Download Flyer Linfomas - Master Diagnóstica

CD163 clon MRQ-26
SOX11 clon MRQ-58
TcR gamma M1 clon gamma 3.20
CD103 clon EPR4166
LEUCEMIAS Y LINFOMAS.
Paneles de técnicas inmunohistoquímicas y moleculares
Índice
Introducción
Técnicas Inmunohistoquímicas
- Nuevos Anticuerpos
- Paneles de Anticuerpos disponibles
- Panel recomendado para la valoración inmunohistoquímica
de los linfomas de células B más frecuentes
- Anticuerpos útiles en el diagnóstico de los linfomas T
- Panel recomendado para la valoración inmunohistoquímica
de la celularidad de la médula ósea
- Panel recomendado para la valoración inmunohistoquímica
de las neoplasias de células histiocíticas y dendríticas más frecuentes.
- Listado de anticuerpos disponibles frente a antígenos linfoides
Técnicas Moleculares
- CISH (Hibridación in situ cromogénica)
- PCR
Referencias
.3
.5
.5
.7
.10
.18
.18
.19
.22
I3I
Introducción
Los informes epidemiológicos más recientes indican un aumento en la incidencia mundial de
los linfomas aunque los datos disponibles sobre la etiología concreta de cada caso aún no
son suficientemente demostrativos. No obstante y conforme se acumula información sobre
la gran diversidad de subtipos patológicos existentes el conocimiento se ha incrementado
exponencialmente, sobre todo desde que el uso estandarizado de la clasificación de la OMS
de los Tumores del Sistema Hematopoyético y Linfoide se ha convertido en norma por parte
de hematólogos clínicos, oncólogos y anatomopatólogos. Y precisamente uno de los motivos
fundamentales de este progreso ha sido el uso inmunohistoquímico de amplios paneles de
anticuerpos mono- y policlonales para poner de manifiesto rasgos celulares poco aparentes o
que pueden pasar desapercibidos en la valoración de rutina. Al fin y al cabo, la característica
fisiopatológica principal de los linfomas es que son proliferaciones clonales de linfocitos detenidos
en su diferenciación hacia células efectoras inmunes a lo largo del proceso de maduración
de los linfocitos normales. De este modo, las determinaciones inmunohistoquímicas realizadas
con diversos anticuerpos mono- y policlonales permiten identificar el linaje celular del que cada
linfoma se deriva así como la fase de desarrollo linfoide específica en la que se encuentran
detenidas las células que lo integran.
Además de su importante papel en el diagnóstico, la positividad de las células tumorales frente a
algunos anticuerpos puede ser utilizada como indicador de pronóstico en linfomas y así mismo,
otros anticuerpos pueden confirmar la presencia de moléculas diana para terapia personalizada
mediante anticuerpos específicos.
No obstante las técnicas inmunohistoquímicas tienen sus limitaciones y han de ser valoradas lo
más objetivamente posible sin olvidar que los patrones aberrantes de tinción pueden constituir
un indicio clave para el diagnóstico. De igual manera no debe olvidarse que antes de tomar
una decisión diagnóstica y de la aplicación de un panel u otro de anticuerpos, la correlación
clínico-patológica y la morfología celular de estas neoplasias deben ser escrupulosamente
consideradas. Finalmente y si los parámetros anteriormente mencionados aún son insuficientes
para alcanzar el diagnóstico, es muy conveniente aplicar cuantas técnicas moleculares sean
necesarias para identificar los cambios patológicos a nivel genético.
En definitiva, este folleto informativo que le facilita la compañía Máster Diagnóstica, además
de presentar el amplio panel de anticuerpos disponibles en su catálogo, pretende sugerir los
paneles de anticuerpos a considerar para el diagnóstico anatomopatológico de las neoplasias
linfoides más comunes.
Leucemias y Linfomas. Paneles de técnicas inmunohistoquímicas y moleculares
I4I
I5I
Técnicas Inmunohistoquímicas
Nuevos anticuerpos
TcR gamma M1 clon gamma 3.20
MAD-000608QD
· Reconoce la cadena gamma del receptor TcR de los
linfocitos T.
· En tejidos linfoides los linfocitos gamma delta representan
aproximadamente el 15% de los linfocitos T del bazo, del 2 a
4% en los ganglios linfáticos, el 1% en la cortical timica y entre
el 3 y 5% en la medular.
· Está generalmente aceptado que los heterodímeros alfa,
beta y gamma delta de los receptores TcR son mutuamente
excluyentes.
· Potencial herramienta para el diagnóstico de los linfomas T
gamma delta positivos, que en general están caracterizados
por un peor pronóstico.
