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UNIVERSIDAD DEL PAPALOAPAN INGENIERIA EN ACUICULTURA TESIS Tasa de ingestión de caballitos de mar Hippocampus erectus Perry 1810, alimentados con anfípodos Parhyale hawaiensis Dana 1853. QUE PARA OBTENER EL TITULO DE INGENIERO EN ACUICULTURA PRESENTA FREDY EDEL SORIANO LUIS Loma Bonita, Oaxaca Julio de 2012 Índice l. Introducción .......................................................................................................... 3 1.1Marco Teórico ................................................................................................. 3 1.1.1 Clasificación taxonómica......................................................................... 5 1.1.2 Distribución ............................................................................................. 5 1.1.3 Hábitat..................................................................................................... 6 1.1.4 Conducta alimenticia............................................................................... 6 1.1.5 Aspectos biológicos de Parhyale hawaiensis.......................................... 8 1.2 Planteamiento del problema .......................................................................... 9 1.3 Justificación ................................................................................................. 10 1.4 Antecedentes............................................................................................... 11 1.5 Hipótesis y predicciones. ............................................................................. 12 1.6 Objetivos ..................................................................................................... 13 1.6.1 Objetivo general ........................................................................................ 13 1.6.2 Objetivos particulares ............................................................................... 13 ll. Materiales y métodos ......................................................................................... 13 2.1 Área de estudio............................................................................................ 13 2.1.2 Obtención de caballitos adultos ................................................................ 14 2.1.3 Obtención de sub-adultos ......................................................................... 14 2.1.4 Obtención de juveniles.............................................................................. 14 2.1.5 Obtención de anfípodos ............................................................................ 15 2.2.1Diseño experimental .................................................................................. 15 2.2.2 Tasa de ingestión ...................................................................................... 15 2.2.3 Tiempo de saciedad .................................................................................. 16 2.2.4 Medición de caballitos............................................................................... 17 2.2.5 Medición de anfípodos .............................................................................. 17 2.2.6 Parámetros ............................................................................................... 17 Anexos .................................................................................................................. 21 l. Introducción 1.1Marco Teórico La acuicultura sigue creciendo a nivel mundial más rápidamente que cualquier otro sector de producción de alimentos de origen animal, y a mayor ritmo que la población (FAO 2008). Sin embargo, esta actividad no solo se enfoca a producción de fuentes de alimento para consumo humano, o con fines de repoblamiento, también de una forma paralela abarca el cultivo de especies ornamentales para fines estéticos y didácticos. Siendo peces y crustáceos marinos de los grupos más buscados por su atractiva coloración, formas exóticas e interesantes hábitos de conducta en acuario. De los tipos de peces que despierta más interés en este comercio son los caballitos de mar. Estos son peces marinos teleósteos, fácilmente identificables por su postura erguida (Teske y Beheregaray, 2009), son un importante producto comercial para su uso en medicina tradicional china (Sheng, et al. 2006), ya que se les adjudican propiedades terapéuticas para el