Download leucosis bovina enzoótica

LEUCOSIS BOVINA
ENZOÓTICA
Dr. Raúl Casas Olascoaga
Asociación Nacional de Productores de Leche
15 de julio de 2014 – 10:30 hs
La Leucosis Bovina Enzoótica (LEB) es
una enfermedad contagiosa del vacuno
causada por un retrovirus denominado
Virus de la Leucosis bovina.
Clasificación del Virus de la Leucosis
(Leucemia) del Bovino
•
•
•
•
•
Grupo: Grupo IV (ssRNA-RT)
Familia: Retroviridae
Subfamilia: Orthoretrovirinae
Género: Deltaretrovirus
Especies: Bovine leukemia virus
• El hospedero natural del VLB causante de la LEB es el
vacuno (Bos taurus y Bos indicus).
• El vacuno puede infectarse a cualquier edad
incluyendo el estado embrionario.
• La mayoría de las infecciones son sub-clínicas pero
una proporción de alrededor 30 % a 70% de los
vacunos mayores de tres años de edad que se
infectan desarrolla linfocitosis permanente y una
proporción bastante menor de 0.1-10% desarrolla
linfosarcomas (tumores) de magnitud y evolución
variable en los órganos internos.
• Los signos clínicos dependen de los órganos afectados.
• A medida que aumenta la edad del animal afectado
hay mayor probabilidad de desarrollo de los tumores.
• Los bovinos con linfosarcomas mueren súbitamente o
luego de presentar signos clínicos durante semanas o
meses con continuo deterioro físico y productivo.
• Si bien varias especies pueden ser infectadas por
inoculación experimental del virus, la infección natural
solamente ocurre en el vacuno y raramente ha sido
demostrada en el búfalo de agua, en capibaras
(carpinchos) y en ovinos.
• Las ovejas son muy susceptibles en la inoculación
experimental y desarrollan tumores a menor edad que
los vacunos.
• Persistente respuesta de anticuerpos ha sido
detectada después de la infección experimental en
ciervos, cobayos, gatos, perros, ovinos, monos,
chimpancés, antílopes, porcinos, caprinos y búfalos.
• Como ocurre con la infección con otros retrovirus, los
animales infectados permanecen portadores por vida.
En los animales infectados tanto en los animales
asintomáticos como los que padecen la enfermedad
clínica el VLB permanece integrado en los linfocitos
durante toda la vida del animal.
• La LEB causa graves complicaciones para la salud y el
bienestar animal y determina pérdidas económicas
sustantivas debido a su persistencia durante toda la
vida del animal, además de su influencia negativa en el
comercio doméstico e internacional.
• La transmisión natural depende de la transferencia de
células infectadas, por ejemplo, durante el desarrollo
intrauterino del embrión, en el parto, por contacto
estrecho, y por vía del calostro o la leche contaminados
con el VLB.
• La transmisión artificial ocurre con frecuencia
especialmente por jeringas y agujas contaminadas,
equipo quirúrgico y guantes contaminados que se
usan, por ejemplo, en el examen rectal.
• En las áreas con alta prevalencia de LEB, las moscas
picadoras que succionan sangre pueden tener cierto
papel en la transmisión del VLB. En la Inseminación
artificial la transmisión por vía del semen y la
transferencia de embriones se considera de bajo
riesgo cuando hay un control de calidad
microbiológico calificado y se aplican en la
manipulación medidas de bioseguridad eficientes.
• Los terneros nacidos de madres infectadas durante la
lactación pueden ser temporalmente
serológicamente positivos debido a la ingestión de
calostro con anticuerpos específicos maternos.
• Debido a que las propiedades oncogénicas
(cancerígenas) del virus fueron reconocidas de
inmediato a su descubrimiento se despertó una
investigación en la búsqueda de su patogenicidad
para los seres humanos. Así, los estudios fueron
hechos mayormente en los trabajadores de las
granjas de lechería que consumían leche cruda para
ver si eran susceptibles a la leucemia o leucosis
causada por el VLB.
• Varios estudios han sido realizados para investigar si
el VLB causa enfermedad en los humanos,
especialmente, aquellos que consumen leche cruda
de vacas infectadas.
• También, se ha estudiado si hay una correlación con
el cáncer que puede presentarse en los carniceros y
en trabajadores de la faena del ganado vacuno.