SOX11 clon MRQ-58
MAD-000581QD
· Marcador de los linfomas del manto folicular Ciclina D1
negativos, que aproximadamente suponen el 5-10% de estas
neoplasias.
· Positivo en la variante blástica de linfoma del manto folicular.
· Positivo en casos aislados de leucemia/linfoma linfoblástico de
células T y B, linfoma de Hodgkin clásico, linfoma de Burkitt o
leucemias prolinfocíticas de células T.
· Ausente en el mieloma múltiple y plasmocitomas así como en
la mayor parte de las leucemias de células peludas, neoplasias
ambas que pueden sobreexpresar Ciclina D1.
CD163 clon MRQ-26
· Presente en la superficie y citoplasma de los monocitos
(expresión baja) y macrófagos maduros (expresión alta) y
elementos celulares derivados.
· Por su mayor especificidad este anticuerpo es superior a
CD68.
· Positivo en neoplasias con diferenciación monocítica e
histiocítica no habiéndose observado positividad en los
restantes tejidos normales, linfomas y carcinomas ni en la
mayoría de las neoplasias mesenquimales, incluyendo los
tumores de células foliculares dendríticas.
· Positividad constante en los histiocitos S100 positivos de
la enfermedad de Rosai-Dorfman, el sarcoma histiocítico y
las células constituyentes del angioma esplénico de células
litorales.
· Positivo en histiocitomas fibrosos atípicos, histiocitomas
fibrosos benignos, fibroxantomas atípicos y tumores de células
gigantes tenosinoviales.
MAD-000587QD
Leucemias y Linfomas. Paneles de técnicas inmunohistoquímicas y moleculares
I6I
CD103 clon EPR4166
MAD-000615QD
· Presente en los linfomas T asociados a enteropatía de tipo I.
· Marcador de la leucemia de células peludas.
· Raramente presente en el linfoma esplénico del área marginal
y con poca frecuencia en el linfoma B difuso de células
pequeñas de la pulpa roja esplénica.
· Marca los linfocitos intraepiteliales de los casos de enfermedad
celiaca refractaria de tipo 2 con peor pronóstico.
CD43 clon DF-T1
CD5 clon EP77
MAD-000606QD
MAD-000602QD
CD4 clon EP204
MAD-000600QD
CD7 clon EP132
MAD-000603QD
I7I
Paneles de Anticuerpos disponibles
Panel recomendado para la valoración inmunohistoquímica
de los linfomas de células B más frecuentes
CD19
CD20
PAX-5
CD79a
Bcl-2
Bcl6 CD10
CD21* CD23* CD5
Ciclina D1 TdT
Otros
LF
+
+
+
-
-
-
-
-
Bcl-2 negativo en el 10-15% de los casos;
negativo también en hiperplasia linfoide
LMF
+
-
-
-
-
+
+
-
SOX11 positivo en casos Ciclina D1 negativos
independientemente de la presencia o no de la
translocación BCL-1
LMGF
+
-
-
-
-
-
-
-
LLC
+
-
-
-
+
+
-
-
CD38 y ZAP70 con valor pronóstico
LLP
+
-
-
-
-
-
-
-
PAX5+
LBDCG
+
+/-
+/-
-
-
-
-
-
CD10, Bcl-6 y MUM1 – algoritmo de Hans**
EBV+ en algunos casos
LB
+
+
+
-
-
-
-
-
Mutación del gen MYC
LL
+/-
-
-
-
-
-
-
+
* permiten la valoración de las células dendríticas foliculares.
