Download Publicada en: HOMEOPATÍA DE MÉXICO

Publicada en: HOMEOPATÍA DE MÉXICO
Vol. 74; No. 638. Septiembre-octubre 2005. Editorial Propulsora de Homeopatía.
EFECTO BACTERICIDA DE LAS TINTURAS; CALENDULA OFF. Y
ECHINACEA ANGUSTIFOLIA EN EL STREPTOCOCCUS MUTANS.
M. en C. Marisol Pezet Valdez, C.D. María Ernestina Moctezuma Lechuga,
M. en C. Jessica García Vivas, M. en C. José Tomás Hernández Méndez.
RESUMEN
Como sabemos, la placa dentobacteriana (PDB) contiene diversos microorganismos que son
factores predisponentes de diversas patologías bucales como la enfermedad periodontal y la
caries, esta última relacionada con el aumento principalmente de uno de los tres estreptococos
considerados como cariogénicos; Streptococcus mutans. Actualmente a la caries se le
considerada como una desmineralización ácida, de los tejidos del diente, de origen bacteriano.
La terapéutica homeopática en odontología hasta el día de hoy es terreno fértil en investigación
ya que existen pocas y de estas encontramos algunas que son aplicadas en bacterias. Con
respecto a la terapéutica homeopática existen diversas tinturas que inhiben algunos
microorganismos, de entre ellos se eligió a Echinacea angustifolia y Caléndula officinalis debido
a que sus principios activos tienen propiedades bactericidas que se han demostrado en
estudios preliminares con otros microorganismos.
El objetivo de este proyecto es evaluar el efecto de las tinturas madres Calendula officinallis y
Echinacea angustifolia, para que inhiban el desarrollo del Streptococcus mutans.
La investigación es prospectiva, experimental, comparativa y longitudinal. Se estudia “in vitro”
la cepa de Streptococcus mutans G536, obtenida en medios de cultivo como son: Gelosa
Sangre (GS), KF con TTC al 1% con tinturas y diluciones homeopáticas a 1:1; 1:3, 1:6; A los
medios de cultivo se les agregó la tintura madre sustituyendo el agua en forma proporcional. El
medio de cultivo con Caléndula officinalis mostró un mayor efecto inhibitorio que el medio de
cultivo con Echinacea angustifolia, sin embargo, ambas presentaron mayor inhibición en las
diluciones 1/1 y 1/3 como se ha reportado en investigaciones anteriores con Streptococcus de
la Placa Dentobacteriana y tinturas homeopáticas.
INTRODUCCIÓN.
La caries es una enfermedad infecciosa causada por las bacterias cariogénicas
de la placa dental, que causan destrucción de los tejidos hasta la pérdida
dentaria. Estas bacterias necesitan de los glúcidos para sus necesidades
metabólicas que promueven un medio adecuado para su patogenisidad y su
proliferación, ya que sus desechos metabólicos son ácidos. Para que se dé la
acidogénesis de la placa dental, considerado mecanismo etiopatogénico de la
caries, se necesitan estos dos factores: los glúcidos fermentables y las
bacterias cariogénicas.
La curva de Stephan ilustra la acidogénesis de la placa dental, en donde
describió, durante los años cuarenta, los cambios de pH que se producían en la
superficie de los dientes tras la ingesta de glúcidos. El análisis en ayunas
muestra normalmente un pH casi neutro, con predominio de acetato y
cantidades menores de formiato, propionato y butirato. Después de ingerir
hidratos de carbono, el pH es ácido y el lactato alcanza su máximo
aproximadamente a los 15 minutos, pero a los 45 minutos, retornan las
condiciones iniciales, con descenso del lactato y subida del pH. Las curvas de
Stephan, que expresan el registro del pH mediante electrodos colocados en la
placa, también se utilizan para valorar el potencial cariógeno de los alimentos.
La sacarosa, se considera cariogénica, ya que baja el pH hasta 4 provocando
un medio apropiado por la proliferación de los agentes bacterianos. Este pH
ácido ataca la hidroxiapatita del esmalte, que libera calcio y produce especies
más solubles como el fosfato monocálcico. El cristal del esmalte va siendo más
desordenado, formándose zonas de cavitación que las bacterias colonizan.
Este
proceso
al
mantenerse
constante
desemboca
en
caries.
Según lo anterior, existe una clara relación entre el metabolismo de la placa y
la dieta para que se produzca la caries, pero Keyes agregó que también es
importante el terreno para la aparición de esta patología.
