm = 6300 (l x mol-1x cm-1)
Determinación del Ácido L-Málico
Concentración = (2,34 x 134,09 x ∆AÁc L-Málico)
/ (6300 x 1 x 0.1) = 0,4980 x ∆AÁc L-Málico [g/l]
L-Aspartarto + 2-oxoglutarato
La cantidad de NADH formada en la primera
reacción es estequiométrica con la cantidad de
Ácido L-Málico. Este NADH se mide mediante
incremento de la absorbancia a 340nm.
Inmunología y Genética Aplicada, SA
C/ Hermanos García Noblejas 39
28037. MADRID
Tel.: 91-3680501
Fax: 91-4087598
www.ingenasa.es
Última revisión: 28/07/15
ESPECIFICIDAD, LINEALIDAD
LÍMITE DE DETECCIÓN
Y
El ensayo es específico para Ácido L-Málico. Los
ácidos D-Málico, L-Láctico, L-Aspártico y fumárico
no reaccionan.
El ensayo es lineal en el rango de 0,5 a 30 µg de
Ácido L-Málico por ensayo.
El Límite de Detección es de 0,25 mg/L, que
deriva de una diferencia de absorbancia de 0,010
con un volumen máximo de muestra de 2 mL.
EJEMPLOS DE APLICACIÓN
Vino, cerveza, zumos de fruta, refrescos,
caramelos, frutas y vegetales, pan, cosméticos,
productos farmacéuticos, y otros materiales (ej.
cultivos biológicos, muestras, etc.)
Componentes del Kit
Nombre
Contenido
Vial 1
Tampón a pH 10, más Lglutamato y azida de sodio como
conservante
Vial 2 (x2)
NAD+ más PVP
Vial 3
Glutamato-oxalacetato
transaminasa
2,5 mL
Vial 4
L-Malato Deshidrogenasa
2,5 mL
Vial 5
Solución estándar de Ácido LMálico (0,15 mg/mL)
12 mL
-
VALIDACIONES
El método basado en este principio ha sido
aceptado por AOAC, EEC, EN, NF, NEN, DIN,
GOST, OIV, IFU, AIJN y MEBAK
FT: 30.K-LMAL
Conservación
PRODUCTO DISTRIBUIDO POR INGENASA
IT-73840
IT-73780
9191.INGE
Ver etiquetado reactivos
PRODUCTO FABRICADO POR:
9175.ING2
Inmunología y Genética Aplicada, SA
C/ Hermanos García Noblejas 39
28037. MADRID
Tel.: 91-3680501
Fax: 91-4087598
www.ingenasa.es
Última revisión: 28/07/15
5 mL