** Algoritmo de Hans para la clasificación inmunofenotipica de los LBDCG
- Tipo centro germinal
CD10+
CD10-/Bcl6+/MUM1-
- Tipo non-centro germinal
CD10-/Bcl6CD10-/Bcl6+/MUM1+
LF-linfoma folicular; LMF-linfoma del manto folicular; LMGF-linfoma del área marginal folicular; LLC-leucemia linfática crónica;
LLP- linfoma linfoplasmocítico; LBDCG-linfoma B difuso de células grandes; LB-linfoma de Burkitt; LL-linfoma linfoblástico
Anticuerpos útiles
en el diagnóstico de los linfomas T
CD2
Positividad muy constante en linfomas T CD3 negativos
CD3
Marcador general de los linfocitos T
CD4
Marcador general de los linfocitos T ayudantes. Preponderante en Micosis fungoides
CD5
Marcador general de los linfocitos T con expresión constante en leucemia linfática crónica
CD7
Frecuentemente pierde la expresión en linfomas pero también en algunos trastornos inflamatorios cutáneos
Leucemias y Linfomas. Paneles de técnicas inmunohistoquímicas y moleculares
I8I
CD8
Marcador general de los linfocitos T citotóxicos/supresores. Positivos en algunos casos de Micosis fungoide,
linfomas primarios cutáneos CD8 positivos
CD56
Marcador de los linfocitos NK. Positivo también en linfomas T asociados a enteropatías de tipo II y linfoma T
hepatoesplénico (CD4 y CD8 negativo, TIA1 positivo)
TiA1
Perforina
Granzima B
Marcadores de citotoxicidad
CD30
Positivo en todos los trastornos linfoproliferativos CD30 positivos primarios de la piel
PD-1
Positivo en la mayoría de los linfomas angioinmunoblásticos (tinción intensa; rosetas alrededor de las células
similares a las de Reed-Sternberg), linfomas de células T periféricos NOS de tipo folicular y linfomas T de células
medianas-pequeñas CD4+ cutáneos. Abundante en el síndrome de Sézary
TcRgamma
Teóricamente negativo en linfomas subcutáneos similares a paniculitis pero positivo en los linfomas cutáneos
primarios gamma delta (CD5-), asociados a enteropatías de tipo II o hepatoesplénico
Ki67
Marcador del índice mitótico
EBER1
Algunos linfomas angioinmunoblásticos, todos los linfomas NK/T extranodales de tipo nasal y sus variantes
ALK
Linfomas anaplásicos de células grandes ALK positivos
Tdt
Linfomas linfoblásticos
CD16
Marcador de los linfocitos NK. Positivo en leucemia de células NK.
CD57
Marcador de los linfocitos NK; negativo en el linfoma T/NK extranodal de tipo nasal
CD25
Positivo en linfoma/leucemia de células T del adulto
FOXP3
Positivo en linfoma/leucemia de células T del adulto
CD43
Marcador general de los linfocitos T pero con frecuente expresión aberrante en linfomas B
CD45RO
Marcador general de los linfocitos T
CD103
Positivo en los linfomas T asociados a enteropatía de tipo I
Bcl6
Positivo en linfomas de células T periféricos NOS de tipo folicular y linfomas T de células medianas-pequeñas
CD4+ cutáneos
CXCL13
Positivo en el linfoma angioinmunoblástico
CD21
CD35
CD23
Marcadores generales de las células dendríticas foliculares – dibujan arquitectura folicular restante o demuestran
disposición perivenular en los linfomas angioinmunoblásticos
EMA (MUC1)
Marcador frecuente en linfoma anaplásico ALK+
CD15
Marcador de células de Reed-Sternberg. Presencia ocasional en linfomas T periféricos NOS
CD68
Marcador de histiocitos. Muy útil para valorar la presencia de estas células en linfomas T
Bcl2
Negativo en linfomas anaplásicos ALK+
PAX5
Como marcador general de los linfocitos B; leve tinción en casos de linfomas anaplásicos de células grandes
ALK negativos
CD10
Positivo en algunos casos de linfoma angioinmunoblástico (rosetas alrededor de las células similares a las de
Reed-Sternberg) y en los linfomas T de células medias-pequeñas CD4+
Clusterina
Presente en los casos de linfomas anaplásicos de células grandes ALK+
I9I
Panel recomendado para la valoración inmunohistoquímica
de la celularidad de la médula ósea
CD20
CD3
CD38 ± cadenas ligeras Kappa/Lambda
Glicoforina A
CD71 (receptor de trasferrina)
· Más sensible y específico que la Glicoforina A.
· Positivo en precursores eritroides en la médula ósea normal o
diseritroyética.
· Positivo en la leucemia eritroblástica.
· Disminución en precursores eritroides displásicos.
· Positivo en un grupo de tumores de mama con genotipo
· luminal (más frecuentemente en carcinoma medular) y de
células basales.
Mieloperoxidasa
CD42b o CD61
CD34
CD117
Panel recomendado para la valoración inmunohistoquímica
de las neoplasias de células histiocíticas y dendríticas más frecuentes
Sarcoma histiocitico
Histiocitosis/sarcoma de
células de Langerhans
Sarcoma de células
dendríticas foliculares
Sarcoma de células
dendríticas interdigitantes
CD68
+
+
más de 50%
>50%
CD163
+
+
escasos
>50%
Lisozima
+
<50%
-
<30%
CD21
-
-
+
-
CD35
-
-
+
-
Langerina
-
+
-
-
CD1a
-
+
-
-
S100
variable
+
escasos
+
Fascina
-
+
+
+
CD4
+
escasos
-
-
Clusterina
-
escasos
+
+
Otros
CD33, CD11c
D2-40
Leucemias y Linfomas. Paneles de técnicas inmunohistoquímicas y moleculares
I 10 I
Listado disponible de anticuerpos frente a antígenos linfoides
ALK/p80
Clon 5A4
MAD-001720QD
Clon SP8
MAD-000312QD
Anexina A1
clon 29
MAD-000425QD
BCL10
clon SPM520
MAD-000538QD
BCL2
clon 100/D5
MAD-004002QD
BCL6
clon BL6.02
MAD-004023QD
BOB-1
policlonal
MAD-000231QD
Clon SP105
MAD-000547QD
·
·
·
·
·
·
·
Linfomas anaplásicos T ALK+.