Por medio de estos estudios, se ha permitido definir un pH crítico, es decir,
aquel por debajo del cual se produce una desmineralización del esmalte; se
sitúa entre 5.3 y 5.7. Los aportes de carbohidratos frecuentes a la cavidad oral
determinan la repetición
de períodos de acidez prolongada, a la que no
pueden sobrevivir numerosas bacterias, sin embargo ésta acidez son
favorables al crecimiento de otras bacterias (bacterias acidúricas, como los
estreptococos del grupo mutans y los lactobacilos) que progresivamente se van
a convertir en los elementos predominantes de la placa. La presencia de estas
condiciones representa un alto riesgo cariogénico, por lo que actualmente es
tan importante el recuento del estreptococo mutans y así poder determinar y
prevenir si una persona es o no susceptible a la caries dental.
Si el efecto buffer del medio ambiente, sobre todo de la saliva, no es capaz de
moderar la caída del pH local debajo del pH crítico, el fosfato y el calcio del
esmalte superficial se disuelve: se desmineraliza el esmalte. La saliva es el
factor
protector
mas
importante
para
mantener
el
equilibrio
entre
desminealización-remineralización ya que contiene calcio y fosfatos así como
elementos de inmunidad; inmunoglobulinas, sustancias bacteriostáticas y
bactericidas. Para mantener el equilibrio también llegan a participar algunas
bacterias de la placa, ya que tienen un metabolismo alcalino. Sin embargo, si
este equilibrio se rompe a favor de la desmineralización, hay pérdida de
sustancia y aparece la caries y se puede producir por tres formas; Por una
parte, la producción de ácido, tras un aporte importante o prolongado de
glúcidos que excede la capacidad de los mecanismos homeostáticos de la
saliva. Por otra parte, la saliva tal vez no ejerza su papel protector por existir
alguna patología general o por algunas terapéuticas como la radiación en
algunos cánceres. O también la formación de ácidos puede repetirse a
intervalos tan próximos que los mecanismos de remineralización no pueden ser
eficaces. Este es el caso más frecuente dentro de la población; la alta ingesta
de azúcares refinados o de alimentos ricos en azúcar, en forma repetida.
Antes de introducirse los azucares refinados dentro de nuestra dieta, sobre
todo occidental, el estreptococo mutans competía junto con todos los demás
microorganismos de la placa para obtener su aporte energético, aunque la
caries dental existía, se presentaba únicamente en adultos y la unión esmaltecemento. La introducción de la sacarosa en frecuencias repetidas en el
régimen alimentario del hombre da ventajas al estreptococo mutans en la
competencia de los elementos nutritivos, a la vez que lo convierte en una
especie predominante entre las especies de fermentación láctica de la cavidad
oral. Hoy entendemos mejor por que las lesiones cariosas del hombre
moderno, caracterizadas por la asociación S. mutans-sacarosa, difieren en
cuanto a frecuencia, gravedad y localización con nuestros antepasados. La
incidencia de la caries en el hombre moderno ha aumentado de forma
considerable y es proporcional a frecuencia de ingestión de productos
azucarados. La caries del hombre moderno se localiza principalmente en los
sitios de colonización del S. mutans; fosas y surcos de las fosas de molares y
en las caras interproximales. Sin embargo, esto no quiere decir que la sacarosa
sea la única responsable, también otros azucares favorecen la producción de la
caries. Esto no quiere decir tampoco que S. mutans sea la única bacteria
causal en la etiología de la caries, otras bacterias tienen también poder
cariogénico, pero es considerada la bacteria cariogénica por excelencia.
Existen propiedades importantes del S. mutans que explican su poder
cariogénico; su habitat natural es la superficie dental. S. mutans saca de la
sacarosa la energía necesaria para su crecimiento y proliferación. Transforma
la sacarosa para producir polisacáridos extracelulares insolubles, sustancias
adhesivas que ayudan a aglutinar las bacterias y a mantenerse en la superficie
dental. Transforma la sacarosa para producir, en el mismo terreno, grandes
cantidades de ácidos orgánicos (capacidad acidogénica). Acumula, en período
de abundancia, reservas glucídicas intracelulares de tipo glucógeno, que
fermenta en período de escasez, prolongando la producción de ácidos
orgánicos en la misma medida y es capaz de sobrevivir en el medio creado,
extraordinariamente ácido, en el que la mayoría de las demás bacterias no
resisten (capacidad acidúrica).