• Sin embargo, hasta ahora, no hay evidencias de la
transmisión del VLB y en general, se considera que
no es un riesgo paras los humanos. Nunca ha habido
ninguna evidencia de transmisión del VLB a los
humanos por ninguna ruta. El Comité Asesor para
Patógenos Peligrosos (Advisory Committee for
Dangerous Pathogens) nunca ha incluido al VLB
como agente capaz de infectar a los humanos.
• El retrovirus de la LBE está relacionado con los virus
T-Linfotrópico humano tipo 1HTLV-1 y 2.
• El Virus RNA de la Leucosis del Bovino (VLB) se integra en el
Acido Desoxiribonucleico (ADN) de los Linfocitos,
mayormente de tipo B, como un Acido Dexocinucleico (ADN)
intermedio denominado provirus. En el animal infectado
cierta proporción de los linfocitos es portador del Virus.
• El VLB para la producción del virion, además de los genes
estructurales y enzimáticos, contiene un oncógeno para
codificar la denominada proteína TAX y expresar las micro
ARN (Acido Ribo Nucleico) cuyas funciones en la acción de
este virus aún se desconocen.
• En su huésped natural (el vacuno) la enfermedad representa
un porcentaje bajo, alrededor de 5% de los animales
infectados, pero la linfo-proliferación es bastante frecuente
con un 30 % de animales infectados.
• La información disponible en Uruguay demuestra una
prevalencia alta en las cuencas lecheras que alcanza al 70%
con una alta prevalencia de animales asíntomáticos.
Características Clínicas y diagnóstico de la LBE.
•
•
•
•
•
•
•
•
•
Pérdida de apetito (anorexia) y pérdida de peso
Disminución en la producción de leche
Debilidad
Fiebre
Anormalidad en la respiración
Protuberancia en la órbita ocular
Diarrea
Constipación
Ganglios linfáticos aumentados de volumen (adenitis) que
puede observarse y palparse en los ganglios periféricos o
superficiales.
Características Clínicas y diagnóstico de la LBE.
• Desarrollo de tumores en diferentes órganos internos de
magnitud variable;
• Causando tumores y trastornos, por ejemplo, digestivos
(estómago, masa intestinal), pulmones, corazón , bazo,
riñones o en los órganos de la reproducción (útero).
• Lesiones de la piel.
• Parálisis parcial del tren posterior del animal enfermo.
• Signos de alteraciones neurológicas.
• El animal con sintomatología clínica manifiesta rápidamente
pierde peso y puede morir súbitamente o luego de una
evolución prolongada de la enfermedad.
Detección e identificación del VLB
• El VLB puede ser detectado en el cultivo in vitro de células
mono nucleares periféricas de la sangre (Linfocitos B) de
animales infectados.
• Por identificación del antígeno del VLB mediante la Reacción
en cadena de la Polimerasa, importante enzima no estructural
del virus que en la prueba se replica.
• Por observación directa del VLB en microscopio electrónico.
• El VLB provirus (ADN) puede ser identificado en las células
mononucleares periféricas o en los tejidos y tumores de
animales infectados.
Algunos usos de la prueba de PCR
• Diagnóstico en muestras de especímenes de:
• Terneros jóvenes alimentados con calostro;
• Tumores para diferenciar linfomas infecciosos de los
esporádicos;
• Animales sospechosos de infecciones recientes antes de
desarrollar anticuerpos;
• Confirmar resultados dudosos obtenidos con la prueba
ELISA;
• Muestreo sistemático para demostrar que los animales
jóvenes están libres de VLB
Pruebas de diagnóstico serológico
El diagnóstico se basa usualmente en la detección de
anticuerpos específicos generados por el organismo animal
contra la infección del VLB.
• Los métodos de detección de anticuerpos usados son:
Agar Gel Inmuno-Difusión (AGID).
Ensayo de ELISA (“Enzyme Linked-Immuno-Sorbent Assay).
• Especímenes o muestras recolectadas para diagnóstico son:
Muestras de sangre, suero, leche, tejidos del animal
investigado.
Muestras de leche a granel en tanque para analizar el rodeo
lechero de cada tambo o granja.
• Son pruebas sencillas y bastante rápidas pero que requieren
cuidadosa y exigente calidad en su ejecución y en los
reactivos utilizados.
Identificación del agente. Diagnóstico.