Linfomas B difusos de células grandes ALK+.
Tumores inflamatorios miofibroblásticos.
Adenocarcinomas no microcíticos de pulmón.
Plasmocitomas extramedulares.
Neuroblastomas.
Carcinomas anaplásicos tiroideos y otros más infrecuentes de
riñón, esófago, colon y mama.
· Algunos sarcomas (casos raros de rabdomiosarcoma, tumores
lipogénicos, sarcoma de Ewing/PNET y leiomiosarcoma).
· Expresado principalmente en los núcleos de los linfocitos B del
centro germinal, con menor intensidad en el manto folicular y
de forma dispersa en linfocitos B interfoliculares.
· Positivo en los linfomas B y en las células de tipo L&H de la
enfermedad de Hodgkin predominio linfocítico nodular.
· Moderada positividad en el linfoma de Burkitt.
· Negativo en las células de Hodgkin y Reed-Sternberg del
linfoma de Hodgkin variante clásica y los linfomas T.
· Su sobreexpresión en el mieloma múltiple está asociada con
un pronóstico favorable.
Cadena J de las inmunoglobulinas
· Presente en los estadios iniciales de diferenciación de los
linfocitos B y se mantiene durante la maduración de los que
van a secretar IgM e IgA.
· Una proporción significativa de los depósitos mesangiales de
inmunoglobulinas en la nefropatía IgA son diméricas y positivas
frente a este anticuerpo.
· Expresión en las células de tipo L&H de la enfermedad de
Hodgkin predominio linfocítico nodular.
I 11 I
Cadena LAMBDA (IHQ+CISH)
Clon K22-Y
MAD-005078QD IHQ
Cadena KAPPA (IHQ+CISH)
Clon A21-Y
MAD-005076QD IHQ
Cadherina E
Clon EP700Y
MAD-000051QD
CD10
Clon 56C6
MAD-002022QD
CD103
Clon EPR4166
MAD-000615QD
CD117 (C-KIT)
Clon YR145
MAD-000215QD
CD11b/ITAM
Clon EP1345Y
MAD-000354QD
CD11c
Clon 5D11
MAD-000441QD
CD123
Clon 7G3
MAD-000189QD
CD138
Clon MI-15
MAD-000921QD
CD15
Clon MMA
MAD-005151QD
CD15
Clon SP159
MAD-000596QD
CD16
Clon 2H7
MAD-000912QD
CD163
Clon MRQ-26
MAD-000587QD
CD19
Clon MRQ-36
MAD-000920QD
CD1a
Clon O10
MAD-001558QD
CD2
Clon 2CO2
MAD-000908QD
CD20
Clon L26
MAD-002037QD
CD21
Clon 2G9
MAD-000380QD
CD23
Clon SP23
MAD-000333QD
CD23
Clon 1B12
MAD-005339QD
CD25 RECEPTOR ALPHA
Clon IL2R.1
MAD-004006QD
CD27
Clon 137B4
MAD-000480QD
CD278
Clon SP98
MAD-000526QD
CD3 EPSILON
Clon EP449E
MAD-000325QD
CD3
Clon EP41
MAD-000621QD
CD30
Clon BER-H2
MAD-002045QD
CD33
Clon PWS44
MAD-000135QD
CD34
Clon QDEND/10
MAD-001613QD
CD35
Clon RLB25
MAD-002053QD
CD38
Clon 38C03
MAD-004033QD
CD4
Clon EP204
MAD-000600QD
CD42b
Clon 42C01
MAD-000125QD
CD43
Clon DF-T1
MAD-000606QD
CD45 LCA
Clon 2B11&PD7/26
MAD-002066QD
CD45 RA
Clon 4KB5
MAD-000544QD
CD45 RB
Clon MEM-55
MAD-000519QD
CD45 RO
Clon UCLH-1
MAD-005035QD
Leucemias y Linfomas. Paneles de técnicas inmunohistoquímicas y moleculares
I 12 I
CD5
Clon EP77
MAD-000602QD
CD54/ICAM-1
Clon 23G12
MAD-002082QD
CD56/NCAM-1
Clon 56C04
MAD-000218QD
CD57
Clon NK1
MAD-002084QD
CD61
Clon 2F2
MAD-000133QD
CD68
Clon KP-1
MAD-002097QD
CD7
Clon EP132
MAD-000603QD
CD71 / RECEP. TRANSFERRINA
Clon 10F11
MAD-000528QD
CD79a
Clon SP18
MAD-000320QD
CD8
Clon SP16
MAD-000318QD
CDK1
Clon A17.1.1
MAD-000232QD
CDK2
Clon 2B6
MAD-000142QD
Ciclina D1
Clon SP4
MAD-000321QD
Ciclina E
Clon 13A3
MAD-005433QD
C-MYC
Clon Y69
MAD-000487QD
CLUSTERINA
Clon 7D1
MAD-000152QD
policlonal
MAD-000275QD
Clon E29
MAD-001100QD
· Marcador inmunohistoquímico específico de los tumores de
células dendríticas foliculares ya que no se expresa en el resto
de neoplasias de células dendríticas (histiocitosis de células de
Langerhans y tumores de células dendríticas interdigitantes).