tratamiento del asma, la incontinencia, trastornos de la tiroides y afecciones de la piel, entre otros (Vincent, 1996 en Muy, 2006). Adicionalmente, las características peculiares de su morfología y su forma de reproducción, los hacen atractivos para los consumidores de artesanias y para los coleccionistas de peces ornaméntales, lo que está contribuyendo al agotamiento de muchas poblaciones silvestres en el mundo (Wilson y Vincent 2000; Job, et al. 2002). Ya desde el año de 1996 se tenían reportes que los caballitos de mar se encontraban bajo amenaza mediante el grupo conservacionista TRAFFIC (Trade Record Análisis of Flora and Fauna Comercies) (Ireland 1997 en Yen 2004). Esto ha generado que debido a la sobreexplotación a que se encuentran sometidas sus poblaciones naturales y a la progresiva degradación del medio donde habitan, estas especies están consideradas en peligro de extinción (González 2006). A nivel internacional son colocándolas en el apéndice II del CITES (Convención sobre el comercio internacional en especies amenazadas de fauna y flora silvestre), así como que estén catalogados en la lista roja de la Unión Internacional Para la Conservación de la Naturaleza (IUCN) por sus siglas en inglés. En nuestro país los caballitos de mar se encuentran colocados bajo protección especial por la NOM-059-SEMARNAT-2001, permitiendo solo su comercio cuando son capturados de manera incidental o por cultivo. Estas normas que limitan la captura, comercialización y tráfico nacional e internacional han provocado el desarrollo de la pesca clandestina y promueven el desarrollo del tráfico ilegal. El fomento de prácticas de conservación y el desarrollo acuícola podría garantizar la conservación de las poblaciones silvestres y mantener el comercio de estos organismos. Es por esto que la acuicultura juega un rol importante ya que ha sido reconocida como una solución a largo plazo para mantener el comercio de caballitos de mar y reducir al mínimo la recolección silvestre (Lin et al, 2009). En la actualidad la mayoría de los peces de agua dulce comercializados en la industria de la acuariofilia son cultivados, sin embargo, para organismos marinos ornamentales ocurre lo contrario ya que pocos son producidos por la tecnología de acuicultura (Michael 2002). Esto crea la necesidad de enfocarse en mejorar las técnicas de cría en cautiverio de los caballitos tratando que esta actividad sea lo más rentable posible, mitigando el impacto que las actividades antropogénicas crean a las poblaciones silvestre. 1.1.1 Clasificación taxonómica Reyno: Animalia Filum: Chordata Subfilum: Vertebrata Superclase: Osteichthyes Clase: Actinopterygii Subclase: Neopterygii Infraclase: Teleostei Superorden: Acanthopterygii Orden: Gasterosteiformes Suborden: Syngnathoidei Familia: Syngnathidae Subfamilia: Hippocampinae Género: Hippocampus Rafinesque, 1810 Especie: Hippocampus erectus Perry, 1810 (Figura 1). 1.1.2 Distribución Esta especie se encuentra reportada en el Atlántico occidental desde Canadá y la punta sur de Nueva Escocia hasta la parte norte de Brasil (Río de Janeiro); incluyendo el Golfo de México, Panamá y Venezuela (Lourie et al 2004). 1.1.3 Hábitat El hábitat de los caballitos de mar es la zona costera, viven entre los mantos de algas y zostera marina, otros viven entre las zonas inundadas de los bosques de mangles, y también se les encuentra en áreas de fondo suave, donde las esponjas son abundantes, de forma particular H. erectus es conocido por estar presentes en zonas someras y profundas de bahías y marismas, y a lo largo de las playas y aguas costeras. Se han encontrado asociadas a criaderos de ostras y bancos cubiertos de maleza. Estos caballitos de mar se asocian generalmente a la vegetación sumergida como plantas acuáticas (Thalassia spp.), pastos marinos (Zoostera spp.) y macroalgas como los sargazos (Sargassum spp.). También se les puede encontrar entre corales blandos (gorgonias) y se han encontrado en alta mar a profundidades de más de 70m, en algas, y esponjas (Lourie et al 2004). 1.1.4 Conducta alimenticia En la conducta alimenticia de los caballitos de mar están implicadas interacciones que pueden agruparse de la siguiente manera (Felício, et al. 2006). 1. Inspección: Inspección visual del sustrato 2. Orientación visual: los dos ojos se dirigen a la presa; el animal puede bajar el hocico, colocándolo cerca de la región ventral del cuerpo. 