Download Practica 2. Tincion de Gram

MANUAL DE MICROBIOLOGÍA
PRACTICA 2
Tinción de Gram
Introducción
Las bacterias son incoloras y se observan con dificultad al microscopio óptico.
Los cocos y los bacilos se pueden identificar por su forma, agrupación y por la afinidad
a los colorantes utilizados en la tinción de Gram. Las bacterias Gram positivas retienen
el color azul violeta y las bacterias Gram negativas el color rojo pálido. En general la
tinción de Gram no es aplicable a otros microorganismos como protozoos y hongos,
exceptuando a las levaduras que se tiñen como Gram positivas.
Objetivos
1. Clasificar algunas especies bacterianas en Gram positivas o Gram negativas de
acuerdo a esta tinción.
Materiales de laboratorio por equipo
1 Asa bacteriológica de aro
Fucsina
1 Microscopio
Cristal violeta
2 Mecheros
Lugol
6 Portaobjetos y cubreobjetos Alcohol-cetona
Cultivos bacterianos
Papel para lente
Aceite de inmersión
Pinzas para tubo de ensaye
Cronómetro
Material del equipo
Cerillos
Colores
Marcador indeleble o lápiz graso
Cloro
Franela
MANUAL DE MICROBIOLOGÍA
Actividad de la práctica
Preparación del frotis
Se realizará el mismo procedimiento de la práctica 2
Fijación del frotis
Se realizará el mismo procedimiento de la práctica 2
Tinción diferencial de Gram.
1. Cubrir el frotis con dos gotas de cristal violeta durante 30 segundos a 1 minuto.
2. Lavar cuidadosamente el frotis con agua de la llave o destilada para eliminar el
exceso de colorante.
3. Sacudir un poco y dejar secar, cubrir el frotis con dos gotas de lugol por 30
segundos.
4. Repetir el paso 2
5. Inclinar el portaobjeto y aplicar gota a gota el decolorante dejando que escurra
hasta que no fluya más tintura.
6. inmediatamente repetir el paso 2.
7. aplicar dos gotas de safranina durante 30 segundos.
8. repetir el paso 2, eliminar cuidadosamente el exceso de agua con una toalla de
papel y dejar secar al aire.
9. observar al microscopio.
Resultados.
MANUAL DE MICROBIOLOGÍA

Reportar las observaciones de forma, agrupación color y tamaño relativo tal
como se indica en el cuadro de resultados. Hacer los dibujos de la morfología de
cada uno de los microorganismos y colorearlos.

Comparar las observaciones realizadas con las reportadas en la literatura.
Escherichia coli
Tinción de Gram
Esquema
Descripción
Forma:
Agrupamiento
de
células:
Reacción Gram
Cuestionario
1. Explique en forma completa la teoría que explica la tinción de Gram. Investigue
otros dos ejemplos de tinción diferencial.
2. ¿Cuáles son las fuentes de error más comunes en la tinción de Gram?
MANUAL DE MICROBIOLOGÍA
Fichas catolográficas del material bibliográfico sugerido que se encuentran en la
biblioteca de la UMAR
Ficha No. 2014
CLASIFICACION 579 T759 1996
ISBN: 84-458-0371-9
Título: Tratado de microbiología / Bernanrd D. Davis ... (et.al.), trad. Diorki, S. L.
Autor:
Editorial: Barcelona : Masson, 1996
Descripción: 1145 p.
TEMAS: 1. BACTERIOLOGIA - FISIOLOGIA - GENETICA \ 2. INMUNOLOGIA VIROLOGIA - BACTERIAS \ 3. MICROBIOLOGIA - VIRUS Y MICROBIOS - ESTUDIO
Y ENSEÑANZA \ 4. PATOLOGIA - MICROORGANISMOS VIRALES –
Ficha No. 2194
CLASIFICACION 579 S713m
ISBN: 84-282-1030-6
Título: Microbiología general / Hans G. Schlegel
Autor: Schlegel, Hans G.
Editorial: Barcelona : Omega, 1997
Descripción: 654 p.
TEMAS: 1. BACTERIOLOGIA - METABOLISMO CELULAR \ 2. HONGOS MICROBIOS - BACTERIAS \ 3. BACTERIAS - ESTRUCTURA CELULAR - GENETICA
Ficha No. 2295
CLASIFICACION 616.01 B150m 2005
ISBN: 970-729-136-2
Título: Microbiología médica de Jawetz, Melnick y Adelberg / Geo F. Brooks, Janet S.
Butel, Stephen A. Morse, trad. Francisco Sánchez Fragoso
Autor: Brooks, Geo F.
Editorial: México : El Manual Moderno, 2005
Descripción: 786 p.
TEMAS: 1. INMUNOLOGIA - BACTERIOLOGIA - VIROLOGIA \ 2. MICOLOGIA PARASITOLOGIA - DIAGNOSTICO \ 3. CLINICA BACTERIOLOGICA - MICROBIOS BIOLOGIA MOLECULAR \ 4. MICROORGANISMOS - CULTIVO - CRECIMIENTO
Ficha No. 2761
CLASIFICACION 579 C159m 1979
MANUAL DE MICROBIOLOGÍA
ISBN: 968-25-0205-5
Título: Microbiología / Philip L. Carpenter, trad. José Rafael Blengo, Roberto Espinosa
Zarza, Alberto Folch Pi.
Autor: Carpenter, Philip L.
Editorial: México : Interamericana, 1979
Descripción: 518 p.
TEMAS: 1. MICROORGANISMOS - MORFOLOGIA - IDENTIFICACION \ 2.
BACTERIAS - VIRUS - METABOLISMO Y MECANISMOS GENETICOS \ 3.
PROTISTAS - PROTOZOARIOS - ALGAS \ 4. MOHOS - LEVADURAS - ECOLOGIA \
5. ENFERMEDADES INFECCIOSAS - MICROBIOLOGIA AMBIENTAL E INDUSTRIAL
Notas: Incluye índice, glosario y referencias bibliográficas
Ficha No. 2284
CLASIFICACION 636.089 692 T759
ISBN: 84-200-0766-8
Título: Tratado de microbiología veterinaria / Editado por Ernst L. Biberstein, Yuan
Chung Zee, Trad. Manuel Ramis Vergés
Autor: Biberstein, Ernst L.
Editorial: Zaragoza : Acribia, 1994
Descripción: 673 p.
TEMAS: 1. PARASITISMO - PATOLOGIA ANIMAL - MICOBIOS \ 2. BACTERIAS Y
HONGOS - VIRUS - ANALISIS \ 3. MICROBIOLOGIA VETERINARIA