· Está sobrexpresada en carcinomas de mama, colon, páncreas
y próstata.
CXCL13
· Expresado en células foliculares dendríticas de ganglios
linfáticos, amígdala y otros territorios linfoides.
· Identifica los linfomas T angioinmunoblásticos facilitando su
diagnóstico diferencial con el linfoma T periférico.
· Facilita el diagnóstico de los linfomas B primarios del sistema
nervioso central (el tejido nervioso no expresa esta quimiocina).
· Colabora en el diagnóstico de los linfomas MALT y la gastritis
crónica secundaria a infección por Helicobacter pylori así
como en biopsias de pacientes con artritis reumatoide y
síndrome de Sjögren.
· Herramienta útil para evaluar el grado de actividad de la
afectación renal en lupus eritematoso sistémico.
EMA
I 13 I
Fascina
Clon FCN01
MAD-000250QD
Clon SP97
MAD-000536QD
GATA3
Clon L50-823
MAD-000632QD
Glicoforina A
Clon GA-R2
MAD-000568QD
Glicoforina A
Clon JC159
MAD-000819QD
Granzima B
Clon GZB01
MAD-000406QD
Hemoglobina A
Clon EPR3608
MAD-000053QD
IgA
policlonal
MAD-005025QD
IgD
policlonal
MAD-005073QD
IgE
policlonal
MAD-000163QD
IgG
policlonal
MAD-005027QD
· Expresada fundamentalmente por las células reticulares,
incluyendo a las dendríticas medulares del timo, las células
reticulares interdigitantes y las células foliculares dendríticas de
los ganglios reactivos y la pulpa blanca del bazo.
· Los linfocitos, células mieloides en general y las células
plasmáticas son negativos.
· Las células de Reed-Sternberg en el linfoma de Hodgkin son
positivas para tinción con fascina.
· El virus de Epstein-Barr puede inducir la expresión de fascina
en células B.
· Su expresión en diversas neoplasias epiteliales está asociada
con peor pronóstico.
FOXP3
· Importante papel en la regulación de la respuesta inmune.
· En neoplasias mamarias, prostáticas, pancreáticas y
melanocíticas la presencia de numerosas células positivas
está asociada a peor respuesta a la quimioterapia.
· Inversamente, su sobreexpresión en carcinomas de cabeza
y cuello está correlacionada con tumores de crecimiento
locorregional limitado.
· Los linfomas MALT gástricos asociados a infección por
Helicobacter pylori con un mayor número de células
FOXP3 positivas muestran mejor respuesta al tratamiento
antibacteriano.
· En gliomas de bajo grado la expresión de FOXP3 es mayor
que en glioblastomas.
Leucemias y Linfomas. Paneles de técnicas inmunohistoquímicas y moleculares
I 14 I
IgG4
Clon MRQ-44
MAD-000579QD
IgM
policlonal
MAD-005029QD
Ki67
Clon SP6
MAD-000310QD
Langerina
Clon 12D6
MAD-000167QD
Lisozima
policlonal
MAD-001200QD
Marcador Macrófagos
Clon MAC387
MAD-005047QD
Antígeno histocompatibilidad (MHC) de clase I
Clon EPR1394Y
MAD-000472QD
Mieloperoxidasa
policlonal
MAD-005857QD
MUM1
Clon MUM1p
MAD-000470QD
· Imprescindible en el diagnóstico de enfermedades vinculadas
con la secreción aumentada de IgG4 tales como enfermedad
de Mikulicz, síndrome de Sjögren, pancreatitis autoinmune
de tipo 1, colangitis esclerosante, sialoadenitis crónica
esclerosante de la glándula submandibular o tumor de Küttner,
tiroiditis con hipotiroidismo incluyendo la tiroiditis de Riedel,
fibrosis retroperitoneal y pseudotumores inflamatorios.
