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Mononucleosis Infecciosa Látex
Aglutinación Látex para prueba en lámina para la determinación cualitativa y semi cuantitativa de mononucleosis
infecciosa en suero o plasma no diluido.
Referencia
IM/010
IM/012
Descripción
50 pruebas por Estuche
100 Pruebas por Estuche
Introducción
La Mononucleosis
infecciosa involucra el tejido
retículoendotelial y se cree que es causado por el virus
Epsterin Barr. Es limitada y afecta niños, jóvenes y
adultos. La Mononucleosis
Infecciosa puede ser
confundida en los síntomas básicos con otros
enfermedades. Por esta razón es necesario un
diagnostico exacto usando este procedimiento.
Niveles detectables de un anticuerpo heterotilo único
son producidos en pacientes con Mononucleosis
Infecciosas. El anticuerpo de la MI fue demostrado por
Paul y Bunnell por aglutinar en trocitos de ovejas y
caballo subsecuentemente intentando usar esta
observación como base de screening. Una prueba
especifica no fue desarrollada hasta Davison quien
modifico el proceso al introducir pasos de absorción
diferencial para eliminar la confusión entre los
anticuerpos de frossman y la enfermedad del sidro. El
procedimiento de la prueba de Davison es aceptado
como el método de referencia clásico en la detención de
Mononucleosis Infecciosa.
El estuche en Látex para determinación de
Mononucleosis Infeccioso Plasmatec proporciona una
suspensión de partículas de látex de poliestireno que
han sido recubiertos con una glicoproteína parcial
purifica de células sanguíneas rojos bovinas. Los
anticuerpos heterofilos asociados con Mononucleosis
Infecciosa se une con el correspondiente determinante
antigénico de la glicoproteína que cubre el látex debido
a la purificación de las células rojas bovinas, la
glicoproteína purificada unida a las partículas de látex,
no son aglutinadas por los niveles normalmente
encontrados en la población de UK por lo tanto no se
requieren absorción diferencial.
Utilizando la prueba Plasmatec los sueros encontrados
positivos para Mononucleosis Infecciosos que contienen
anticuerpos heterofilos asociados con Mononucleosis
Infeccioso ligada al correspondiente determinante
antigénico sobre las partículas de látex formando macro
aglutinación visible.
Presentación
1. Reactivo látex suficiente por 5°/100 pruebas
lamina ( etiqueta amarilla ) suspensión de
partículas de poliestireno látex recubiertas con
una glicoproteína parcial purificada de células
rojas bovinas.
2. Control positivo (etiqueta roja) suero humano
estabilizado, que ha de dar resulta positivos
con Reactivos de Mononucleosis Infecciosa
3. Control Negativo: (etiqueta azul) suero humano
estabilizado que ha de dar resultado negativo
con el reactivo de Mononucleosis Infecciosa.
4. Lamina plástica reutilizable
5. Pipetas mezcladores desechables
Precauciones
Diagnostico para Uso In Vitro
Los controles usados en este estuche han sido probados
por métodos aprobados por la FDA y han sido
encontrados no reactivos para la presencia del HbsAg y
anticuerpos contra HIV. Aunque estos métodos son
altamente confiables, ninguna prueba puede ofrecer
seguridad completa de que los agentes infecciosos estar
ausentes. Estos materiales, así como las muestras de los
pacientes, deben manejadas como capaces de transmitir
enfermedades infecciosas.
La FDA recomienda que tales muestras sean manejadas
como nivel 2 de Bioseguridad, del centro de control de
enfermedad.
Los reactivos de este estuche contienen azida de sodio
como preservativo.
Se ha reportado que la azida de sodio forma o azida de
plomo en las tuberías de los laboratorios y puede causar
explosión Se debe utilizar grandes cantidades de agua
en fluidos que contengan azida de sodio.
Almacenamiento
Los reactivos son estables cuando se almacena a 2- 8 °C
hasta la fecha de expiración en la etiqueta. Perdida de
una aglutinación clara en el control positivo o turbidez
extrema en alguno de los controles indican deterioro. No
Congelar
Requerimientos Adicionales
Rotador
Lámpara
Solución salina fisiológica 0.85% o 0.9% cloruro de
sodio
Tubos
Pipetas Serológicas
Preparación de las Muestras
Es recomendable que el suero o plasma este libre de
contaminación las muestras de suero deben haberse
coagulado completamente y no contener partículas o
trazas de fibrina después de la separación.
No active con calor los sueros o los controles.
Evite congelaciones y descongelaciones repetidas de las
muestras.
Las muestras de sueros son reportables hasta por dos
días almacenadas entre 2 – 9 oC y hasta por dos
semanas si son congeladas a – 20 oC
Como en todas las pruebas Serológicas, sueros
hemolizados con lipemia o turbios pueden dar resultados
incorrectos y no deben ser usados. Use solamente una
lamina seca, limpia y lavada con detergente neutro y
enjuague con abundante agua destilada.
Limitaciones
Los tiempos de reacción superiores a 3 minutos pueden
arrojar resultados falsos positivos (debido al efecto de
secado). Los sueros muy lipémicos también pueden
causar reacciones no especificas.