3. Enfoque: El animal se acerca lentamente a la presa. 4. Posicionamiento: El animal adopta una posición vertical, horizontal, oblicua o en posición boca arriba. 5. Ataque: El animal se mueve muy rápido y dirige el hocico hasta la presa, la presa es absorbida por el hocico, y esto normalmente se acompaña de un sonido característico (Clic). Cada etapa está influenciada por las interacciones del depredador con su presa. Estas interacciones determinan la relación entre el número de presas capturadas por unidad de tiempo y el número de presas disponibles. Esta relación también es llamada “respuesta funcional” y representa la variación en la tasa de consumo de presas de acuerdo a la densidad de las presas. Según (Holling 1959) se pueden distinguir tres tipos de respuestas funcionales: Respuestas funcionales depredador-presa (Según, Holling 1959) Tipo I. La tasa de ingestión se incrementa linealmente cuando se incrementa el número de presas, hasta llegar al punto de saciedad, se observan en general en animales filtradores. Tipo II. La tasa de ingestión se incrementa cuando se incrementa la densidad de presas hasta estabilizarse en un máximo valor, las de tipo II están en su mayoría ejemplificadas por depredadores invertebrados. Tipo III. Muestra una respuesta sigmoidal con un límite bajo y uno superior, En este caso, el número de presas consumidas por unidad de tiempo se acelera con el aumento de la densidad de presas, hasta que el tiempo de manipulación comienza a limitar su consumo. Las mesetas alcanzadas en los tres tipos de respuestas funcionales representan el nivel de saciedad dado que su ritmo de alimentación es limitado por la velocidad con que pueden capturar, manipular, ingerir, digerir y asimilar el alimento. Por ejemplo en el caso del tipo II la tasa de ingestión alcanza una asíntota (aproximación infinita al valor máximo) porque el depredador no consigue capturar, manipular e ingerir más presas por unidad de tiempo debido a alguna restricción morfológica, como el caso de la relación entre el tamaño de la boca y el tamaño de la presa que es considerado como uno de los factores más decisivos en la capacidad de los peces para hacer frente a las presas de diferentes tamaños (Cunha y Planas 1999). En el caso de los caballitos de mar está limitada por la forma del hocico y el ancho, como es el caso de otros signátidos (Teixeira 2001). 1.1.5 Aspectos biológicos de Parhyale hawaiensis Las investigaciones realizadas con esta especie se enfocan en su mayoría a reportes como organismo modelo para estudios sobre desarrollo embrionario (Price y Patel 2008; Özhan-Kizil, et al. 2009; Rehm, et al. 2009) así como estudios genéticos (Browne, et al. 2007; Pavlopoulos, et al. 2009) y estudios sobre toxicidad de petróleo (Lee y Nicol 1980). Aunque se encuentra documentada la biología de esta especie, está poco documentado su uso como alimento vivo a escala comercial. Esta especie de anfípodo (Figura 2) se encuentra distribuida en Florida, Golfo de México y Mar Caribe (Shoemaker 1954), cabe destacar que se encuentra reportado como una especie de distribución pantropical (Galán 1984 en Hebert Quintero 1992) ya que en diferentes estudios se ha reportado su presencia, como es el caso de las costas de Brasil y aguas de Australia. Además de ser descrito como miembro de las cadenas tróficas y reconocido por su importancia en la estructura comunitaria y por su papel en la transferencia de materia y energía, y como un organismo que habita acumulaciones de descomposición de detritus en la zona litoral superior (Poovachiranon, et al. 1986). La especie P. hawaiensis presenta un tamaño pequeño, menor a 2cm. y fácil de mantener a altas densidades en laboratorio, tienen altas tolerancia a las variaciones de la calidad del agua como salinidad y temperatura, se pueden encontrar adultos maduros en todo el año, además que presentan un tiempo corto de generación de huevos. 