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Aujeszky Disease Virus (ADV)
11.ADV.K.5/24
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APLICACIONES / APPLICATIONS
INTRODUCCION / INTRODUCTION
La enfermedad de Aujeszky está causada por Herpesvirus porcino
tipo I (también denominado virus de la pseudorabia), miembro de
la Familia Herpesviridae, subfamilia Alphaherpesvirinae. El cerdo
es el principal reservorio natural de ADV. La infección por ADV
puede causar una sintomatología aguda o subclínica dependiendo
de la virulencia del virus y de la edad del animal. En poblaciones
no vacunadas es usual encontrar abortos y nacimientos
prematuros así como problemas neurológicos y respiratorios en
lechones. El control de la enfermedad implica vacunación y
programas de erradicación utilizando diagnóstico serológico para
control de animales seropositivos. La mayoría de las vacunas
utilizadas contienen virus atenuado con una delección en la
secuencia que codifica para la proteína gE (la proteína no está
completa y no es funcional), por lo que los animales vacunados no
presentan anticuerpos frente a ésta. Por otra parte, tanto las
cepas salvajes como las vacunales presentan la proteína gD
intacta por lo que el DNA que codifica para ella está presente
tanto en animales infectados como vacunados.
Aujeszky's disease is caused by porcine Herpesvirus 1 or ADV
(also, pseudorabies virus), a member of Herpesviridae family,
subfamily Alphaherpesvirinae. Swine are the ADV natural hosts.
Infections may develop an acute or subclinical course, depending
on the virus’ virulence and the age of swine. In non-vaccinated
populations is usual to find abortions and stillbirth in pregnant,
neurological disorders in piglets and respiratory signs. Control of
the disease involves vaccination and eradication by using
serological diagnostics in order to control seropositive animals.
Most of vaccines used contain attenuated virus with a deletion in
the sequence coding for the glycoprotein E (gE it is not complete
and non functional), so vaccinated animals don’t have antibodies
specific of gE antigen. On the other hand, vaccines and wild type
strains have glycoprotein gD so gD’s DNA is present in both,
infected and vaccinated animals.

El kit I N g e n e ADV permite detectar ADV a partir de
secrecciones nasales, fluido orofaríngeo, anginas o ganglio
trigemial, siendo capaz de distinguir entre animales
infectados con virus salvaje y animales vacunados, mediante
tipaje diferencial gE / gD. El amplificado puede ser tipificado.

I N g e n e ADV kit allows to detect ADV from nasal swabs,
oropharyngeal fluid, tonsils or trigeminal ganglion, being able
to distinguish between animals infected by wild type virus and
vaccinated ones, by trying a gE / gD differential detection.
Amplified can be typed.
RESULTADOS / RESULTS
I N g e n e ADV ha sido testado con las cepas vacunales Bartha,
Bartha K61, NIA3 783, NIA4, Begonia y con cepas salvajes (W).
I N g e n e ADV kit has been tested with Bartha, Bartha K61,
NIA3 783, NIA4, Begonia vaccines and wild types strains (W).

MixA 1 (gD)
Mw 1
BASE TÉCNICA / TECHNICAL BASES
FT: 11.ADV.K.5
2.
Técnicas de aislamiento de DNA basadas en el
protocolo de Chomczynski y Sacchi y técnicas de
amplificación que garantizan un alto grado de
sensibilidad y especificidad.
Técnicas de clonaje que permiten introducir controles
exhaustivos en cada fase del ensayo.
I N g e n e A D V k i t is based on the amplification of a DNA’s
fragment using gD and gE genes’ specific oligonucleotides and
combines different techniques of molecular biology in order to
guarantee the reliability of the test:
1.
2.
DNA isolation techniques based on Chomczynski and
Sacchi protolocol and amplification techniques providing
a high sensitivity and specificity.
Cloning techniques allowing to introduce exhaustive
controls into each phase of the assay
2
3
4
5 Wt1 Wt2 C-
Aujeszky Vaccine Strains
El KIT I N g e n e ADV está basado en la amplificación de un
fragmento de DNA utilizando oligonucleótidos específicos de los
genes gE y gD y combina diferentes técnicas de biología
molecular para garantizar la repetibilidad del ensayo.
1.
Muestras de cepas salvajes de ADV y controles de vacunas
clonados (se requieren dos ensayos). / ADV wild type
samples and vaccines cloned controls (Two assays are
required).
1: Bartha strain(gE-)
2: Bartha K-61 (gE-)
3: NIA3 783 (gE-)

MixA 2 (gE)
Mw 1
2
3
4
5 Wt1 Wt2 C-
Aujeszky Wild Type Strains
4: NIA4 (gE-)
5: Begonia (gE-)
Wt: Wild Type (gE+)
Tipaje por secuenciación automática. Es posible conocer
la cepa detectada (Servicio ofrecido por INGENASA). /
Typing by Automatic sequencing. It is possible to know the
type of strain detected (Service available in INGENASA).
Aujeszky Disease Virus (ADV)
11.ADV.K.5/24
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COMPOSICION / COMPOSITION
E l k i t I N g e n e ADV contiene los reactivos necesarios para aislamiento de DNA en 24 reacciones. Además incluye dos controles de
amplificación positivos. Después del aislamiento únicamente es necesario mezclar los reactivos A y B, añadir el molde y ejecutar el
programa.
AMPLIFICACIÓN /
AMPLIFICATION
EXTRACCIÓN /
EXTRACTION
I N g e n e ADV kit contains all necessary reagents for DNA isolation and 24 reactions. The kit includes two cloned positive amplification
controls. After isolation, it is only necessary to mix the pre-mixtures (A y B), add the template, run the programme and check the results.
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Agua destilada libre de DNAasa / Distilled water, DNAase-free
Tampón de extracción / Extraction buffer
Mezcla A1 (Primers específicos de ADVgD) / Mixture A1 (specific primers for ADVgD)
Mezcla A2 (Primers específicos de ADVgE) / Mixture A2 (specific primers for ADVgE)
Mezcla B (mezcla de enzimas) / Mixture B (enzyme mixture)
Control positivo 1 (Control de amplificación de gD) / Positive control 1 (Amplification
control gD)
Control positive 2 (Control de amplificación de gE) / Positive control 2 (Amplification
control gE)
 mantener a -20ºC / Keep at -20ºC
Caducidad / Self life
12 meses / 12 months 4ºC
FT: 11.ADV.K.5
PRODUCTO FABRICADO EN INGENASA
/ PRODUCT MANUFACTURED BY INGENASA
Inmunología y Genética Aplicada, SA
C/ Hermanos García Noblejas 39
28037. MADRID
Tel.: + 34- 91 3680501
Fax: +34- 91 4087598
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