Download Evaluación del poder irritante del jabón bactericida BELLOIL

Evaluación del poder irritante del jabón bactericida BELLOIL®
Evaluation of irritant power of bactericidal soap BELLOIL®
Maritza F. Díaz1, Rosa Ibis Meneau1, Gastón García2, Yaima Sánchez1, Kendra
García1
1
[email protected]
Centro de Investigaciones del Ozono, Centro Nacional de Investigaciones Científicas, Calle 230 y ave
15, Siboney, CP 6412, Ciudad de La Habana, Cuba
2
LIORAD Grupo Control de Laboratorio de Investigaciones Biomédicas. Ave 27 A % 264 y 268, La
Lisa, Ciudad Habana, Cuba
1
Evaluación del poder irritante del jabón bactericida BELLOIL®
Resumen
Desde tiempos remotos los jabones bactericidas son usados para la limpieza de la piel y el
tratamiento del acné. Teniendo en cuenta las propiedades bactericidas y fungicidas del
aceite de girasol ozonizado (OLEOZON® Tópico) se ha desarrollado una formulación de
jabón bactericida marca registrada BELLOIL® con efecto terapéutico. El objetivo de este
estudio es determinar la posible irritabilidad dérmica y oftálmica del jabón BELLOIL®. En
este trabajo fue evaluada la formulación de jabón que contiene como principio activo aceite
de girasol ozonizado al 2 %. Los ensayos se realizaron usando las técnicas descritas en los
procedimientos normalizados de trabajo establecidos en el Centro de Investigaciones y
Evaluaciones Biológicas del Instituto de Farmacia y Alimentos de la Universidad de La
Habana de acuerdo a las normas ISO 10993-10. Los principios éticos de Buenas Prácticas
de Laboratorio fueron cumplidos para evitar el sufrimiento de los animales durante la
experimentación. Fueron utilizados conejos machos con un peso corporal de 1,8 a 2,0 kg de
peso. El efecto del jabón BELLOIL® en la piel y las estructuras oculares fue observado
inmediatamente después de 1, 24, 48 y 72 horas de ser aplicado. La escala Draize fue
aplicada para evaluar las lesiones en las estructuras oculares y la piel. El índice de
irritabilidad dérmica del jabón BELLOIL® fue de 0,55 considerado como ligeramente irritante.
Sin embargo, el índice de irritabilidad en la estructura ocular fue de 86,5 demostrando que el
jabón es un severo irritante. Por lo que puede afirmarse que el jabón cumple con los
requisitos indispensables para ser aceptado como un producto cosmético, que puede ser
usado para la limpieza de la piel con propiedades bactericidas.
Palabras Clave: Jabón BELLOIL®; OLEOZON® Tópico; bactericida, irritabilidad dérmica;
irritabilidad oftálmica.
Abstract
Bactericidal soaps are used for skin cleaning and acne treatment since remote times. Taking
into account the bactericidal and fungal properties of the ozonized sunflower oil (Topic
OLEOZON®) it was developed a formulation of bactericidal soap with medical action having
BELLOIL® registered trade-mark. The aim of this study is to determine the possible dermal
and ophthalmic irritability of the BELLOIL® soap. In this work, the soap formula contained
ozonized sunflower oil at 2 % as active principle was evaluated. The trial was conducted
using the techniques described in the standardized procedures established by the Center for
Research and Biological Evaluation from Pharmacy and Food Institute of Havana University,
according to Standard ISO 10993-10. The ethical principles of Laboratory Good Practices
were fulfilled in order to avoid animal suffering during the experimentation. Male rabbits with
body weight between 1.8 and 2.0 kg were used. In the skin and the ocular structures, the
effects of BELLOIL® soap were observed immediately after the application at 1, 24, 48 and
72 hours. Draize´s scale was applied to evaluate skin and ocular structures lesions. The
dermal irritability index of BELLOIL® soap was 0.55 considered as light irritant. However, the
ocular structures irritability index was 86.5 shown that the soap is a severe irritant. Therefore,
it can be assured that this product fulfils the indispensable requirements for the acceptance
as cosmetic product and it can be used as skin cleaning soap with bactericidal properties.
Keywords: BELLOIL® soap; Topic OLEOZON®; bactericidal, dermal irritability; ophthalmic
irritability.
