Download Infectious Bursal Disease Virus (IBDV) (1) (2)

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DV
V))
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18.IBD.K.5
INTRODUCCION / INTRODUCTION
La Bursitis Infecciosa también designada enfermedad de
Gumboro es una enfermedad altamente contagiosa que causa, en
su estado agudo, una elevada mortalidad por inmunosupresión en
pollos jóvenes de 3 a 6 semanas. Está causada por el virus IBD
que pertenece al género Avibirnavirus de la familia Birnaviridae.
Se han identificado 2 serotipos diferenciados antigénicamente (I y
II). El serotipo I infecta pollos y en el están incluidos al menos seis
subtipos muy diferentes en cuanto a virulencia. Los virus de uno
de estos subtipos se conocen como cepas variantes mientras que
los virus de otros subtipos se conocen como cepas clásicas. El
serotipo II infecta principalmente pavos y no es patogénico para
pollos.
Infectious bursal disease (IBD), also designated Gumboro
disease, is a highly contagious viral disease. It causes high
mortality (acute disease) by immunosupression in young chicken
3-6 weeks old. Infectious bursal disease virus (IBDV) is the
etiological agent of IBD. It belongs to the genus Avibirnavirus,
family Birnaviridae. Two antigenically distinct serotypes (I and II)
of IBDV have been identified. Serotype I infects chickens and
includes at least six different subtypes showing a considerable
variation in virulence. Viruses included in one of these subtypes
are routinely known as variant strains, whereas viruses of the
other subtypes are known as classic strains. Serotype 2 infects
mainly turkeys and isn’t pathogenic for chickens.
APLICACIONES / APPLICATIONS
El kit I N g e n e IBDV permite detectar el IBDV en bolsa de
Fabricio. El amplificado puede ser tipificado mediante
secuenciación automática o RFLP.
I N g e n e IBDV kit detects IBDV in bursa of Fabricius. The
amplified can be typed by RFLP or automatic sequencing
RESULTADOS / RESULTS
Resultados de RT-PCR (1) y nested (2) en muestras positivas
de RNA y control de clonaje de DNA
RT-PCR results (1) and nested (2) on positive RNA samples
and DNA cloned control.
Mw
1
2
C+
neg
(1)
744bp
500bp
(2)
1
2
C+
neg Mw
500bp
BASE TÉCNICA / TECHNICAL BASES
El KIT I N g e n e IBDV está basado en la amplificación de un
fragmento de RNA de IBVD utilizando oligonucleótidos
específicos del gen vp2 y combina diferentes técnicas de
biología molecular para garantizar la repetibilidad del ensayo.
1.
2.
Técnicas de aislamiento de RNA basadas en el
protocolo de Chomczynski y Sacchi y técnicas de
amplificación que garantizan un alto grado de
sensibilidad y especificidad.
Técnicas de clonaje que permiten introducir controles
exhaustivos en cada fase del ensayo.
I N g e n e I B D V kit is based on the amplification of IBDV RNA
fragment using vp2 gene specific oligonucleotides and
combines different techniques of molecular biology in order to
guarantee the reliability of the test:
FT: 18.IBD.K.5
1.
2.
RNA isolation techniques based on Chomczynski and
Sacchi protolocol and amplification techniques providing
a high sensitivity and specificity.
Cloning techniques allowing to introduce exhaustive
controls into each phase of the assay
246b
Tipaje por RFLP. Es posible distinguir los seis grupos
moleculares (todas las principales vacunas y cepas salvajes
están incluidas) utilizando siete enzimas de restricción. (Servicio
ofrecido por INGENASA)
Typing by RFLP. I t i s p o s s i b l e t o distinguish the six
molecular groups (all main vaccines and wild strains are
included) using seven restriction enzymes. (Service available by
INGENASA)
Mw Mbo I Bst NI Sac I Sty I Nco I Ssp I Taq I
500bp >
Grupo Molecular 6 / Molecular group 6 (vvIBDV)
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Viirruuss ((IIBBD
DV
V))
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COMPOSICION / COMPOSITION
E l k i t I N g e n e IBVD contiene los reactivos necesarios para aislamiento de RNA. Además incluye un control de amplificación positivo
(D78). Después del aislamiento únicamente es necesario mezclar los reactivos A y B, añadir RT-Taq pol, molde,ejecutar el programa y
procesar los resultados.
EXTRACCION /
EXTRACTION


Agua destilada libre de DNAsas / Distilled water, RNAase-free.
Tampón de extracción / Extraction buffer
AMPLIFICACION /
AMPLIFICATION




Tampón de amplificación / Amplification buffer
Mezcla A (Primers específicos de IBDV) Mixture A (specific primers for IBDV)
Mezcla B (Retrotranscriptasa + Polimerasa) / Mixture B (Retrotranscriptase+ polimerase)
Control positivo II (Control de amplificación) / Positive control II (Amplification control)
NESTED
AMPLIFICA
CION /
AMPLIFICA
TION
I N g e n e IBVD kit contains all necessary reagents for RNA isolation. The kit included one cloned positive amplification control (D78). After
RNA isolation, it is only necessary to mix the reagents A and B, add RT-taq-pol, template, run the program and check the results.



Mezcla A (Primers específicos de IBDV) / Mixture A (specific primers for IBDV)
Mezcla B (mezcla de enzimas) / Mixture B (enzyme mixture)
Control positivo II (Control de amplificación) / Positive control II (Amplification control)
 mantener a -20ºC / Keep at -20ºC
NOTE : Los enzimas de restricción utilizados en el tipaje Mbo I, Bst NI, Sac I, Sty I, Nco I , Ssp I, and Taq y los geles de agarosa para
procesamiento de resultados no se incluyen en el kit. / Mbo I, Bst NI, Sac I, Sty I, Nco I , Ssp I, and Taq I restriction enzymes used in typing
and agarose gels to check the results, are not supplied.
Link: http://www.oardc.ohio-state.edu/ibdv/ IBDVElectrophoresisTables.asp
Caducidad / Self-life
12 meses / 12 months 4ºC
FT: 18.IBD.K.5
PRODUCTO FABRICADO EN INGENASA
/ PRODUCT MANUFACTURED BY INGENASA
Inmunología y Genética Aplicada, SA
C/ Hermanos García Noblejas 39
28037. MADRID
Tel.: + 34- 91 3680501
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