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Litmus Milk
Este medio tiene como propósito el permitir diferenciar entre microorganismos que
transforman distintos substratos de la leche enzimáticamente en productos metabólicos
variados. En el medio diferencial “Litmus Milk” se pueden observar las siguientes
reacciones:

Fermentación de lactosa

Producción de gas

Formación de coágulos

Proteólisis

Reacción alcalina
El procedimiento para esta prueba consiste en la inoculación de muestra de cultivo con la
aguja de anillo, “loop”. Luego se procede a la incubación a la temperatura optima por 2448 horas (37 grados Celsius).
FERMENTACION DE LACTOSA
En la fermentación de lactosa se determina la presencia de la enzima
B-galactosidasa.
La presencia de ácido láctico es detectada por el indicador de pH litmus. Un pH neutral
será de color púrpura y un pH ácido causará un litmus rosado.
PRODUCCION DE GAS
La fermentación de lactosa puede producir CO2 y H2. Puede detectarse como fisuras o
deprendimientos en el coágulo.
REDUCCION DE LITMUS
Litmus funciona como aceptador de H+ producido durante el proceso de oxidación de
lactosa. El exceso de H es acceptado por el litmus que se torna blanco al ser reducido.
COAGULO ACIDO
Acido láctico y otros ácidos orgánicos precipitan la caseina formando un coágulo sólido
de caseinato de calcio. El mismo resulta inmóvil al ser invertido el tubo de ensayo.
COAGULO DE RENINA
Algunos organismos producen renina, una enzima que transforma a la caseina en
paracaseina, que en la presencia de calcio forma paracaseinato de calcio. Este produce un
coágulo semisólido que fluye lentamente cuando el tubo de ensayo esta inclinado.
PROTEOLISIS
Organismos incapaces de fermentar lactosa, utilizan la caseina como fuente de C
llevando a cabo proteólisis. Dicha proteólisis produce NH3, que a su vez vuelve el medio
alcalino, tornándose púrpura en la porción superior. La parte inferior se observa
translúcida y sin cuerpo, mostrando color marrón. Este resultado es consecuencia de la
hidrólisis de proteinas.
REACCION ALCALINA
La degradación parcial de caseina en cadenas polipéptidas cortas, libera NH3, que torna el
medio alcalino. El medio se queda igual o se torna azul.
*Fotos a colores en el disco compacto
A.
B.
C.
D.
E.
F.
“Acid/Reduction/Curd”
“Reduction/Curd (arrow denotes gas pocket)”
“Uninoculated Control”
“Acid Formation”
“Proteolysis of casein”
“Alkaline Reaction”