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Transcript
Investigación Aplicada S.A. de C.V.
Soluciones en Nutrición y Salud Animal.
ENFERMEDAD DE NEWCASTLE
V. Moreno, R. Ortega, J. Chapa.
Laboratorio de Biología
La Enfermedad de Newcastle es una
enfermedad viral que ocasiona diversa
morbilidad y mortalidad en parvadas,
reduciendo la producción.
ETIOLOGÍA
La Enfermedad de Newcastle (ENC) es causada
por un virus de la familia Paramyxoviridae (PMV1), el cual afecta muchas especies de aves
domésticas y silvestres.
Las lesiones y los órganos afectados dependen
de la cepa y la virulencia del virus infectante. Los
virus lentogénicos pueden causan problemas
respiratorios leves, los mesogénicos son de
virulencia intermedia y los velogénicos causan
alta mortalidad.
DIAGNÓSTICO
Serología. Para detectar anticuerpos contra el
virus de ENC se utilizan los métodos de inhibición
de la hemoaglutinación (HI), el ensayo
inmunoenzimático (ELISA) y la precipitación en
gel de agar (PGA), para los cuales se requieren
muestras de suero no hemolizadas en
refrigeración.
Aislamiento. Permite la identificación de la cepa
ya que los embriones de pollo son muy sensibles
para la propagación del virus, siendo posible
conocer la virulencia a través de la determinación
del Tiempo Medio de Mortalidad o por medio de
pruebas in vivo (IPIC). Se requieren muestras
de órganos en refrigeración: tráquea, pulmón,
bazo, tonsilas cecales y encéfalo. El
aislamiento es una prueba sensible y específica
pero requiere de varios días para la realización
de un diagnostico de rutina.
Un método mas rápido es la Reversa
Transcriptasa – Reacción de Polimerasa en
Cadena
(RT-PCR),
seguido
por
la
electroforesis
en
gel
de
agarosa;
posteriormente
puede
hacerse
la
secuenciación del producto del PCR y el
análisis de la composición de las secuencias
de nucleótidos y aminoácidos que componen
la fracción amplificada.
La RT- PCR en tiempo real permite detectar
partículas virales en las muestras por medio la
amplificación de un segmento específico del
genoma del virus y ofrece una alta sensibilidad
con la ventaja obtener resultados antes de
terminar el ciclo. Se puede amplificar un
segmento específico que codifica para
la
proteína F, que es la base para la determinación
del grado de virulencia.
La extracción del RNA se puede realizar a
partir de fluido alantoideo, hisopos y órganos.
La ventaja del RT-PCR en comparación con el
aislamiento es que nos permite conocer si una
muestra es positiva en poco tiempo, así como el
número de amplificaciones o cantidad de virus en
una muestra sin necesidad de realizar el
aislamiento del virus. Análisis posteriores de
secuenciación darán información sobre las
características de la cepa amplificada.
PCR ENC
M-marcador
1,2,3 Muestras
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