· Algunos casos de enfermedad de Castleman con buena
respuesta a los corticoides pueden ser considerados
linfadenopatías relacionadas con IgG4.
· La positividad diagnóstica incluye la presencia de más de
30-50 células plasmáticas positivas por CGA.
· Proteína codificada por el gen CD207 y expresada
exclusivamente por las células de Langerhans de la epidermis
y mucosas.
· Herramienta útil para distinguir las células de Langerhans de
las restantes células dendríticas.
· MUM1/IRF4 se expresa en centrocitos maduros y en linfocitos
B postgerminales comprometidos en la diferenciación hacia
células de memoria o plasmáticas.
· También está expresado en melanocitos normales.
· Los mielomas múltiples son invariablemente positivos.
· La expresión de MUM1 en los linfomas de células B junto con
CD10 y Bcl-6 representa la base de la clasificación de Hans
para los linfomas difusos de células grandes B. Su positividad
en estos casos sugiere fenotipo no de centro germinal.
· Positivo en más del 70% de los linfomas de células grandes B
variantes mediastínica y de tipo “leg”.
· Los linfomas primarios asociados a derrames cavitarios así
como la mayoría de los linfomas primarios del sistema nervioso
cerebral son MUM1 positivos.
· Positivo en aproximadamente el 20% de los linfomas del área
marginal; por el contrario, los linfomas de pequeños linfocitos
presentan positividad heterogénea.
· También se expresa en las células de Reed-Sternberg de la
enfermedad de Hodgkin clásica mientras que es negativo en
las células L&H de la variante nodular de predominio linfocítico.
I 15 I
OCT2
policlonal
MAD-000236QD
Clon R92F6
MAD-000476QD
policlonal
MAD-005661QD
Clon MRQ-22
MAD-000352QD
· Expresado principalmente en los núcleos de los linfocitos B del
centro germinal, con menor intensidad en el manto folicular y
de forma dispersa en los linfocitos B interfoliculares.
· Positivo en los linfomas B y en las células de tipo L&H de la
enfermedad de Hodgkin predominio linfocítico nodular.
· Moderada positividad en el linfoma de Burkitt.
· En general es negativo en las células de Hodgkin y ReedSternberg del linfoma de Hodgkin variante clásica y los
linfomas T.
· Una sobreexpresión en mieloma múltiple está asociada a un
peor pronóstico.
Parvovirus B19
· Anticuerpo que reconoce específicamente células eritroides
infectadas por Parvovirus B19 y que junto con técnicas
moleculares por PCR es de utilidad en el diagnóstico de
hidrops fetal no inmune.
· En pacientes inmunodeprimidos el Parvovirus B19 puede
producir infecciones oportunistas con afectación de la médula
ósea y depleción de la celularidad eritroide.
PAX5
· Marcador pan B presente incluso en la recidiva de linfomas B
tratados con anticuerpos anti CD20 (Rituximab) .
· Leve tinción nuclear en las células de Reed-Sternberg.
· Facilita el diagnóstico del linfoma linfoplasmacítico y del linfoma
del área marginal con diferenciación plasmocitoide (positivo)
frente al diagnóstico de plasmocitoma (negativo).
· Intensa positividad en el linfoma de Burkitt.
· Positivo en carcinomas de células de Merkel y algunos
carcinomas neuroendocrinos de alto grado de malignidad .
PD-1
· Marcador de los linfocitos T ayudantes de los centros
germinales.
· Muy útil en el diagnóstico de los linfomas T
angioinmunoblásticos.
· Contribuye a diferenciar los linfomas primarios cutáneos
de células medianas/pequeñas CD4 positivos y los
pseudolinfomas T cutáneos (normalmente PD-1 positivos) de
otros tipos de linfomas T cutáneos (normalmente
PD-1 negativos).
· Está expresado en más del 50% de las células tumorales del
síndrome de Sézary (eritrodermia, adenopatías generalizadas y
linfocitos T clonales con núcleos cerebriformes).