A lo largo de los últimos años, múltiples trabajos de investigación han
establecido de forma clara la relación entre S. mutans y caries. Estos datos
pueden resumirse como sigue:
Experimentalmente; el S. mutans provoca caries en animales como hamster,
rata y mono.
Se ha establecido una correlación positiva entre la presencia de S. mutans,
tanto en la saliva como en la placa, y la incidencia de caries.
La infección de una superficie dental por S. mutans generalemente precede a
la caries.
En un individuo con un alto índice carioso, las superficies infectadas por S.
mutans son más numerosas que en una persona con poca caries.
La inmunización de los animales de laboratorio contra S. mutans reduce la
incidencia de la caries.
Los
tratamientos
antimicrobianos
dirigidos
contra
S.
mutans
reduce
considerablemente la incidencia de caries.
Estos conocimientos nos permiten identificar a los individuos con riesgo tanto
en la prevención como la erradicación, con instrumentos que se utilizan
actualmente para el conteo y localización del S. mutans de muestras de saliva.
Ya localizada las zonas altamente infectadas por S. mutans generalmente se
correlacionan con unas manchas blanquecinas, que no es otra cosa que la
desmineralización del esmalte, el cual al avanzar se convierte en lesión cariosa
y si esta persiste y avanza, pueden presentarse: Necrosis pulpar, Absceso
periapical, Granuloma, Quistes, Fístula Crónica, Osteomielitis y completa
destrucción ó pérdida del diente y de sus funciones.
Pero aquí surge una gran interrogante ¿habiendo identificado el causante
principal de la caries dental y se han determinado tratamientos que erradiquen
esta bacteria, porque no lo usan para disminuir la incidencia de la caries dental
en el hombre?
La respuesta podría parecer simple y no. Esta bacteria tiene como habitat
natural la boca, además tendríamos que utilizar constantemente terapéuticas
antibióticas, lo que a la larga perjudicarían otras partes de nuestro organismo.
Pero no debemos olvidar el concepto multifactorial para definir a la caries
dental. El S. mutans se ha manifestado como la principal bacteria etiológica de
la caries, pero no es el único y además existen otros muchos factores dentro de
la homeostasis de la boca que permite un desequilibrio tanto en la superficie
del esmalte como en la saliva y sus elementos que la conforman como
protectores.
Después de todo lo expuesto con anterioridad, no hay duda de que
Streptococus mutans es uno de los máximos responsables. En el 70 % de los
casos, esta bacteria representa más del 10 % del total de la flora oral, mientras
que en el 70 % de las dentaduras sanas, la bacteria está ausente. Por tanto la
inhibición de los microorganismos de la placa va dirigida especialmente contra
esta bacteria. En dentífricos y colutorios utilizan soluciones compuestas de
glucosa, fluoruro y decanoato potásico, que han resultado bastante efectivas a
mediano y largo plazo pero con efectos secundarios. La glucosa actúa como
sustrato bacteriano y cuando el pH de la placa baja, el fluoruro y el decanoato
unen protones, pasan al citosol bacteriano y los liberan en el interior donde el
pH es mayor, contribuyendo a reducir su valor e inhibir el transporte mediado
por la fuerza protonmotriz de la glucosa. El ataque es preferente contra
Streptococus mutans que es muy dependiente de este tipo de transporte para
su metabolismo.
Actualmente el elemento más importante en la lucha contra la caries es el flúor,
esencial para la formación de apatita remineralizada, sin embargo, como se ha
mencionado su efecto es de largo plazo por lo que, ante esta problemática de
salud en nuestra sociedad se requieren buscar tratamientos alternativos que
sin dejar de ser económicos para la población resulten de efecto más
inmediato. Una vía para alcanzar este objetivo es el uso de la Homeopatía, que
recientemente ha sido de enorme beneficio para la humanidad, en especial en
el campo de la salud.
Dentro de la Terapéutica Homeopática existen alcoholaturas o extractos de
plantas, llamadas tinturas madres, capaces de crear inhibición en algunos
microorganismos de la placa. En investigaciones anteriores se ha demostrado
que algunas tinturas madres como Caléndula officinalis y Echinácea
angustifolia tienen importantes efectos inhibitorios sobre streptococcus mitis,. .
Calendula off es una planta de la familia de las compuestas y sus principios
activos mas importantes son flavonoides y aceites esenciales. La Echinácea
angustifolia es una planta también de la familia de las compuestas, dentro de
sus principales principios activos son polisacáridos, ácido caféico, alquilamidas
Isobutilamidas, poliacetilenos, y glucósidos.