1.2 Planteamiento del problema En el desarrollo de protocolos para la cría en cautiverio de organismos marinos, la maduración en cautiverio, desove y selección de tipo de alimento significan reales cuellos de botella para la expansión de la industria marina ornamental (Ostrowski y Laidley 2001; Chew 2005). El tipo de alimento es un aspecto importante debido a que con frecuencia los alimentos comerciales no contienen los nutrientes que las especies requieren para su crecimiento óptimo además de presentar poca rentabilidad en algunos casos. Además es complicado sustituir el alimento vivo por uno inerte, porque no representa el estimulo natural de movimiento para ser atrapado por el depredador. Esto nos conduce a que la identificación de una dieta resulte clave para aumentar el potencial de cultivo, en esta identificación es importante considerar los hábitos alimenticios de las especies cultivadas, ya sean herbívoros, carnívoros u omnívoros (Castro et al 2003). Existe una amplia gama de tipos de organismos con un alto potencial para ser utilizados como presas para otros, por mencionar algunos ejemplos, los rotíferos se utilizan en todo el mundo como el alimento vivo para las etapas iníciales de peces marinos, siendo dos especies comúnmente cultivadas: Brachionus plicatillis y Rotundiformis braclonus (Chew 2005). 1.3 Justificación La crianza de caballitos de mar es difícil, debido a su necesidad de alimento vivo (Wilson y Vincent 2000) en condiciones de cautiverio la alimentación representa uno de los mayores retos para su cultivo. Estos organismos se valen de señales visuales para atrapar las presas vivas, por esta razón usualmente el mantenimiento de los caballitos requiere del cultivo o recolección de presas vivas (Woods 2000). Actualmente, un tipo de crustáceo (Artemia sp.), es el organismo más utilizado como alimento vivo en los primeros estadios de larvas de camarón y en la mayoría de peces marinos cultivados. Estos crustáceos también son utilizados ampliamente en la alimentación de caballitos de mar debido a su fácil adquisición, pero no son las presas naturales de estos y se ha reportado que hay especies que tienen dificultad en la asimilación de este alimento (Payne y Rippingale 2000). Por lo que encontrar otra fuente de alimento disminuiría los costos que implica la producción de Artemia. Claramente el alimento con las mejores características para ser considerado candidato para su cultivo y usarlo en la acuicultura marina ornamental, es del tipo y tamaño encontrado en el tracto digestivo de los organismos silvestres (Ostrowski y Laidley 2001); Tal es el caso del cultivo de los caballitos de mar el cual se ha basado en el alimento vivo recolectado del medio natural (Chris 2003). Los cabalitos de mar son depredadores visuales activos, alimentándose exclusivamente de presas vivas (Wilson y Vincent, 1998, en Felício et al, 2006). Es deseable el alimento que estimule el movimiento de captura, y debido a que los anfípodos son sus presas naturales, el uso de estos organismos puede mejorar la alimentación dentro del proceso de cría de caballitos de mar. La tasa de ingestión es un índice útil en acuicultura que representa la cantidad de alimento consumido en relación al alimento suministrados, puede ser un buen indicativo del estado de salud, crecimiento de los animales, calidad de alimento, así como malas prácticas de alimentación, en la práctica para asegurar que los animales tengan alimento suficiente el alimento suministrado es sobreestimado resultando en exceso. La tasa de ingestión determina un paso importante en el desarrollo de una adecuada estrategia de alimentación (You, et al. 2008). 1.4 Antecedentes Algunas especies de copépodos se consideran una presa adecuada para cultivo de larvas de peces marinos como suplemento a la dieta tradicional basada en nauplios (Olivotto, et al. 2008) y ayudan a mejorar la tasa de supervivencia y la tasa de crecimiento teniendo un buen potencial para peces arrecífales (Milione y Zeng 2008), sin embargo, se debe tener en cuenta que los copépodos son difíciles de cultivar en forma continua, sólo se pueden cultivar en densidades muy bajas, en tanques grandes y necesitan ser alimentados con diferentes combinaciones de especies de microalgas (Holt 2008). Se encuentran documentados varios aspectos de la biología de H. erectus pero los problemas a la hora de alimentación sigue siendo un punto preocupante para los interesados en desarrollar satisfactoriamente el paquete tecnológico de cultivo. Diferentes estudios reportan que la dieta de los caballitos silvestres está compuesta en gran medida de crustáceos, en particular, anfípodos (Payne y Rippingale 2000; Woods 2002; Storero y González 2009). (James y Heck 1994) al estudiar el efecto de la complejidad del habitat en la emboscada y depredación, encontraron una relacion lineal