Detección del virus.
• En el año 2013, el Br. Gonzalo Rama expuso su tesis titulada
“ Desarrollo y análisis comparativo de una nueva herramienta
para el diagnóstico de la Leucosis Bovina Enzoótica ; impacto
del descenso de Anticuerpos anti-VLB circulantes en el periparto para el diagnóstico serológico” en la demostró un 18% y
27 % más positivos con el método de PCR que con ELISA e
IDGA respectivamente y con una especificidad de 94% y
sensibilidad de 88%.
• Fueron utilizadas vacas Holando (N=15) preñada , dos meses
antes del parto .
Identificación del agente. Diagnóstico.
Detección del virus.
• El autor concluye que la inmunodepresión causada por la
preñez afecta los títulos de anticuerpos anti-VLB desde el día
-20 al +50 con una reducción de entre 40% y 60% con
relación a los títulos registrados en el inicio del estudio.
• Por tanto, no se debe extraer la muestra de sangre en este
periodo de la preñez para realizar el diagnóstico serológico de
LEB para evitar resultados falsos negativos.
• Es una herramienta tecnológica simple y de bajo costo y de
alta utilidad para detectar animales positivos en rodeos con
presencia de LBE.
• Esta prueba requiere minucioso y exigente medidas higiénicas
y de bioseguridad durante su ejecución por la facilidad que
existe de contaminación accidental del material genético de
las muestras extraídas .
Riesgo de la LBE.
• El virus está presente en las células blancas sanguíneas de los
animales infectados y la enfermedad es transmitida a través
del contacto físico estrecho y de la transferencia de tejidos
conteniendo sangre.
• La transmisión artificial por jeringas y agujas, instrumentos
contaminados usados en castración, descornado, descole o
por insectos picadores que succionan sangre.
Medidas de control
• La enfermedad puede ser controlada por pruebas sistemáticas
y eliminación de reactores y medidas de bioseguridad
higiénico-sanitarias.
• Vigilancia estricta y evitar el ingreso de animales portadores
al establecimiento libre o en proceso de saneamiento.
• Ver folleto de la SMVU.
• No hay vacunas disponibles.
• En los establecimientos en los que se ha verificado o
confirmado la existencia de LEB deberán establecerse
medidas de bioseguridad para el movimiento externo de
animales a fin de evitar la diseminación del VLB.
• La bioseguridad y biocontención tienen un papel
fundamental para prevenir la diseminación de la infección.
Historia
• En Europa el primer país que se consideró libre de la LBE fue
Dinamarca mediante pruebas sistemáticas de diagnóstico,
eliminación obligatoria de reactores y pago de compensación
del animal reactor sacrificado.
• Fue seguida por el Reino Unido que logró erradicar la
erradicación de LEB mediante medidas semejantes.
• El Departamento de Agricultura (USDA) de EE.UU. hizo un
Estudio de muestreo de los tanques de leche a granel que
fueron recolectados en 534 operaciones (Tambos) con 30 o
más vacas lecheras. Fueron analizadas con la ELISA para
detectar la presencia de anticuerpos contra el VLB.
• Los resultados demostraron que 83.9 por ciento de las
operaciones de lechería examinadas de USA eran positivas a
la presencia de anticuerpos específicos.
Historia
En su hoja de Hechos sobre la LEB el USDA incluyo la
siguiente constancia:
“La alta prevalencia individual del VLB informada en 1996
sugiere que las pruebas de examen y eliminación de
animales seropositivos puede no ser un método costo
efectivo.
En su lugar, la prevención de la transmisión por prácticas
sanitarias adecuadas sería un método costo efectivo
mejor”.
Relación inmunológica y genética
Investigaciones importantes han demostrado:
El declinio en la producción de leche en la comparación rodeo
lechero infectado y rodeos negativos sería similar.
Tasa de concepción 7% más baja en rodeos lecheros positivos
al VLB comparada con la tasa de rodeos libres.
Aumento de la tasa de recorte o eliminación de vacas
lecheras en los tambos positivos a VLB.
Mayor susceptibilidad a otras enfermedades infecciosas
por ejemplo, mastitis, diarreas infecciosas , neumonias.
La suceptibilidad de los vacunos a la persistencia de la
linfocitosis y acaso el desarrollo de tumores es genéticamente
determinado.
Propuesta
Propuesta