Introducción
Los jabones son sales de ácidos grasos de larga cadena, su fabricación es muy antigua y
son conocidos y utilizados desde hace varios milenios. Con el desarrollo de la industria
cosmetológica, ha hecho posible la obtención de una amplia variedad de productos
con el fin de ser utilizados para mejorar y/o mantener la belleza corporal; dentro de
estos se encuentran los jabones, los cuales son utilizados para el cuidado y
limpieza de la piel y el cutis.1
2
Los aceites vegetales ozonizados presentan efectos germicidas por lo que son
utilizados en el tratamiento de infecciones microbianas de la piel como son las
heridas y quemaduras infectadas, fístulas, acné, y úlceras.2-4
El Centro de Investigaciones del Ozono ha elaborado una formulación de jabón marca
BELLOIL® para el tratamiento del acné y la limpieza de cutis el cual contiene como principio
activo el aceite de girasol ozonizado OLEOZON®, tomando en consideración las
propiedades bactericidas y fungicidas de los aceites vegetales ozonizados. Este jabón
presenta propiedades germicidas y oxigenantes contribuyendo a la restauración dérmica,
limpieza, estabilidad del manto ácido y cuidado de la piel. 5
Es conocido que para el uso y comercialización de este jabón se debe cumplimentar una
serie de requisitos regulatorios en concordancia con las legislaciones internacionales para
los cosméticos, los cuales son evaluados atendiendo a sus características físico-químicas, y
toxicológicas. Entre la serie de indicadores toxicológicos se encuentran los ensayos de
irritabilidad dérmica e irritabilidad oftálmica que garantizan, dentro del margen de error que
siempre trae aparejada la extrapolación del animal al hombre, que los productos que
resulten no irritantes, no lo serán potencialmente en el hombre.6
Por estas razones el presente trabajo tiene como objetivo la evaluación del potencial irritante
de la formulación del jabón bactericida marca BELLOIL® en la superficie ocular y en la piel
de conejos de experimentación.
Materiales y Métodos
Fueron realizados dos ensayos, irritabilidad dérmica e irritabilidad oftálmica. Las técnicas
utilizadas fueron realizadas en el Centro de Estudio para las Investigaciones y Evaluaciones
Biológicas del Instituto de Farmacia y Alimentos (CEIEB-IFAL) siguiendo los lineamientos
trazados por la Comunidad Económica Europea (CEE),7,8 así como en las guías de la
Organización para la Cooperación y el Desarrollo Económico (OECD)9,10 y la Norma
Internacional ISO.11
Selección de los animales
Ensayos de Irritabilidad dérmica y oftálmica
Para el ensayo de irritabilidad dérmica se emplearon 3 conejos y para el de irritabilidad
oftálmica se empleó 1 conejo, todos machos de la línea F1, procedentes del CENPALAB con
su correspondiente certificado de salud. Dichos conejos tenían un peso corporal entre 1,8 y
2,0 kg, según lo establecido OECD.9,10
Los conejos se mantuvieron en climatización con agua y comida ad libitum, con un ciclo
luz/oscuridad 12 x 12 horas, temperatura 22 ± 1°C y humedad 50 ± 5 %, según lo
establecido por la OECD.9,10
Productos utilizados para realizar los ensayos
En cada ensayo se utilizó el jabón bactericida BELLOIL® producto fabricado en el Centro de
Investigaciones del Ozono (CIO, Ciudad de La Habana), conteniendo el principio activo
aceite de girasol ozonizado un Índice de Peróxidos de 682 mmol-equiv/kg.12 El jabón
bactericida BELLOIL fue elaborado con un 2 % del principio activo aceite de girasol
ozonizado y excipientes c.s.p. 100 %.
Ensayo de irritabilidad dérmica
Para la realización de este ensayo los conejos fueron depilados a ambos lados de la
columna vertebral 24 h antes de iniciarse el ensayo. Fueron tomados todos los cuidados
para evitar que se erosionara la piel y solo aquellos animales con la piel intacta fueron
utilizados.13 Posteriormente se seleccionaron los sitios de piel adecuados para el estudio y
se aplicaron 0,5 g del producto en un sitio de piel diferente de cada animal. El producto se
mantuvo expuesto en el sitio de la piel cubierto con parche de gasa estéril y fijado con
esparadrapo hipoalérgico durante 4 horas. Los animales permanecieron por 5 horas en el
cepo para evitar su acceso al parche y que pudieran ingerir o inhalar el producto. A
3
continuación se retiraron los parches y la zona de aplicación se lavó con solución salina
fisiológica.
Se realizaron lecturas de las variables eritema y edema a los tiempo de 1, 24, 48 y 72 horas.
La irritación dérmica fue registrada de acuerdo con la tabla descrita por Draize14 y que
aparece recogida en la norma de la OECD.10 Por otra parte, de encontrarse otro signo
clínico también era registrado en los modelos habilitados al efecto.