Leucemias y Linfomas. Paneles de técnicas inmunohistoquímicas y moleculares
I 16 I
Perforina
Clon 5B10
MAD-000182QD
PU-1
Clon EPR3159Y
MAD-000052QD
Retinoblastoma/pRb
Clon 1F8
MAD-000900QD
SOX-11
Clon MRQ-58
MAD-000581QD
T-BET/T-box
Clon 4B10
MAD-000492QD
Clon EP105
MAD-000573QD
TdT
Clon SEN28
MAD-000909QD
TIA1
Clon 2G9
MAD-007056QD
TRAF1
Clon H3
MAD-000438QD
Triptasa Mastocitaria
Clon AA1
MAD-005020QD
Proteína LMP-1 del Virus de Epstein-Barr
Clon CS1-CS4
MAD-001619QD
· PU.1 es un factor de trascripción restringido al sistema
hematopoyético y expresado en la serie mieloide (monocitos,
histiocitos, y células dendríticas) y los linfocitos B.
· El linfoma de Hodgkin predominio linfocitico nodular es
consistentemente positivo para PU.1 a diferencia del linfoma
de Hodgkin clásico.
· Marcador adecuado para identificar neoplasias cutáneas
originadas en histiocitos o de células dendríticas.
· T-bet se expresa en todos los linfomas originados a partir de
linfocitos T maduros, sobre todo en los linfomas T periféricos,
y es constantemente negativo en los linfomas de sus
precursores (linfomas linfoblásticos).
· La mayoría de los linfomas NK/T de tipo nasal expresan T-bet
a nivel nuclear de forma independiente a la presencia o no del
virus de Epstein-Barr o de reordenamiento clonal del receptor
TCR.
· Entre las neoplasias derivadas de los linfocitos B, T-bet puede
estar expresado en linfomas del área marginal, leucemia
linfoblástica B y leucemia de células peludas.
TCL-1
· En la hiperplasia linfoide reactiva está expresado en la mayoría
de los linfocitos B del manto folicular y en escasos linfocitos T
del área interfolicular.
· Además está presente en numerosas neoplasias de células
B como linfomas linfoblásticos, leucemia linfática crónica,
linfomas del manto, linfomas foliculares y linfomas cutáneos
primarios.
· Su expresión en neoplasias con origen conocido en los
linfocitos T es específica pero no sensible para la leucemia
prolinfocítica de células T.
· Junto con CD38 se sobreexpresa en los linfomas de Burkitt
con translocación del gen MYC.
I 17 I
Virus herpes simplex de tipo 8
Clon 13B10
MAD-000266QD
ZAP-70
Clon 2F3.2
MAD-000353QD
· Se expresa en linfocitos T y células NK.
· Su presencia se encuentra correlacionada con el estatus de
hipermutación somática de la región variable (IGHV) del gen
de las cadenas pesadas de las inmunoglobulinas en pacientes
con leucemia linfocítica crónica (LLC) y se asocia a mayor
progresión de la leucemia y pobre respuesta al tratamiento.
· Positividad adicional en casos aislados de otros tipos de
linfomas B y T.
Leucemias y Linfomas. Paneles de técnicas inmunohistoquímicas y moleculares
I 18 I
Técnicas Moleculares
CISH ( Hibridación in situ cromogénica)
EBER1
MAD-001893QK
· Linfomas y trastornos linfoproliferativos en pacientes
inmunodeprimidos
· Neoplasias mesenquimales
· Neoplasias epiteliales
CADENA LIGERA LAMBDA
MAD-001894QK
CADENA LIGERA KAPPA
MAD-001895QK
· La expresión restringida de cadenas ligeras kappa o lambda sugiere monoclonalidad y un proceso neoplásico.
· Importante apoyo diagnóstico de linfoma frente a hiperplasia linfoide u otras linfadenitis reactivas.
· Importante herramienta en el diagnóstico de discrasias y leucemias de células plasmáticas, mieloma múltiple o plasmocitomas.
·
·
·
·
Hibridación en 1 hora
Duración de la técnica 2h 30 min.
Método manual o automatizado
Sensible y específico
I 19 I
Kits para análisis molecular por PCR del reordenamiento clonal
de los genes de las inmunoglobulinas (Ig) y receptores de
los linfocitos T (TCR)
La detección de clonalidad mediante análisis molecular por PCR de reordenamientos de los genes de las inmunoglobulinas (Ig) y
TCR, es un instrumento de gran valor en el diagnóstico de los procesos linfoproliferativos B y T y representa en muchas ocasiones
herramientas claves para el diagnóstico.
Procesos Linfoproliferativos de Células B
KIT PARA ANÁLISIS MOLECULAR DEL GEN IgH
MAD-003994BP (20 DETERMINACIONES)
· Sistema para la detección de clonalidad en procesos
linfoproliferativos de células B, mediante la amplificación de
los segmentos reordenados VDJ de la región hipervariable de
la cadena pesada de las inmunoglobulinas (IgH), empleando
múltiples cebadores consenso que hibridan con regiones
conservadas dentro de dichos genes.
