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MODULACIÓN DOPAMINÉRGICA DE CORRIENTES IÓNICAS EN NEURONAS
AISLADAS DEL GANGLIO COCLEAR DE LA RATA
Autores: Catalina Valdés Baizabal, Enrique Soto Eguibar, Ma. Del Rosario Vega y
Sáenz de Miera.
Institución: Instituto de Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla
En el complejo sináptico de la célula ciliada interna de la cóclea, se ha propuesto
que la dopamina modula la transmisión sináptica entre células ciliadas internas y
neuronas aferentes cocleares. Para conocer de qué manera ocurre dicha
modulación se cultivaron las neuronas del ganglio espiral aislándolas mediante
disociación enzimática e incubando a 37°C en una atmósfera de 95 % aire, 5 %
CO2. Se utilizaron ratas de 7 a 10 días y se realizó el registro electrofisiológico
empleando la técnica de patch clamp en la configuración de célula completa
usando protocolos de fijación de corriente y fijación de voltaje.
Probamos diferentes concentraciones de dopamina (10 nM, 100 nM, 1 µM,
10 µM y 100 µM) para construir curvas dosis-efecto para corriente entrante y para
corriente saliente a partir de registros de corrientes totales.
Para la corriente entrante encontramos que a todas las concentraciones la
dopamina produce una disminución de dicha corriente y que el efecto es
dependiente de la concentración desde el 19 ± 3 % (n=5, p=0.002) a 10nM, hasta
un 55 ± 3 % (n=5, p=0.002) a 100 µM.
Para la corriente saliente encontramos que la dopamina, a las dos
concentraciones más altas tiende a incrementar la corriente
y a las tres
concentraciones más bajas hay una tendencia a decrementar la corriente, aunque
en ambos casos los cambios no son significativos.
En
condiciones
de
fijación
de
corriente,
aplicando
dopamina
a
concentración 100 µM (n=4), hubo una disminución significativa de la amplitud del
potencial de acción de un 10 ± 3 % (p = 0.039). También hubo un aumento de la
duración al 50% que no llegó a ser significativo y la amplitud de la
posthiperpolarización tiende a disminuir de modo no significativo.
El quinpirole, agonista de la familia D2, a concentración 20 µM ejerce un
efecto similar a la dopamina. Hay una disminución significativa de la corriente
entrante (28 ± 6 %, p=0.003, n=15). En la corriente saliente produce un aumento
significativo en doce células del 33 ± 9 %, p=0.047 y en cuatro células produce
una disminución significativa (30 ± 9 %, p=0.044). Los cambios sobre la corriente
entrante persisten aún al pretratar a las células con toxina pertussis, a
concentración 500 nM, que bloquea la vía Gi/o.
Mediante el aislamiento de las células y con los resultados obtenidos
consideramos que el efecto de la dopamina a varias concentraciones y el de
quinpirole es debido a la activación de diferentes vías intracelulares, ya sea por
activación de receptores D1 acoplados a proteínas Gs o de receptores D2
acoplados a proteínas Gi/o. Es posible que a las concentraciones más altas (100
µM y 10 µM) la dopamina actúe a través de receptores de la familia D1 y a las
concentraciones más bajas (1 µM, 100nM y 10 nM) actúe a través de receptores
de la familia D2. Así mismo, consideramos que es posible la coexpresión de
receptores tanto de la familia D1 como de la familia D2 en la misma célula y en
diferentes proporciones.