positiva entre el tamaño del caballito y el porcentaje promedio de presas capturadas, y aunque esta relación es estadísticamente significativa el tamaño de los caballitos explica solo el 5% de la variación. (Murugan, et al. 2009), encontraron una alta eficiencia reproductiva cuando los caballitos de mar fueron alimentados con anfípodos. Mientras que (Storero y González 2009) al experimentar con selectividad de presas no encontraron diferencias significativas en la cantidad de presas ingeridas entre macho y hembra, aunque sí se encontraron diferencias estadísticamente significativas en la cantida de presas ingeridas donde los anfípodos fueron de las presas más consumidas junto con la Artemia sp. 1.5 Hipótesis y predicciones. Tanto la tasa de consumo, así como el tiempo de saciedad están estrechamente relacionados con su talla (etapas de cultivo). 1.5.1 Predicciones • Los caballitos de mar de mayor tamaño tendrán las tasas de consumo más bajas. • Los tiempos de saciedad serán más altos en los caballitos de mar de menor talla. 1.6 Objetivos 1.6.1 Objetivo general Evaluar la relación entre tres tallas de cultivo de caballito de mar Hippocampus erectus cuando son alimentados con anfípodos. 1.6.2 Objetivos particulares 1. Determinar la tasa de ingestión a 15 minutos y 3 horas de H. erectus en tres etapas de cultivo cuando son alimentados con anfípodos. 2. Determinar el tiempo de saciedad de H. erectus en tres etapas de cultivo cuando son alimentados con anfípodos. 3. Encontrar si existe una correlación entre el tamaño de los caballitos y la cantidad de presas ingeridas. ll. Materiales y métodos 2.1 Área de estudio La etapa experimental se realizó en el área de ecología perteneciente a la Unidad Multidisciplinaria de Docencia e Investigación (UMDI) que pertenece a la Facultad de Ciencias de la Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM) con sede en el puerto de Sisal, en el Estado de Yucatán. Esta población se encuentra ubicada en el litoral norponiente del Estado de Yucatán, en el Golfo de México y localizado en el municipio de Hunucmá, a 53 kilómetros de Mérida en las coordenadas 21° 9´55.22”N 90° 1´54.93”W. 2.1.1 Obtención de caballitos de mar 2.1.2 Obtención de caballitos adultos Los organismos adultos usados en los experimentos fueron obtenidos de un lote de individuos capturados en costas de Yucatán, con el uso de chinchorro, los que se capturaron se marcaron con cuentas de chaquira para ser reconocidos, para los experimentos los caballitos usados presentaron un tamaño promedio de 17.16 cm (n=10) y una variación ± 1.34 DS, y fueron mantenidos en un sistema de recirculación con flujo constante de agua y que consta de 6 peceras de 90 L. filtro mecánico, filtro biológico para el proceso de nitrificación y desnitrificación, un calentador, un reservorio con una capacidad de 140L y una bomba para distribución del agua en todo el sistema (Anexo4). 2.1.3 Obtención de sub-adultos Los caballitos de mar subadultos, fueron tomados de un lote mantenido en cautiverio desde su nacimiento de una edad aproximada de 8 meses, estos organismos son procedentes de padres capturados del medio silvestre, fueron alimentados con metanauplios de artemia enriquecidos en la etapa inicial y artemia adulta enriquecida con Selco en la fase de juvenil, estos se mantuvieron en un sistema de recirculación que consta de 6 peceras de 90 L. filtro mecánico, filtro biológico para el proceso de nitrificación y desnitrificación, un calentador, un reservorio con una capacidad de 140L y una bomba para distribución del agua en todo el sistema (Anexo 4). 2.1.4 Obtención de juveniles Los organismos más pequeños de 3 meses de edad (juveniles) son caballitos que nacieron en las instalaciones de la UMDI sus padres fueron capturados en medio silvestre y aclimatados a las condiciones de cautiverio, una vez que los padres se aparearon y expulsaron los juveniles, estos se mantuvieron en un sistema de recirculación con peceras llamadas Kriezel (carrusel) (Imagen 3). Los caballitos más pequeños son mantenidos en un sistema de recirculación que cuenta con filtro mecánico, filtro biológico para el proceso de nitrificación y desnitrificación, un calentador, y bomba para distribución de agua. 2.1.5 Obtención de anfípodos Los anfípodos fueron capturados en el puerto de abrigo a la entrada de la UMDI (Imagen 5), el método de captura consistió en trampas llamadas