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INFORME DE LOS CONTENIDOS Y ACUERDOS DE LA PRIMERA
REUNIÓN DE CEN/TC 275/WG6/TAG4
CEN/TC 275- Análisis de Alimentos-Métodos horizontales
WG 6 –Contaminación Microbiana
TAG 4- Detección de Virus en alimentos
25-26 de Marzo, 2004, Edificio AFNOR, Paris
Participantes:
David Lees (DL), UK, Lidera la comisión
Celine Druez (CD), secretariado CEN
Anna Charlotte Schultz (ACS), Dinamarca
Rosina Girones (RS), España
Christina Schrader (CS), Alemania
Dietrich Maede (DM), Alemania
Jane Sellwood (JS), UK
Soizick LeGuyader (SLG), Francia
Eric Dubois (ED), Francia
Nathalie Deboosere (ND), Francia
Wim van der Poel (WP), Países Bajos
Carl-Henrick von Bonsdorff (CHB), Finlandia
Gloria Sanchez (GS), (Empresa Nestlé) Suiza
Christian Beuret (CB), Suiza
Bernard China (BC), Bélgica
Resumen de los contenidos y acuerdos:
1. Siguiendo la agenda de la reunión y tras las presentaciones de los participantes y una
presentación por parte de Celine Druez del secretariado de CEN describiendo el proceso
del desarrollo de estándares por parte de la CEN y su relación con ISO, el grupo decidió
“Desarrollar métodos estándar para la detección de virus humanos en alimentos”. No
obstante si se detectaran a lo largo del proceso problemas importantes para conseguir
este objetivo se modificaría el objetivo para desarrollar una “especificación técnica”.
2. Se acordó que el trabajo del grupo se enfocará sobre los virus patogénicos,
claramente establecidos como agentes contaminantes en alimentos y concretamente en
Norovirus (NV) causante de gastroenteritis y Virus de la Hepatitis A (HAV). Asimismo
se acordó que los métodos tienen que ser basados en PCR ya que no se dispone de otro
tipo de técnicas que sean eficientes. Los métodos basados en PCR serán en todo caso
aplicables a otros virus con pequeñas modificaciones y la inclusión de otros virus se
puede considerar posteriormente.
Se discutió el hecho de que no se dispone de información completa sobre el tipo de
usuarios que utilizarán estos estándares y de las necesidades de estos usuarios en
relación a la detección de los patógenos o de microorganismos indicadores.
3. El grupo discutió las matrices de alimentos a las cuales hay que acomodar los
métodos de detección. Se acordó clasificarlas en cuatro categorías generales: cultivos
utilizados en ensaladas (por ejemplo lechuga); frutas blandas (por ejemplo frambuesas);
moluscos bivalvos (por ejemplo ostras, C. gigas) y agua embotellada. Se discutió si el
agua debía considerarse como alimento y se acordó que por el interés de la
contaminación por virus en agua debía incluirse, aunque se realizaría una consulta a la
WG6.
4. Se analizó el trabajo realizado por la TAG3 sobre métodos de PCR para alimentos
que será útil en diversos puntos a la TAG4, aunque en algunos puntos como “extracción
de ácidos nucleicos” los métodos descritos no se consideraron adecuados por no
coincidir con los seleccionados en la actualidad por la mayor parte de los laboratorios
que desarrollan este tipo de análisis y se recomienda su modificación. También se
discutió el solapamiento con los proyectos CEN de Virología en Aguas. El líder de este
grupo estaba en la reunión como miembro de TAG4, Jane Sellwood, y al estar este
grupo trabajando únicamente en cultivo celular de enterovirus se comprobó la ausencia
de solapamiento entre los dos grupos.
5. Se realizó una discusión general sobre los métodos en uso en cada laboratorio y se
acordó un esquema general de los métodos de tipo horizontal que deberán acomodarse a
las diferentes matrices y que incluirán las etapas de: Extracción o tratamiento de la
muestra; Extracción de ácidos nucleicos; RT-PCR con un enfoque principal en PCR a
tiempo real (cuantitativa) y se discutieron los métodos de confirmación de los
resultados.
Las técnicas seleccionadas en cada etapa fueron también discutidas y incluidas en el
esquema general. RT-PCR convencional se discutirá en una futura reunión para su uso
en la tipificación de cepas detectadas. También se realizó una extensa discusión sobre
los diversos tipos de controles que se necesitan en los diferentes procesos de las técnicas
que se desarrollan.
6. Se distribuyeron tareas entre los participantes para la recogida de métodos de
laboratorio en uso e información en general sobre las diferentes etapas que facilitarán en
parte los laboratorios participantes. Los responsables de estas diversa tareas distribuirán
la información entre todos los participantes para considerar las diversas opciones y
hacer propuestas que se discutirán en la siguiente reunión.
7. El grupo discutió la ausencia de datos de validación para métodos de virus y las
posibilidades de realizar posteriormente trabajo práctico útil en el desarrollo de estos
estándares.
8. Rosina Gironés representante de España en la comisión aceptó, a petición de los
participantes, organizar la próxima reunión en la Universidad de Barcelona el próximo
15 de Octubre de 2004.