Download Kits y Reactivos para Diagnóstico Molecular

Document related concepts
no text concepts found
Transcript
Kits y Reactivos para Diagnóstico Molecular
innuPREP DNA/RNA MINI KIT
Este kit es la prueba suprema de Analytik-Jena, ambos ácidos
nucleicos pueden ser extraídos de la misma muestra biológica.
Posee una capacidad de unión de 50 y 100 µg para DNA y RNA,
respectivamente. El proceso se lleva a cabo de 15 a 40 minutos,
una vez obtenido el DNA genómico y el RNA total estos, se
encuentran listos para usarse.
Procedimiento
Línea 1: Marcador
Línea 2: DNA con extracción
Genómica de una
línea celular humana
Línea 1: Marcador
Línea 2: Total Celular 5
RNA extraído de una
línea celular humana
1.- Homogenizar y lisar el material
biológico
2.- Unir el DNA genómico a
la membrana de la columna D
3.- Unir el RNA total a la membrana
de la columna R
4.- Lavar las columnas D y R
5.- Eluir el DNA genómico de
la columna D y el RNA
de la columna R
innuPREP PLASMID MINI KIT
Permite la rápida y fácil extracción de DNA
plasmídico a partir de lisados bacterianos.
El método combina la lisis alcalina y la unión
del DNA plasmídico a una membrana. Una vez
unido, el DNA plasmídico es lavado y posteriormente, es eluido por medio de un buffer bajo
en sales. El DNA plasmídico obtenido está listo
para usarse de manera inmediata.
Procedimiento
1.- Realizar una lisis alcalina
2.- Separar por centrifugación el DNA
cromosomal y las proteínas
3.- Unir el DNA plasmídico a la membrana
de la columna
4.- Lavar la columna
5.- Eluir el DNA plasmídico
Línea 1 y 14: Marcador de PM
Líneas 2, 5, 8 y 11: pDNA, sin romper
Líneas 3, 6, 9 y 12: pDNA digerido con HINDIII
Líneas 4, 7, 10 y 13: pDNA digerido con EcoR1
Kits y Reactivos para Diagnóstico Molecular
InnuPREP GEL EXTRACTION KIT
El innuPREP Gel Extraction Kit es una herramienta ráipida
y sencilla para la purificación y concentración de fragmentos
de DNA de geles de agarosa en TAE o TBE. El primer paso
de este proceso consiste en solubilizar las piezas de geles de
agarosa; seguido de unión selectiva del DNA en una membrana.
Los fragmentos de DNA purificados estarán listos para su uso
inmediato en diversas aplicaciones.
Procedimiento
Aplicación de la muestra
Siguiendo la amplificación de la muestra de un fragmento
a 260 bp, la banda correspondiente fue cortada del gel
de agarosa, purificado usando el InnuPREP Gel Extraction Kit
y despues secuenciado.
1.- Solubilizar el corte
de agarosa
2.- Unir el DNA a
la membrana de
la columna
3.- Lavar la columna
4.- Eluir el DNA de
la columna
innuPREP PCRpure KIT/innuPREP PCRpure 96 KIT
El innuPREP PCRpure Kit provee un método rápido, simple
y altamente eficiente para purificar productos de amplificación
directamente de las mezclas de reacción de PCR y/o para
concentrar productos de PCR. La purificación esta en
un método de dos pasos y toma aproximadamente 3 minutos
llevarlo a cabo. El proceso permite recuperar productos
de 60 pb hasta 30 kb alcanzando de 75% a 95% de eficiencia
de recuperación.
Procedimiento
1.- Agregar el buffer de unión
a la mezcla de reacción
de PCR
2.- Unir los fragmentos de PCR
a la columna
3.- Eluir
• Antes de
la purificación
• Despues de
la purificación
Comparativo con productos de la competencia
Muestra de Amplificación
Después de amplificar a fragmentos de 270 bp,
la reacción de la mezcla de PCR fue purificada
usando el innuPREP PCRpure Kit.
Kits y Reactivos para Diagnóstico Molecular
innuPREP DYEpure KIT
El innuPREP DYEpure Kit es una herramienta efectiva y rápida para
remover dNTPs terminadores acoplados a fluorocromo de reacciones
de secuenciación. Estos terminadores se utilizan para secuenciación
y pueden intereferir en el proceso de lectura. La tecnología
“Dual Chemistry” (DC) permite omitir pasos de lavado ineccesarios.
Esto reduce el proceso a solo la unión y elución, llevando a cabo
el proceso completo en solo 5 minutos.
Procedimiento
Parte de una secuencia que muestra
la excelente calidad de los productos
de PCR para las secuencias de reacción
1.- Agregar Buffer de remoción
de colorante a la mezcla de
secuenciación, unir los fragmentos
de DNA a la membrana de
la columna.
2.- Eluir los fragmentos de DNA
de la columna.
blackPREP Tick DNA/RNA KIT
Permite purificar DNA y RNA de manera simultánea
a partir de garrapatas. Esta característica es de
particular interés cuando además de bacterias
patógenas, se buscan virus de RNA. La lisis es
realizada en tubos que contienen perlas para
la homogenización de la muestra; luego de la lisis,
el DNA es unido a la membrana de una columna
y el RNA es unido a otra. Finalmente los ácidos
nucleicos son lavados y eluidos en tubos separados.
Procedimiento
1.- Homogenizar y lisar la muestra
2.- Unir el DNA a la primer columna
3.- Unir el RNA a la segunda columna
4.- Lavar las columnas
5.- Eluir el DNA y RNA de la primer
y segunda columna, por separado
Kits y Reactivos para Diagnóstico Molecular
InnuPREP Virus RNA KIT I INSTANT Virus RNA KIT
Herramienta altamente eficiente para la extracción de virus
de RNA de cadena sencilla de suero, plasma, fluídos corporales,
tejidos y sobrenadantes de cultivos celulares. El novedoso
proceso de extracción está basado en el uso de una columna
que posee membranas optimizadas que garantizan la máxima
recuperación y alta calidad del RNA.
Procedimiento
1.- Lisis del material biológico
2.- Unir el RNA a la columna
3.- Lavar la columna
4.- Eluir el RNA viral de la columna
Gráfico de ampliación para
el TaqMan, PCR específico en
tiempo real para el Virus del RNA;
Análoga a Electroforesis en gel.