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Escuela Técnica de Pando - 2016 – BIO-ORGÁNICA - 3º BG – Profª Anarella Gatto
Actividad Práctica 6 – Enzimas
Guía para fundamento teórico:
a) ¿Qué es una enzima?
b) ¿Cómo modifica la rapidez de reacción?
c) ¿Cómo actúa la enzima peroxidasa? Busca información sobre sus niveles estructurales.
d) ¿Cómo actúa la pancreatina?
e) ¿Qué factores afectan la actividad enzimática?
1) Objetivos:
- Analizar la acción de las enzimas.
- Estudiar los distintos factores que afectan la actividad enzimática.
2) Materiales:
Sustancias y soluciones:
3) Factores de riesgo y medidas de seguridad:
4) Procedimiento:
PARTE A PEROXIDASA 1
a) Analizar la naturaleza proteica de la enzima.
b) Colocar en 5 tubos de ensayo 5,0 mL de peróxido de hidrógeno (agua oxigenada). Dejar uno como
testigo.
c) Agregar simultáneamente:
 en el 2º tubo un trozo de hígado crudo,
 en el 3º un trozo de hígado cocido,
 en el 4º un trozo de hígado previamente en contacto con solución ácida,
 y en el 5º un trozo de hígado previamente en contacto con solución básica.
d) Observar.
e) Completar la siguiente tabla.
TUBO CONTENIDO
1
2
3
4
5
Escribe la ecuación que representa el proceso ocurrido:
OBSERVACIONES
Escuela Técnica de Pando - 2016 – BIO-ORGÁNICA - 3º BG – Profª Anarella Gatto
PARTE B PEROXIDASA 2
a) Introducir en un calorímetro 10,00 mL de peróxido de hidrógeno al 3% (10 volúmenes). Tapar y anotar la
temperatura inicial.
b) Colocar 2 trozos pequeños de hígado tapando de nuevo rápidamente.
c) Medir y anotar la temperatura cada 30 segundos durante 5 minutos. Construir una gráfica con estos datos.
tiempo
(minutos)
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
2,5
3,0
3,5
4,0
4,5
5,0
t (ºC)











PARTE C: PANCREATINA (digestivo investigado)
a) Tomar 8 tubos de ensayo y numerarlos del 1 al 8.
b) Colocar en el tubo 1, 30 gotas de solución de almidón y 2 gotas de lugol. Agitar y observar. Registrar los
datos en el cuadro. Este tubo se utilizará como testigo.
c) En el tubo 2 colocar 30 gotas de solución de almidón y agregar 5 gotas del digestivo, dejar actuar durante
5 minutos. Luego agregar 2 gotas de lugol. Agitar y observar. Registrar los datos en el cuadro.
d) En los tubos de ensayo 3 y 4, colocar 30 gotas de solución de almidón en cada uno.
e) En los tubos de ensayo 5 y 6, colocar 5 gotas del digestivo estudiado en cada uno.
f) Colocar en un vaso de bohemia grande los tubos 3, 4, 5, y 6 a baño maría. Cuando la temperatura sea de
aproximadamente 60,0ºC, retirar los tubos 3 y 5, y mezclar sus contenidos. Colocarlos nuevamente en el
baño y agregar 2 gotas de solución de lugol. Observar y registrar en el cuadro.
g) Repetir el paso anterior con los tubos 4 y 6 cuando la temperatura sea de 95,0ºC. Observar y registrar en
el cuadro.
h) Colocar 30 gotas de solución de almidón en cada uno de los tubos 7 y 8. Al tubo 7 agregarle 1 gota de
HCl 1,0 M y al tubo 8 agregarle 1 gota de NaOH 1,0 M. Verificar el medio con papel indicador.
i) A cada tubo (7 y 8) agregarle 5 gotas del digestivo investigado, dejar actuar por 5 minutos. Agregar 2
gotas de solución de lugol. Observar y completar el cuadro.
Tubo
Coloración
Testigo
A temperatura ambiente
A 60,0ºC
A 95,0ºC
Medio ácido (pH<7)
Medio básico (pH>7)
Entonces…
¿En qué condiciones se registra la actividad enzimática de la pancretina?