· Kit para análisis molecular del gen IgH
Leucemias y Linfomas. Paneles de técnicas inmunohistoquímicas y moleculares
I 20 I
KIT PARA ANÁLISIS MOLECULAR DE LAS CADENAS
LIGERAS IgK-IgL
MAD-003999M (20 DETERMINACIONES)
· El estudio complementario de reordenamientos de las cadenas
ligeras kappa y lambda de las inmunogobulinas (IgK e IgL
respectivamente) permitiría mejorar la sensibilidad de detección
de clonalidad B, resultando esencial su análisis en la rutina
diagnóstica de estudio de clonalidad de linfomas B.
· Este kit permite la amplificación de los segmentos reordenados
Vk-Jk y de los dos tipos de reordenamientos Kde (Vk-Kde e
intrón-RSS-Kde) para IgK, así como segmentos reordenados
Vλ-Jλ de IgL, mediante múltiples cebadores consenso que
hibridan con regiones conservadas dentro de dichos genes.
· Kit para análisis molecular de las cadenas ligeras IgK-IgL
Procesos Linfoproliferativos de Células T
KIT PARA ANÁLISIS MOLECULAR DEL GEN TCRgamma
MAD-003994TP (20 DETERMINACIONES)
· El gen TCRgamma es una diana preferencial para análisis de
clonalidad T, ya que se reordena muy tempranamente durante
el desarrollo linfoide T, probablemente justo después de
TCRdelta, tanto en los precursores TCRγδ como TCRαβ.
· Este kit permite detectar la clonalidad en procesos
linfoproliferativos de origen T, mediante la amplificación de los
segmentos reordenados VJ del gen TCRgamma. empleando
múltiples cebadores dirigidos frente a regiones conservadas
que flanquean los segmentos V y J.
· Kit para análisis molecular del gen TCRgamma
I 21 I
KIT PARA ANÁLISIS MOLECULAR GEN TCRbeta
MAD-003993TP (20 DETERMINACIONES)
· El gen TCRβ se encuentra reordenado en todas las células
con fenotipo TCRαβ, y también en muchas TCRγδ y en
consecuencia el análisis por PCR de los reordenamientos del
gen TCRβ representa un estudio complementario a realizar
cuando exista una sospecha razonable de linfoma de células T
con resultados de PCR-TCRγ no concluyentes.
· La combinación de ambos estudios permitiría la detección
de clonalidad T en un elevado porcentaje de las muestras de
linfomas de células T.
· Este kit permite detectar la clonalidad en procesos
linfoproliferativos de origen T, mediante la amplificación de los
segmentos reordenados VβJβ y DβJβ del gen TCRβ. Dada la
diversidad de secuencias de estos genes TCR, se emplean
múltiples cebadores dirigidos frente a regiones conservadas
que flanquean los segmentos V, D y J, con objeto de detectar
el mayor número posible de reordenamientos clonales.
· Kit para análisis molecular del gen TCRbeta
Notas
· Todas las mezclas de amplificación se presentan en formato “monotest” e incluyen la enzima Phire® Hot Start II ADN Polimerasa y controles positivos de ADN clonal
y policlonal.
· Todas las mezclas de PCR incluyen cebadores marcados en su extremo 5’ con el fluorocromo 6-FAM, lo que permite hacer un análisis automático de fragmentos por
electroforesis capilar (compatible con ABI PRISM® 310 Genetic Analyzer, AB 3130, 3130xl, 3500 y 3500xL Genetic Analyzers).
· Todas las amplificaciones se pueden realizar con un único programa en el termociclador, permitiendo su análisis simultáneo.
· No obstante la técnica se puede realizar tanto en geles de agarosa como de poliacrilamida disponibles en el catalogo de Máster Diagnostica SL en formato “listos para
uso” y que incluyen además todos los reactivos necesarios para llevar a cabo la electroforesis. (MAD-003980M y MAD-003990M respectivamente).
Leucemias y Linfomas. Paneles de técnicas inmunohistoquímicas y moleculares
I 22 I
Referencias
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cutaneous Hodgkin lymphoma from histopathologic imitators. J Cutan Pathol. 2012 Jun;39(6):651-8
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and MUM1 are useful markers for the diagnosis of nodular lymphocyte predominant Hodgkin lymphoma. Rom J Morphol Embryol.
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Bob1 in multiple myeloma: implications for targeted therapeutics. Leuk Lymphoma. 2011 Apr;52(4):659-67
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“decision tree” approach. Appl Immunohistochem Mol Morphol. 2009 Oct;17(5):366-74
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