El cálculo del Índice de Irritación Primario (IIP) se efectuó teniendo en cuenta los resultados
obtenidos a partir de las 24 h tal como se plantea en la norma ISO,11 y dividiendo la suma de
estos (resultados de 24h + 48h+ 72h), para eritema y edema entre 9, es decir, tres conejos
por tres días en que se realizaron las evaluaciones.
En caso de encontrarse alguna marcada reacción eritematosa o edematosa, se
seleccionaban los órganos relacionados con el evento así como porciones de la piel tratada
para su procesamiento histopatológico.
Ensayo de irritabilidad oftálmica
En el ensayo de irritabilidad oftálmica se aplicó una dosis de 0,1 g del producto en el fondo
del saco conjuntival del ojo derecho, que permaneció cerrado por espacio de 15 seg; en el
ojo izquierdo no se aplicó producto alguno, tomándose a manera de control. Se realizaron
evaluaciones de tres estructuras: la conjuntiva, el iris y la córnea, a los tiempos de 1, 24, 48
y 72 horas. Hay que señalar que para la realización de este ensayo se utilizó un solo conejo,
pues existía la sospecha que el sustrato a evaluar en este caso el jabón podía ser altamente
irritante.9
La irritación oftálmica fue registrada de acuerdo con la tabla descrita por Draize14 y que
aparece recogida en la norma de la OECD.9 Para el cálculo del IIO (Índice de Irritación
Ocular) se determinó la suma de todas las observaciones que se encontraron en las tres
estructuras analizadas (córnea, iris y conjuntiva), en los tiempos prefijados y este valor se
dividió por 4 (3 estructuras de 1 solo conejo, 4 tiempos de evaluación).9,11
Pesada de los animales
Loa animales fueron pesados al inicio y al cuarto día del ensayo, para determinar si había
alguna afectación en cuanto a la ganancia en peso de los mismos.
Resultados y Discusión
Ensayos de irritabilidad dérmica del jabón BELLOIL®
El día del ensayo, y durante los tres días posteriores se efectuaron lecturas de la piel para
eritema, edema y escaras evaluándose por la tabla descrita por Draize.14 Se observaron a la
hora y a las 24 horas después de haber quitado el parche reacciones eritematosas, las
cuales no fueron observadas a las 48 y 72 horas en que se realizaron las restantes lecturas.
Con los valores obtenidos mostrados en la tabla 1 se calculó el valor de índice de irritación
el cual fue de 0,55 por lo cual se cataloga al jabón BELLOILL® como Ligeramente Irritante
para la piel.
Tabla 1. Evaluación de la piel después de la aplicación del jabón BELLOILL®
Tiempo (h)
Sitio de la
Piel
1
24
48
72
1
1
1
0
0
2
2
3
0
0
3
0
1
0
0
Índice de Irritación 0,55 (Ligeramente Irritante)
(h): Horas
Hay que señalar que el Índice de Irritación pudiera llegar hasta un valor menor de 2,14,15 para
ser considerado como Ligeramente Irritante y ser aceptado para su utilización. Sin embargo,
4
este jabón ozonizado muestra un valor de 0,55, casi la cuarta parte del valor máximo para
este índice, lo cual es un resultado importante que avala la utilización de este jabón con
efecto bactericida.
Ensayos de irritabilidad oftálmica del jabón BELLOIL®
La tabla 2 presenta las diferentes lecturas realizadas de las afecciones que se encontraron
en las distintas estructuras estudiadas (conjuntiva, iris y córnea) con Jabón BELLOIL® y el
índice de irritación ocular.
Tabla 2. Evaluación oftálmica después de la aplicación del jabón BELLOILL®
OBSERVACIONES
Conejo
Horas
1
TOTAL
Conjuntiva
Iris
Córnea
1
16
10
80
106
1
24
14
10
60
84
1
48
16
10
60
86
1
72
10
60
0
70
Total sumatoria
346
INDICE DE IRRITACION OCULAR
86,5
Como puede observarse en la Tabla 2 los daños oculares fueron severos. Se presentaron
alteraciones en la conjuntiva, iris y córnea de los animales durante las 1, 24, 48 y casi las 72
horas del ensayo. El índice de irritación ocular obtenido fue de 86,5, el cual se encuentra por
encima de 10 puntos, considerándose como Irritante Severo.15 Este resultado coincide con
lo esperado para los casos de jabones, los cuales contienen sustancias tenso activas que
provocan irritación ocular.
Evaluación del peso de los animales
Se efectuaron dos pesadas de los animales al inicio y la otra al término de cada
ensayo, lo cual se muestra en las tablas 3 y 4.