En este trabajo esperamos reportar el efecto de las tinturas calendula officinalis
y Echinacia angusifolia, sobre el Streptococus mutans con la finalidad de
contribuir con nuevas alternativas en el combate de tan importante problema de
salud
pública
en
México,
como
lo
es
la
caries
dental.
MATERIALES Y METODOS
1.- Preparación del inóculo: Inocular en un tubo con CMH una asada de la
cepa. Incubar a 37°C hasta que alcance la turbiedad equivalente al tubo 0.5 del
nefelómetro de McFarland.
2.- Aplicación de tres distintas diluciones (1/1, 1/3 y 1/6) de las tinturas o
alcoholaturas a los cultivos de streptococcus mutans.
3.- Siembra del inóculo: Se Introdujo un hisopo estéril en el tubo con la cepa
estandarizada, se exprimió el hisopo presionando en las paredes del tubo y se
sembró masivamente en GS y MGScMH para posteriormente dejar secar. En la
caja de GS, se sembró Streptococcus mutans y se observó si esta presentaba
crecimiento bacteriano a las 24, 48 y 72 hrs; posteriormente se tomó de la caja
de GS y realizó resiembra del mismo para verificar el aislamiento puro del
agente patógeno. Después de haber verificado que la cepa indicada se
procedió a hacer lo siguiente: a las cajas de GS se le impregnaron
los
medicamentos homeopáticos correspondientes y el testigo el cual fué alcohol
del 90, se dejó secar a temperatura ambiente y a las 24 hrs se inoculó el
agente a cada uno de los medios con medicamento homeopático,
cabe
mencionar, que las impregnaciones se realizaron con cada medicamento y con
el control, así como
con su dilución correspondiente 1:1, 1:3, 1:6. con un
número para identificar que medicamento es.
RESULTADOS
Los resultados que reflejan el efecto inhibitorio de las tinturas madre Tintura
Caléndula off. y Echinacea a. sobre Streptococcus mutans se presentan en la
siguiente tabla
Tabla 1. Efecto inhibitorio de las tinturas madre sobre Streptococcus mutans
con la técnica de impregnación
Dilución de las tinturas madre
Tinturas madre
Dilución 1:1
Dilución 1:3
Dilución 1:6
Caléndula off.
Crecimiento +
Crecimiento +
Crecimiento ++
Crecimiento ++
Crecimiento ++
Crecimiento +++
C/D
C/D
C/D
Echinacea a.
Control positivo
Alcohol de 90°
+ (Menor crecimiento), ++ (Moderado crecimiento), +++ (Mayor crecimiento)
y C/D (Con desarrollo).
ANALISIS
El uso que se le ha dado a Calendula offcinalis como medicamento es debido
a que este actúa como un antiséptico homeopático, obteniendo una mejor
cicatrización del tejido dañado.
Así en el caso de Echinacea angustifolia donde el mayor uso terapéutico de
esta es
en forma oral que actúa a nivel sanguíneo, en septicemia con
supuración y septicopiemia. De igual manera a nivel orofaringe y cavidad bucal.
Para que un estudio etnobotánico - farmacológico “in vitro” sea eficaz debe
iniciar desde el potencial antibacteriano y antimicótico de los principios puros
de las plantas (principios activos) o con los extractos crudos (tinturas). En
ambos se utiliza una prueba para determinar la susceptibilidad antimicrobiana
en las pruebas de dilución y en discos o en difusión en agar. En la actualidad
en odontología no se han realizado suficientes estudios “in vitro” sobre
Calendula officinalis y Echinacea angustifolia contra microorganismos de la
placa dentobacteriana.
La actividad antimicrobiana “in vitro” de Calendula officinalis y Echinacea
angustifolia no se ha investigado en forma amplia. Por lo tanto se decidió
evaluar su actividad antimicrobiana “in vitro”, no se realizó de forma
comparativa con antibióticos porque se desconoce la molécula responsable del
fenómeno de la formación del halo, por lo que no se puede saber la
concentración de dicha molécula, por lo que no se puede establecer una
concentración mínima inhibitoria (MIC), ni la potencia de dicha molécula.
Comparando la actividad antimicrobiana de las tinturas ya mencionadas; en
este estudio Echincea angustifolia, mostró una inhibición moderada en las
diluciones 1:1 y 1:3 mientras que en la dilución 1: 6 mostró crecimiento alto. En
el caso de la tintura de Calendula officinalis esta nos mostró mayor inhibición
en el crecimiento del agente patógeno en comparación de Echincea
angustifolia ya que en la dilución 1:1 y 1:3 presentó un crecimiento bajo y
moderado en la dilución 1:6.
