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Desarrollo de líneas de frijol que combinan resistencia a los gorgojos y los virus BGYMV y BCMNV Abiezer González, James Beaver y Yulia Trukina Depto. de Cultivos y Ciencias Agro-ambientales Universidad de Puerto Rico, R.U.M. Introducción • El gorgojo común (Acanthoscelides obtectus Say) es una plaga agresiva en la pos cosecha de frijol (Phaseolus vulgaris L). • Según a Schoonhoven y Cardona (1986), los insectos en la semilla de frijol almacenado pueden causar pérdidas cuantitativas debido a la cantidad de las semillas comidos por los insectos, y pérdidas cualitativas que se deben a cadáveres, excrementos o insectos en el grano. Introducción • El gorgojo ataca la habichuela seca tanto en el campo, antes de la cosecha, como en los lugares de almacenamiento. • El uso de insecticidas es la práctica principal para controlar el gorgojo. • El desarrollo de líneas de frijol con resistencia a los gorgojos puede reducir el daño causado por esta plaga y disminuir el uso de plaguicidas durante el periodo de almacenaje del grano. Acanthoscelides obtectus Say gorgojo común de la habichuela) Fuente de la foto: www.padil.gov.au/viewPestDiagnosticImages.asp. Objectivo • Desarrollar líneas blancas y negras que combinan buenas características agronómicas, resistencia a los gorgojos y resistencia a los virus BCMV y BCMNV • Desarrollar una técnica sencilla y barata para evaluar líneas de habichuelas con resistencia a los gorgojos. BGYMV (Virus del mosaico dorado amarillo) BCMNV (Virus del mosaico común necrótico) Progenitores PR1012-29-3A • Seleccionada de una población desarrollada por Dr. Paul Kusolwa y Dr. James Myers – Universidad Estatal de Oregon • Una línea BC3F4:5 derivada del cruzamiento: ‘Rojo*3/SMARC 2///ICA Pijao*2/G40199’ • Una línea determinada con grano rojo arriñonado – Arcelina 2 – una proteina de la semilla derivada de habichuela silvestre – Un gen de nulo faseolina derivado de P. coccineus – Un gen de gen APA (lectina) de P. acutifolius Progenitores XRAV-40-4 • Una línea de Puerto Rico desarrollada en colaboración con IDIAF, NSS, UNL y Zamorano • Una línea derivada del cruzamiento: ‘DOR483/BelNeb RR-2//MUS83/DOR483///Raven’ • Una línea indeterminado con grano negro • Gen bgm y el QTL SW12 que confieren resistencia al virus BGYMV • Los genes I y bc-3 que confieren resistencia a los virus BCMV y BCMNV Desarrollo de las líneas Fecha Generación Actividad Oct. 2010 PR1012-29-3 x XRAV-40-4 Ene. 2011 F1 Jun. 2011 F2 • Cruzamiento realizado en el invernadero del RUM • Plantas F1 sembradadas en la Subestación de Isabela • Seleccion de plantas indiv. • Plantas F2 sembradadas en la Subestación de Isabela • Plantas individuales seleccionadas Desarrollo de las líneas Fecha Generación Oct. 2011 F3 Feb. 2012 F4 Actividad • Plantas F2:3 sembradas en la Subestación de Isabela • Plantas individuales seleccionadas • Plantas F3:4 sembradas en la Subestación de Isabela • Plantas individuales seleccionadas • Líneas F4:5 del ensayo evaluadas con marcadores moleculares en TARS y en el invernadero para resistencia al BCMNV. Marcador SCAR SW13 para el gen I Marcador SCAR SR2 para el gen bgm Marcador SCAR SW12 - QTL para resistencia al BGYMV Inoculación mecánica con BCNMV (sepa NL-3) • Potassium Phosphate Buffer 0.01M K2PO4 with a pH of 7.0. • Grind 1g of plant tissue with BCNM symptoms in 5 ml of cold buffer. • Filter with gauze and maintain cold. • Inoculate the primary leaf at 7 days after planting using a Q-tip and carborundum. • Maintain at low light intensity the first 24 h after inoculation. • Symptoms appear in 10-12 days. Morales and Niessen (1988) Plant Dis. 72:1020-1023 Desarrollo de las líneas Fecha Jun. 2012 Oct. 2012 Generación F5 F6 Actividad • Plantas F4:5 sembradas en la Subestación de Isabela • Plantas individuales seleccionadas • Lineas evaluadas en el laboratorio para resistencia a los gorgojos • Plantas F5:6 sembradas en la Subestación de Isabela • Plantas individuales seleccionadas Evaluación de los gorgojos Susceptible Resistente Desarrollo de las líneas Fecha Ene. 2013 Jun. 2013 Sep. 2013 Generación F7 F8 Actividad • Plantas F5:6 sembradas en la Subestación de Isabela • Plantas individuales seleccionadas • Plantas F5:6 sembradas en la Subestación de Isabela • Cosecha masal • Lineas evaluadas en el laboratorio para resistencia a los gorgojos. DCA -2 rep. Evaluación para resistencia a los gorgojos Línea Días después de la infestación1 38 45 63 PR 1336-74 1.0 (0/10) 1.0 (0/10) 1.0 (0/10) PR 1336-75 1.0 (0/10) 1.0 (0/10) 1.0 (0/10) AO 1012-29-3-3A 1.0 (0/10) 1.0 (0/10) 2.0 (1/10) RAZ 50 (Arc-1) 5.0 (7.0/10) 4.5 (7.0/10) RAZ 75 (Arc-1) Verano 4.5 (5.0/10) 4.5 (7.0/10) 3.6 (4.6/10) Badillo 1 4.2 (5.6/10) Evaluada en una escala de 1-5 donde 1 = la ausencia de síntomas y 5 = daño severo. (número de semilla dañana/número de semilla total.). Planes para el futuro • Incrementar semilla para evaluaciones en el campo en Puerto Rico, Haiti y Honduras – Confirmar la resistencia con diferentes ecotipos de A. obtectus y otras especies de gorgojos (Z. subfasciatus). – Confirmar la resistencia al BGYMV y BCMNV – Evaluar el potencial de rendimiento y adaptación • Realizar otro ciclo de cruzamiento y selección. Estudio de infestación natural !Gracias por su atencion!