muñecas (Imagen 6) que constan de una malla que envuelve a una piedra, esto proporciona superficie de agarre y refugio para los organismos. Las trampas fueron dejadas en la tarde a la orilla del puerto de abrigo, a una profundidad de 10-30 cm. Y fueron sacadas en la mañana para su traslado al sistema de recirculación destinado para anfípodos. Una vez colectados del medio natural fueron separados de las trampas y colocados en un sistema de recirculación con peceras con capacidad de 50L. (Imagen 7) donde fueron alimentados con lechuga hasta que se utilizaron como vivo en cultivo de caballitos 2.2 Métodos 2.2.1Diseño experimental 2.2.2 Tasa de ingestión Se llevaron a cabo tres tratamientos (Aduldos, Subadultos, Juveniles) con 10 repeticiones cada uno, iniciando con los caballitos más pequeños, los cuales fueron separados por kriesel. La intención del uso de este tipo de contenedor fue evitar el uso de las esquinas de las peceras cuadradas como refugio y que fueran usadas como una forma de escape por parte de las presas, para el caso de los juveniles y sub-adultos, cada experimento consistió en adicionar 30 anfípodos por kriezel con el uso de una pipeta recortada en forma transversal para no lastimar el alimento vivo, una vez agregados, se colocó un caballito en cada pecera y se procedió a contar los anfípodos sobrevivientes en un lapso de 15 minutos, al pasar las tres horas, se sacaron a los caballitos de mar de cada pecera, y se contabilizaron los anfípodos sobrevivientes. Ya que se sacaron los caballitos, se colocaron en tambos de plástico con agua marina del mismo sistema para proceder a la medición. En el caso de los organismos adultos que son los de mayor tamaño el procedimiento fue el mismo agregando 30 anfípodos, por otra parte al presentar un mayor tamaño no llegaron a caber en los kriezel limitando el movimiento, por lo que fueron colocados en peceras rectangulares de 20 cm de ancho 30cm de alto y 40cm de largo. 2.2.3 Tiempo de saciedad Se llevaron a cabo tres tratamientos (Aduldos, Subadultos, Juveniles) con 10 repeticiones cada uno, los caballitos juveniles y sub-adultos fueron colocados en los kriezel, una vez colocados cada caballito en cada pecera se procedió a alimentarlos uno por uno, ayudados de una pipeta recortada se adicionó una presa seguida de otra, y utilizando un cronómetro se tomó el tiempo al momento que el depredador consumía la primer presa, se fue adicionando presa tras presa hasta que el caballito no mostró interés y dejó de perseguir a los anfípodos, o solo los observaban y no los ingería. Este mismo método se usó para los caballitos más grandes en las peceras rectangulares. 2.2.4 Medición de caballitos El procedimiento para medir los caballitos de mar consistió, en tomarles fotografías a cada organismo dentro de una pecera de vidrio llena de agua del mismo sistema, donde se colocó una cuadricula con una graduación de 1cm. Posteriormente se introdujeron los peces uno por uno, se esperó a que se tranquilizaran los organismos y se les tomó una fotografía a cada organismo, apoyándonos del programa imageJ se midió la longitud total (Lt) y largo del hocico. 2.2.5 Medición de anfípodos Tratando de evitar el sesgo que llegan a provocar diferentes tamaños de presas para los experimentos solamente se utilizaron anfípodos de un solo tamaño, cual fue de 2.0±0.5 mm. Estas mediciones se hicieron usando microscopio óptico marca Nikon, que nos auxilió en la toma de imágenes de los anfípodos, a los cuales se les midió la longitud total. 2.2.6 Parámetros Tasa de ingestión Cantidad de organismos consumidos en un determinado lapso de tiempo (Concentración inicial de presas-concentración final)/tiempo de ingesta Tiempo de saciedad Tiempo medido desde que los organismos consumen la primera presa hasta que dejan de mostrar interés al seguirles adicionando alimento. lll. Literatura citada Browne, W. E., S. H. D. Haddock, et al. (2007). "Phylogenetic analysis of lineage relationships among hyperiid amphipods as revealed by examination of the mitochondrial gene, cytochrome oxidase I (COI)." Integrative and Comparative Biology 47(6): 815-830. Castro, R. D. L. A., Castro, Mejía., J. Castro Mejía, A. Malpica Sánchez (2003). "Alimento vivo en la acuicultura." Departamento El Hombre y su ambiente. División de CBS. UAM Unidad Xochimilco. Cunha, I. and M. 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