A pesar que la prueba de Mononucleosis Infecciosa
P l a s m a t e c es altamente sensible y especifico el
diagnostico de la Mononucleosis Infecciosa no debe ser
hecho hasta que el resultado positivo de la prueba sea
respaldado por la historia clínica del paciente, historia
hematológica y otra evidencia clínica. De igual manera
un resultado negativo no descarta la Mononucleosis
infecciosa.
Reacciones aparentemente falsas positivas han sido
asociadas con sueros de pacientes con otras
enfermedades tales como infecciones, leucemia, linfoma
de Burkitt y enfermedad del suero. 8, 9 10, 11, 12
Estuche de MI en Látex
Aunque muchos de los pacientes desarrollan anticuerpos
heterófilos a las tres semanas de iniciados los síntomas
pacientes ocasionales pueden tener hasta varios meses
para desarrollar niveles detectables. Si la prueba de MI
Plasmatec es negativa en presencia de fuerte evidencia
que sugiere diagnostico de Mononucleosis Infecciosa,
repita la prueba en muestras obtenidas a intervalos de
varios días generalmente revelaran desarrollo de las
aglutininas heterofilas. Algunos pacientes en evidencia
clínica y hematológica Mononucleosis Infecciosa
permanecerán persistentemente negativos. Una única
titulación de los anticuerpos heterofilos no puede ser
interpretada como una inclinación del estado o severidad
dela enfermedad. Sin embargo titulaciones secuenciales
de muestras pueden ser útiles en el seguimiento del
curso de la enfermedad en pacientes individuales.
Método Cualitativo
1. Lleve los reactivos y las muestras a
temperatura ambiente.
2. Mezcle suavemente el reactivo látex para
dispensar y suspender las partículas de látex.
No agite vigorosamente
3. Usando la pipeta dispensadora proporcionada,
agregue una gota (40uL) de muestras no
diluidas del paciente dentro de una celda
(circulo) separada de la lamina de vidrio.
Agregue también una gota de control positivo y
negativo en las celdas (circulo) separadas de la
lamina de vidrio.
4. Mezcle suavemente el reactivo látex y ponga
una gota cerca de la gota del suero muestra en
cada celda (circulo) separada en uso.
5. Mezcle dos gotas con el mezclador
proporcionado, cubra completamente la
superficie de cada celda (circulo)
6. Rote suavemente la lamina por 3 minutos
manualmente o en un rotador de 80 – 100 rpm
7. Después de 3 minutos examine cada celda
(círculo) la presencia o ausencia de aglutinación
Los controles positivos producirán una aglutinación
gruesa contra un fondo claro. Mientras que el
control negativo producirá una suspensión lisa y
homogénea.
Método Semi Cuantitativo
1.
Esta reacción puede ser usada para
estimar el titulo de MI usando diluciones
seriadas. La muestra de los pacientes es
diluida con salina fisiológica como sigue:
Dilución
1:2 (1 parte de suero + 1 parte de salina)
1:4 (1 parte de suero + 3 partes de salina)
1:8 (1 parte de suero + 7 partes de salina)
1:16 (1 parte de suero + 15 partes de salina)
De aquí en adelante es probado con el látex como se
describió arriba en el procedimiento del método
cualitativo.
Resultados del método cualitativo
La aglutinación identifica la presencia de anticuerpos
heterofilos en la muestra. Las muestras que no
muestran aglutinación indican la ausencia de aglutininas
heterofilas asociadas con la Mononucleosis Infecciosa.
Resultados del método Semi Cuantitativo
El titulo del anticuerpo heterófilo de la Mononucleosis
infecciosa es el reciproco de la mayor dilución que
exhibe un resultado positivo. El titulo actual de los
resultados positivos no ha sido relacionado con el estado
o severidad de la enfermedad 15, 16. Sin embargo un
incremento el titulo de la aglutinación heterófila de la
Mononucleosis infecciosa puede ser clínicamente
significante en estados tempranos de la enfermedad y
puede ayudar en el diagnostico de la MI
Valores Esperados
Los niveles detectables de anticuerpos heterofilos de MI
pueden ser usualmente esperados que ocurran entre el
6 y 10 día seguido del inicio de los síntomas. Los niveles
usualmente se incrementan a través de la segunda y
tercera semana de la enfermedad y de aquí en adelante
puede esperarse una persistencia con una gradual
disminución sobre el mes 12. Una persistencia con un
gradual disminución sobre el más 12. Los resultados
positivos deben ser observados en aproximadamente 98
% de todos los casos de MI.
Características:
Correlación: Muestras de sueros y plasma de
285individuos que han sido sometidos a laboratorio
clínico para exámenes médicos para MI. La prueba MI de
Plasmatec es un estuche comercial RBC para fue
utilizado para evaluar las muestras. 132 muestras
fueron encontradas positivas usando los 2 ensayos. Las
153 muestras restantes arrojaron un resultado negativo
utilizando los 2 ensayos. Por consiguiente estos datos
indican que la sensibilidad y la especificidad de la prueba
MI látex Plasmatec es del 100 %
REFERENCIAS
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PIM.V1
1/11/00