Tabla 3. Pesadas efectuadas a los conejos sometidos al estudio Irritabilidad Dérmica con
jabón BELLOIL®.
Conejos
1
2
3
Peso (kg)
INICIAL
2,30
2,32
2,44
FINAL
2,42
2,45
2,58
Tabla 4. Pesadas efectuadas al conejo sometido al estudio de Irritabilidad Oftálmica con
jabón BELLOIL®.
Peso (kg)
Conejo
1
INICIAL
FINAL
2,17
2,22
No puede apreciarse en las tablas 3 y 4 disminución de peso en los animales sometidos a
ambos ensayos.
5
No se observaron otros signos clínicos en los animales tratados en los ensayos, por lo que
no fue necesaria la toma de muestras de piel para el estudio histopatológico.
Conclusiones
1. El Jabón BELLOIL® clasificó como un Ligero Irritante de la piel con un índice de
irritación de 0,55 y un Severo Irritante de las estructuras oculares con un valor de
86,5, sin observarse otros signos clínicos en los animales estudiados. Por lo que se
considera como un producto que puede utilizarse para la limpieza de la piel, sin
ponerse en contacto con los ojos.
Revisión Bibliográfica
1. Sánchez VNC, Alba FRA, Rittoles RDF, Hernández CJ, Melián RCM. Obtención de
jabón de baño utilizando fangos mineros medicinales o peloides. CU patente 22445
A1.1997.
2. Lezcano I, Molerio J, Gómez M, Contreras R, Díaz W. Actividad in vitro del
OLEOZON frente a agentes etiológicos de infecciones en la piel. Rev. CENIC C Biol
1998;29(3):209-211.
3. 22. Lezcano I, Nuñez N, Espino M, Gómez M. Antibacterial activity of ozonized
sunflower oil, OLEOZON, against Staphylococcus aureus and Staphylococcus
epidermitis. Ozone Sci Eng 2000;22:207-214.
4. Menéndez S, González R, Ledea O, Hernández F, Díaz M. Ozonoterapia aspectos
básicos y sus aplicaciones clínicas (L1/02). Ciudad Habana, Cuba: Consejo Editorial
CENIC; 2008.
5. Díaz M, Meneau RI, García K, Sánchez Y, Piña Y, García L, et al. Renovación del
Registro Jabón a base de aceite vegetal ozonizado. Marca OLEOZON®. No.R092/05, Ciudad de La Habana, Cuba;2008.
6. Manual de Indicadores Sanitarios Empleados en la Evaluación de Alimentos,
Cosméticos, Artículos de Aseo, Juguetes y Productos y tecnologías Ambientales.
Ciudad de la Habana, Cuba: 4ta Ed., Ministerio de Salud Pública, Instituto de
Nutrición e Higiene de los Alimentos;1995, p.121-124.
7. EEC. Methods for the determination of toxicity. Council Directive No. 79/831/EEC,
Annex V, Part B, Annex VII, 4.1.5;1979.(Sept.18,1979).
8. EEC. Métodos para la determinación de la toxicidad. Directiva. No. 79/831/EEC,
Parte B: NL(383 A), 107, Anexos VII y VIII. Diario Oficial de las Comunidades
Europeas;1992.
9. OECD, Organization for Economic Co-operation and Development Eye irritation
testing. OECD guidelines for testing of chemicals. Test guideline No. 405. Paris;2002.
10. OECD, Organization for Economic Co-operation and Development Acute skin
irritation and corrosive testing. Guidelines for testing of chemicals. Test guideline No.
404. Paris;2002.
11. International Organization for Standarization (ISO). ISO 10993-10. Biological
evaluation of medical devices. Test for irritation and sensitization-Part 10:European
Committee for Standardization,Suiza:ISO;1996.
12. British Pharmacopoeia. Peroxide value. 2000;Appendix XF, IA, IB.
13. Nixon GA, Tyson CA, Wertz WC. Interspecies comparisons of skin irritancy. Toxicol
Appl Pharm 1975;31:481-485.
14. Draize JH, Woodard G, Calvery HO. Methods to the study of the irritation and toxicity
of substances applied topically to the skin and mucous membranes. J Pharmacol Exp
Ther 1944;82:377-390.
15. García G. Estudios Toxicológicos de Primera Barrera. La Toxicología Alternativa.
[Tesis de Maestro en Ciencias en Toxicología Experimental]. Ciudad de la Habana,
Cuba: Instituto de farmacia y Alimentos, Universidad de La Habana; 2000.
6