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INFORME DE LOS CONTENIDOS Y ACUERDOS DE LA PRIMERA REUNIÓN DE CEN/TC 275/WG6/TAG4 CEN/TC 275- Análisis de Alimentos-Métodos horizontales WG 6 –Contaminación Microbiana TAG 4- Detección de Virus en alimentos 25-26 de Marzo, 2004, Edificio AFNOR, Paris Participantes: David Lees (DL), UK, Lidera la comisión Celine Druez (CD), secretariado CEN Anna Charlotte Schultz (ACS), Dinamarca Rosina Girones (RS), España Christina Schrader (CS), Alemania Dietrich Maede (DM), Alemania Jane Sellwood (JS), UK Soizick LeGuyader (SLG), Francia Eric Dubois (ED), Francia Nathalie Deboosere (ND), Francia Wim van der Poel (WP), Países Bajos Carl-Henrick von Bonsdorff (CHB), Finlandia Gloria Sanchez (GS), (Empresa Nestlé) Suiza Christian Beuret (CB), Suiza Bernard China (BC), Bélgica Resumen de los contenidos y acuerdos: 1. Siguiendo la agenda de la reunión y tras las presentaciones de los participantes y una presentación por parte de Celine Druez del secretariado de CEN describiendo el proceso del desarrollo de estándares por parte de la CEN y su relación con ISO, el grupo decidió “Desarrollar métodos estándar para la detección de virus humanos en alimentos”. No obstante si se detectaran a lo largo del proceso problemas importantes para conseguir este objetivo se modificaría el objetivo para desarrollar una “especificación técnica”. 2. Se acordó que el trabajo del grupo se enfocará sobre los virus patogénicos, claramente establecidos como agentes contaminantes en alimentos y concretamente en Norovirus (NV) causante de gastroenteritis y Virus de la Hepatitis A (HAV). Asimismo se acordó que los métodos tienen que ser basados en PCR ya que no se dispone de otro tipo de técnicas que sean eficientes. Los métodos basados en PCR serán en todo caso aplicables a otros virus con pequeñas modificaciones y la inclusión de otros virus se puede considerar posteriormente. Se discutió el hecho de que no se dispone de información completa sobre el tipo de usuarios que utilizarán estos estándares y de las necesidades de estos usuarios en relación a la detección de los patógenos o de microorganismos indicadores. 3. El grupo discutió las matrices de alimentos a las cuales hay que acomodar los métodos de detección. Se acordó clasificarlas en cuatro categorías generales: cultivos utilizados en ensaladas (por ejemplo lechuga); frutas blandas (por ejemplo frambuesas); moluscos bivalvos (por ejemplo ostras, C. gigas) y agua embotellada. Se discutió si el agua debía considerarse como alimento y se acordó que por el interés de la contaminación por virus en agua debía incluirse, aunque se realizaría una consulta a la WG6. 4. Se analizó el trabajo realizado por la TAG3 sobre métodos de PCR para alimentos que será útil en diversos puntos a la TAG4, aunque en algunos puntos como “extracción de ácidos nucleicos” los métodos descritos no se consideraron adecuados por no coincidir con los seleccionados en la actualidad por la mayor parte de los laboratorios que desarrollan este tipo de análisis y se recomienda su modificación. También se discutió el solapamiento con los proyectos CEN de Virología en Aguas. El líder de este grupo estaba en la reunión como miembro de TAG4, Jane Sellwood, y al estar este grupo trabajando únicamente en cultivo celular de enterovirus se comprobó la ausencia de solapamiento entre los dos grupos. 5. Se realizó una discusión general sobre los métodos en uso en cada laboratorio y se acordó un esquema general de los métodos de tipo horizontal que deberán acomodarse a las diferentes matrices y que incluirán las etapas de: Extracción o tratamiento de la muestra; Extracción de ácidos nucleicos; RT-PCR con un enfoque principal en PCR a tiempo real (cuantitativa) y se discutieron los métodos de confirmación de los resultados. Las técnicas seleccionadas en cada etapa fueron también discutidas y incluidas en el esquema general. RT-PCR convencional se discutirá en una futura reunión para su uso en la tipificación de cepas detectadas. También se realizó una extensa discusión sobre los diversos tipos de controles que se necesitan en los diferentes procesos de las técnicas que se desarrollan. 6. Se distribuyeron tareas entre los participantes para la recogida de métodos de laboratorio en uso e información en general sobre las diferentes etapas que facilitarán en parte los laboratorios participantes. Los responsables de estas diversa tareas distribuirán la información entre todos los participantes para considerar las diversas opciones y hacer propuestas que se discutirán en la siguiente reunión. 7. El grupo discutió la ausencia de datos de validación para métodos de virus y las posibilidades de realizar posteriormente trabajo práctico útil en el desarrollo de estos estándares. 8. Rosina Gironés representante de España en la comisión aceptó, a petición de los participantes, organizar la próxima reunión en la Universidad de Barcelona el próximo 15 de Octubre de 2004.