En este trabajo se concluye que aunque ambas tinturas presentan efecto
inhibitorio en el crecimiento de streptococcus mutans la acción del
medicamento de Calendula off. presentó mayor eficiencia, que Echinacea
angustifolia. Además en concordancia a lo reportado en investigaciones
anteriores con Streptococcus, se obtuvo mayor inhibición en las diluciones 1:1
y 1:3.
No se descarta, aun la posibilidad de
obtener cambios en el patrón de
inhibición de ambos medicamentos al utilizar sensodiscos sin alcohol, con lo
cual corroboraríamos si efectivamente el halo de inhibición en las cepas del
Streptococcus mutans es mas favorable con Calendula officinalis que con
Echinacea angustifolia.
REFERENCIAS
1
Burton Rosan, Richard J. Lamont. Dental plaque formation. [Review]. Microbes and Infection.
2000; 2: 1599-1607.
2
Gendron Renée, Grenier Daniel, Maheu Robert Léo Francois. The oral cavity as reservoir of
bacterial pathogens for focal infections[Review]. Microbes and Infection. 2000; 2: 897-906.
3
Li Xiaojing, Kolltveit Kristin M, Tronstad Leif, Olsen Ingar. Systemic diseases caused by oral
infection. Clinical Microbiology Reviews. 2000, Oct; 13(4): 547-558.
4
Rutkauskas John S. Preface. In: Infectious Disease Clinics of North America. December 1999;
13(4): XI-X11.
5
Mouton Christian, Robert Jean Claude. Bacteriología bucodental. Traducido del Francés por:
Pie Juste María. Primera edición. Barcelona, España. Editorial Masson, S.A.1995; 183 páginas con
láminas e ilustraciones.
6
Koo Jun, Vacca Smith Anne M, Bowen William HJ, Rosalen Pedro L, Cury Jaime A, Park Yong K.
Effects of apis mellifera propolis on the activities of streptococcal glucosyltransferases in
solution and adsorbed onto saliva coated hydroxyapatite. Caries Research. 200; 13: 418-426.
7
Ono Tsuneko, Shiota Sumiko, Hirota Katsuhiko, Nemoto Ken, Tsuchiya Tomofusa, Miyake
Yoichiro. Susceptibilities of oral and nasal isolates of Streptococcus mitis and Streptococcus
oralis to macrolides and PCR detection of resistance genes. Antimicrobial Agents and
Chemotherapy. 2000; 44(4): 1078-1080.
8
Homer K.A. G. Roberts, Byers HL, Tarelli E, Whiley RA, Philpott Howard J, Beighton D.
Mannosidase production by viridans group streptococci. Journal of Clinical Microbiology. Mar
2001; 39(3): 995-1001.
9
Fontana Margherita, Buller Tiffany L, Dunipace Ann J, Stookey Gereorge, Gregoru Richard L. An
in vitro microbial caries model used to study the efficacy of antibodies to Streptococcus
mutans surface proteins in preventing dental caries. Clinical and Diagnostic Laboratory
Immunology. Jan 2000; 7(1): 49-54.
10
Schuster George S. Oral flora and pathogenic organisms. Infectious Disease Clinics of North
America. 1999; 13(4): 757-774.
11
Leon Vannier. Compendio de material medica homeopatica. 2004, Mexico; 115-116 y 209-21012
Lauk L, Lo Bue AM, Milazzo I, Rapisarda A, Blandino G. Antibacterial activity of medicinal
plants extracts against periodontophatic bacteria. Phytother Res. 2003 Jun; 17(6): 599-604.
13
Schmidt TJ, Brun R, Willuhn G, Klaid SA. Anti-trypanosomal activity of helanin and some
structurally related sesquiterpene lactones. Planta Med. 2002 Aug; 68(8):750-1.
14
Koo H, Gomes BP, Rosalen PL, Ambrosano GM, Park YK, Cury JA. “in vitro” antimicrobial
activity of propolis and Árnica montana against oral pathogens. Arch Oral Biol 2000 Feb;
45:141-8.
15
Alonso D, Lazarus MC, Baumann L. Effects of topical arnica gel on post laser treatment
bruises. Dermatol Surg. 2002 Aug; 28(8): 686-8.
16
Cowan Marjorie Murphy. Plant products as antimicrobial agents. Clinical Microbiology
Reviews. 1999; 12(4): 564-582.