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Kits y Reactivos para Diagnóstico Molecular innuPREP DNA/RNA MINI KIT Este kit es la prueba suprema de Analytik-Jena, ambos ácidos nucleicos pueden ser extraídos de la misma muestra biológica. Posee una capacidad de unión de 50 y 100 µg para DNA y RNA, respectivamente. El proceso se lleva a cabo de 15 a 40 minutos, una vez obtenido el DNA genómico y el RNA total estos, se encuentran listos para usarse. Procedimiento Línea 1: Marcador Línea 2: DNA con extracción Genómica de una línea celular humana Línea 1: Marcador Línea 2: Total Celular 5 RNA extraído de una línea celular humana 1.- Homogenizar y lisar el material biológico 2.- Unir el DNA genómico a la membrana de la columna D 3.- Unir el RNA total a la membrana de la columna R 4.- Lavar las columnas D y R 5.- Eluir el DNA genómico de la columna D y el RNA de la columna R innuPREP PLASMID MINI KIT Permite la rápida y fácil extracción de DNA plasmídico a partir de lisados bacterianos. El método combina la lisis alcalina y la unión del DNA plasmídico a una membrana. Una vez unido, el DNA plasmídico es lavado y posteriormente, es eluido por medio de un buffer bajo en sales. El DNA plasmídico obtenido está listo para usarse de manera inmediata. Procedimiento 1.- Realizar una lisis alcalina 2.- Separar por centrifugación el DNA cromosomal y las proteínas 3.- Unir el DNA plasmídico a la membrana de la columna 4.- Lavar la columna 5.- Eluir el DNA plasmídico Línea 1 y 14: Marcador de PM Líneas 2, 5, 8 y 11: pDNA, sin romper Líneas 3, 6, 9 y 12: pDNA digerido con HINDIII Líneas 4, 7, 10 y 13: pDNA digerido con EcoR1 Kits y Reactivos para Diagnóstico Molecular InnuPREP GEL EXTRACTION KIT El innuPREP Gel Extraction Kit es una herramienta ráipida y sencilla para la purificación y concentración de fragmentos de DNA de geles de agarosa en TAE o TBE. El primer paso de este proceso consiste en solubilizar las piezas de geles de agarosa; seguido de unión selectiva del DNA en una membrana. Los fragmentos de DNA purificados estarán listos para su uso inmediato en diversas aplicaciones. Procedimiento Aplicación de la muestra Siguiendo la amplificación de la muestra de un fragmento a 260 bp, la banda correspondiente fue cortada del gel de agarosa, purificado usando el InnuPREP Gel Extraction Kit y despues secuenciado. 1.- Solubilizar el corte de agarosa 2.- Unir el DNA a la membrana de la columna 3.- Lavar la columna 4.- Eluir el DNA de la columna innuPREP PCRpure KIT/innuPREP PCRpure 96 KIT El innuPREP PCRpure Kit provee un método rápido, simple y altamente eficiente para purificar productos de amplificación directamente de las mezclas de reacción de PCR y/o para concentrar productos de PCR. La purificación esta en un método de dos pasos y toma aproximadamente 3 minutos llevarlo a cabo. El proceso permite recuperar productos de 60 pb hasta 30 kb alcanzando de 75% a 95% de eficiencia de recuperación. Procedimiento 1.- Agregar el buffer de unión a la mezcla de reacción de PCR 2.- Unir los fragmentos de PCR a la columna 3.- Eluir • Antes de la purificación • Despues de la purificación Comparativo con productos de la competencia Muestra de Amplificación Después de amplificar a fragmentos de 270 bp, la reacción de la mezcla de PCR fue purificada usando el innuPREP PCRpure Kit. Kits y Reactivos para Diagnóstico Molecular innuPREP DYEpure KIT El innuPREP DYEpure Kit es una herramienta efectiva y rápida para remover dNTPs terminadores acoplados a fluorocromo de reacciones de secuenciación. Estos terminadores se utilizan para secuenciación y pueden intereferir en el proceso de lectura. La tecnología “Dual Chemistry” (DC) permite omitir pasos de lavado ineccesarios. Esto reduce el proceso a solo la unión y elución, llevando a cabo el proceso completo en solo 5 minutos. Procedimiento Parte de una secuencia que muestra la excelente calidad de los productos de PCR para las secuencias de reacción 1.- Agregar Buffer de remoción de colorante a la mezcla de secuenciación, unir los fragmentos de DNA a la membrana de la columna. 2.- Eluir los fragmentos de DNA de la columna. blackPREP Tick DNA/RNA KIT Permite purificar DNA y RNA de manera simultánea a partir de garrapatas. Esta característica es de particular interés cuando además de bacterias patógenas, se buscan virus de RNA. La lisis es realizada en tubos que contienen perlas para la homogenización de la muestra; luego de la lisis, el DNA es unido a la membrana de una columna y el RNA es unido a otra. Finalmente los ácidos nucleicos son lavados y eluidos en tubos separados. Procedimiento 1.- Homogenizar y lisar la muestra 2.- Unir el DNA a la primer columna 3.- Unir el RNA a la segunda columna 4.- Lavar las columnas 5.- Eluir el DNA y RNA de la primer y segunda columna, por separado Kits y Reactivos para Diagnóstico Molecular InnuPREP Virus RNA KIT I INSTANT Virus RNA KIT Herramienta altamente eficiente para la extracción de virus de RNA de cadena sencilla de suero, plasma, fluídos corporales, tejidos y sobrenadantes de cultivos celulares. El novedoso proceso de extracción está basado en el uso de una columna que posee membranas optimizadas que garantizan la máxima recuperación y alta calidad del RNA. Procedimiento 1.- Lisis del material biológico 2.- Unir el RNA a la columna 3.- Lavar la columna 4.- Eluir el RNA viral de la columna Gráfico de ampliación para el TaqMan, PCR específico en tiempo real para el Virus del RNA; Análoga a Electroforesis en gel.