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Rocío Aguilar Suárez Departamento de Genética Molecular, Universidad de Groningen, Los Países Bajos. Prof. Dr. Oscar Kuipers, Dr. Manuel Montalbán López Maestría en Biología molecular y biotecnología [email protected] Palabras clave: lantibióticos, péptidos, lactocuccus lactis PRODUCCIÓN DE LANTIBIÓTICOS EN FORMA MODULAR ESTANDARIZADA Problemática: La rápida y creciente aparición de resistencia a los antimicrobianos así como de bacterias multirresistentes representa una amenaza para la seguridad sanitaria así como para la economía y desarrollo de las sociedades. Importancia: Los lantibióticos son péptidos que han sido sintetizados ribosomalmente y modificados postraduccionalmente. Estos péptidos tienen actividad antimicrobiana principalmente contra bacterias Gram positivas incluyendo cepas multirresistentes de Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, Clostridium y algunos patógenos Gram-negativos como Neisseria y Helicobacter. El objetivo de este proyecto es producir un vector transferible entre Escherichia coli para ingeniería genética y desarrollo de librerías de estos péptidos y Lactococcus lactis para la producción de lantibióticos. Metodología: El lantibiótico más importante es nisina. Este péptido es producido a partir de la modificación de un precursor por un conjunto de enzimas que poseen una amplia especificidad de sustrato. Esta maquinaria de enzimas es utilizada para la modificación y obtención de nuevos lantibióticos. Para la producción del precursor, dos diseños de plataformas de vectores fueron probados, el primero se basó en la Standard European Vector Architecture (SEVA) usando diferentes módulos de resistencia a antibióticos y orígenes de replicación. El segundo diseño se basó en el vector pNZ8048 usando un esquema modular similar al de SEVA. Hipótesis: El uso de una plataforma modular en E. coli para la ingeniería genética de nuevos lantibióticos puede ser transferible y funcional en L. lactis para la producción de lantibióticos, si se utilizan modulos que favorezcan a ambas especies. El diseño de una plataforma modular trasferible entre E. coli y L. lactis no afectará los niveles de producción de lantibióticos usando prenisina como control. Resultados y conclusiones: El diseño basado en pNZ8048 para la construcción de la plataforma modular permitió la obtención de una familia de vectores donde la introducción de dobles terminadores y dos casetes de resistencia a antibióticos no muestran afectar significativamente los niveles de producción de prenisina. Estos vectores facilitaran la búsqueda y selección de lantibióticos acelerando el proceso para el descubrimiento de nuevos candidatos a fármacos ayudando a combatir el problema de resistencia a antibióticos y a los patógenos multirresistentes. Además, estos vectores pueden ser usados y extendidos para otros propósitos.
